Icke-primär HCMV-infektion: Naturhistoria och immunsvar

Kvalificerade kvinnor kommer att identifieras och registreras under graviditeten eller vid förlossningen. Samtyckande mödrar kommer att testas för HCMV-DNA i saliv, urin och vaginalpinne vid förlossningen och/eller vid det första planerade besöket efter förlossningen (2-4 månader efter förlossningen). Dessutom kommer mödrar och barn att testas för förekomst av HCMV-DNA i mjölk- respektive salivprover.

Ett mamma-barn-par anses vara HCMV-DNA-positivt och är därför lämpligt för att fortsätta studien (d.v.s. 12 månaders uppföljning efter inläggning av barnet på dagis) närhelst virus-DNA detekteras i kliniska prover av antingen mamman eller barnet eller båda. Faktum är att när viralt DNA inte kan detekteras i modern men finns i saliven hos ett 2-4 månader gammalt spädbarn kan det rimligen antas att stammen är av moderns ursprung.

Studien kräver ingen modifiering av det normala mor-barn-förhållandet och deltagande mödrar kommer att uppmuntras att bete sig normalt. Däremot kommer mammor att bli ombedd att fylla i ett kort frågeformulär om grundläggande beteenden i den dagliga barnomsorgen (dvs. frekvens av handtvätt, kyssning av spädbarnet, delning av mat...).

Följande kliniska prover kommer att samlas in från mödrar och spädbarn vid angivna tider (T):

T0. Leverans:

• mor: saliv, urin, vaginal pinne, perifert blod.

T1. 2-4 månader efter leverans:

• mamma: saliv, urin, vaginal pinne, mjölk, perifert blod;
• spädbarn: salivpinne.

T2. Intagning av spädbarn på daghem:

• mamma: salivpinne, urin, vaginal pinne, perifert blod;
• spädbarn: salivpinne.

T3-T6. Var tredje månad efter intagning av barnet i ett år:

• mamma: salivpinne, urin, vaginal pinne, perifert blod;
• spädbarn: salivpinne.

Virologiska analyser:

1. HCMV DNA-detektion och kvantifiering i blod- och kroppsprover;
2. sekvensanalys av utvalda variabla virala gener och bestämning av stam(er) diversitet (hela genomet kommer också att sekvenseras när det är möjligt);
3. HCMV-isolering från insamlade prover (när HCMV-DNA-avsöndring detekteras).

Immunologiska analyser:

• antikroppssvar:

  1. IgG och IgM till hela HCMV-antigener;
  2. IgG till glykoproteinkomplex gHgLpUL128L, gHgLgO, gB;
  3. neutraliserande (Nt) Ab-blockerande infektion av epitel-/endotelceller och fibroblaster.

• T-cellssvar:

  1. ex vivo cytokinproduktion (IFNgamma/IL-2);
  2. ex vivo-proliferation efter stimulering med HCMV-antigener;
  3. differentieringstillstånd för HCMV-specifika T-celler (CCR7, CD45RA, IL7R uttryck.

Frågeformulär:

Deltagande mammor kommer också att bjudas in att fylla i ett frågeformulär om deras dagliga vanor när det gäller att ta hand om sina barn.