Ikke-primær HCMV-infektion: Naturhistorie og immunrespons

Kvalificerede kvinder vil blive identificeret og tilmeldt under graviditeten eller ved fødslen. Samtykke mødre vil blive testet for HCMV DNA i spyt, urin og vaginal podning ved fødslen og/eller ved det første planlagte post-fødselsbesøg (2-4 måneder efter fødslen). Derudover vil mødre og børn blive testet for tilstedeværelse af HCMV-DNA i henholdsvis mælke- og spytprøver.

Et mor-barn-par anses for at være HCMV-DNA-positivt og derfor egnet til at fortsætte undersøgelsen (dvs. de 12 måneders opfølgning efter barnets indlæggelse i daginstitution), når der detekteres viralt DNA i kliniske prøver af enten moderen eller barnet eller begge dele. Faktisk, når viralt DNA ikke kan påvises i moderen, men er til stede i spyttet fra et 2-4 måneder gammelt spædbarn, kan det med rimelighed antages, at stammen er af maternel oprindelse.

Undersøgelsen kræver ingen ændringer i det normale mor-barn-forhold, og deltagende mødre vil blive opfordret til at opføre sig normalt. Mødre vil dog blive bedt om at udfylde et kort spørgeskema om grundlæggende adfærd i den daglige børnepasning (dvs. hyppighed af håndvask, kysning af spædbarnet, deling af mad...).

Følgende kliniske prøver vil blive indsamlet fra mødre og spædbørn på angivne tidspunkter (T):

T0. Levering:

• mor: spyt, urin, vaginal podning, perifert blod.

T1. 2-4 måneder efter levering:

• mor: spyt, urin, vaginal podning, mælk, perifert blod;
• spædbarn: spytpind.

T2. Indlæggelse af spædbarnet i daginstitution:

• mor: spytpodning, urin, vaginal podning, perifert blod;
• spædbarn: spytpind.

T3-T6. Hver 3. måned efter indlæggelse af spædbarnet i et år:

• mor: spytpodning, urin, vaginal podning, perifert blod;
• spædbarn: spytpind.

Virologiske analyser:

1. HCMV DNA påvisning og kvantificering i blod- og kropsprøver;
2. sekvensanalyse af udvalgte variable virale gener og bestemmelse af stamme(r) diversitet (hele genomet vil også blive sekventeret, når det er muligt);
3. HCMV-isolering fra indsamlede prøver (når HCMV-DNA-udskillelse detekteres).

Immunologiske analyser:

• antistof respons:

  1. IgG og IgM til hele HCMV-antigener;
  2. IgG til glycoproteinkomplekser gHgLpUL128L, gHgLgO, gB;
  3. neutraliserende (Nt) Ab-blokerende infektion af epitel-/endotelceller og fibroblaster.

• T-celle respons:

  1. ex vivo cytokin (IFNgamma/IL-2) produktion;
  2. ex vivo-proliferation efter stimulering med HCMV-antigener;
  3. differentieringstilstand for HCMV-specifikke T-celler (CCR7, CD45RA, IL7R-ekspression.

Spørgeskema:

Deltagende mødre vil også blive inviteret til at udfylde et spørgeskema om deres daglige vaner med hensyn til omsorg for deres børn.