高リスク黒色腫患者を治療するための抗MART-1 F5リンパ球

バックグラウンド：

我々は、腫瘍浸潤リンパ球 (TIL) クローン DMF5 に由来する HLA-A*0201 限定エピトープを認識する抗 MART-1 T 細胞受容体 (TCR) を発現するようにヒト末梢血リンパ球 (PBL) を操作しました。

我々は、α鎖とβ鎖の両方をコードし、選択を行わずにこのT細胞受容体（TCR）の遺伝伝達を高効率で媒介できる単一のレトロウイルスベクターを構築しました。

HLA-A * 0201 陽性黒色腫との共培養では、抗 MART-1 F5 TCR 形質導入 T 細胞は有意な量の IFN-α を分泌しましたが、細胞株との対照共培養では有意な分泌は観察されませんでした。

抗 MART-1 F5 TCR 形質導入 PBL は、HLA-A*0201 陽性腫瘍を効率的に死滅させることができました。 正常な線維芽細胞はほとんど、またはまったく認識されませんでした。

この TCR は、転移性黒色腫患者 2 人の腫瘍退縮を媒介した MART-1 F4 TCR よりも黒色腫細胞に対して 10 倍以上反応性が高くなります。

ALVAC MART-1 ワクチンと同様に、黒色腫抗原をコードするポックスウイルスは、これらの抗原に対する患者の免疫化に成功することが示されています。

目的:

主な目的:

治療後 5 ～ 10 日および 31 ～ 35 日の血液循環中の抗腫瘍 T 細胞（コホート 1 および 2 では F5 細胞、コホートではアルデスロイキンとして定義）の存続を高める 4 つの異なる戦略の能力を評価すること3 および 4)、さらに研究するために 1 つの戦略を選択する可能性があります。

修正 E では、主な目的は、治療後 5 ～ 10 日および 31 ～ 35 日の循環中の抗腫瘍 T 細胞 (コホート 5 の F5 細胞と定義) の存続を強化する 3 つの異なる戦略の能力を評価することです。 、コホート 6 ではアルデスロイキン、コホート 7 では ALVAC MART-1 ワクチン）を選択し、さらなる研究のために 1 つの戦略を選択する可能性があります。

資格:

HLA-A*0201 陽性で 18 歳以上の患者は、以下を備えている必要があります。

• 潰瘍化した2.0mm以上の病変を伴う原発性黒色腫、または厚さ4.0mm以上の病変、または1個以上の陽性リンパ節を伴う原発性黒色腫、または局所再発、または切除された転移性疾患、外科的切除後6か月以内。
• 患者の入国後 4 週間以内の放射線検査によって証明されているように、プロトコール登録時に臨床的に無病である必要があります。
• 以前の全身療法から3週間が経過していれば、インターフェロンを含む免疫療法による補助療法を受けていた可能性があります。
• 基本検査値の正常値。

患者には次のような症状がない可能性があります。

• 眼または粘膜の黒色腫。
• 以前にMART-1で免疫化されている。
• 重篤な病気の併発。
• あらゆる形態の一次性または二次性免疫不全。
• この研究で使用された薬剤のいずれかに対する重度の過敏症;

デザイン：

白血球除去法によって得られた末梢血単核球 (PBMC) (約 1 倍 10^10 細胞) は、T 細胞の増殖を刺激するために、抗 CD3 (OKT3) およびアルデスロイキンの存在下で培養されます。

形質導入は、抗 MART-1 F5 TCR 遺伝子を含むレトロウイルス ベクター上清に約 10^8 ～ 5 倍の 10^9 細胞を曝露することによって開始されます。 これらの形質導入された細胞 (F5 細胞と呼ばれます) は増殖され、抗腫瘍活性がテストされます。

F5 細胞は、10^9 細胞の 1 倍から 10^10 細胞の 7 倍の用量で静脈内投与されます。

患者は、次の 4 つのコホートのいずれかに無作為に割り付けられます。

1. 0日目のみのF5細胞
2. 0日目にF5細胞に皮下注射し、続いて0日目と30日目にMontanide ISA-51 VG中の1.0 mg MART-1:26-35(27L)ペプチドを皮下注射した。
3. ０日目にＦ５細胞を投与し、続いて０〜４日目に１２５，０００ＩＵ／ｋｇ／日のアルデスロイキンを皮下注射した。

4. ０日目のＦ５細胞、０日目および３０日目のモンタニドＩＳＡ－５１ ＶＧ中のＭＡＲＴ－１：２６－３５（２７Ｌ）ペプチド、および０日目～４日目の１２５，０００ＩＵ／ｋｇアルデスロイキン。

   修正 E 以降、上記の 4 つのコホートは未払いとなり、患者は以下のコホートにランダムに割り当てられます。

5. ALVAC MART-1 ワクチンの皮下注射後 0 日目の F5 細胞。 ALVAC MART-1 ワクチンの 2 回目の投与は 14 日目に行われます。
6. ALVAC MART-1 ワクチンの皮下注射後の 0 日目の F5 細胞、その後 0 ～ 4 日目の 125,000 IU/kg/日のアルデスロイキンの皮下注射。 ALVAC MART-1 ワクチンの 2 回目の投与は 14 日目に行われます。
7. 0日目と14日目にALVAC MART-1ワクチン。

患者は、身体検査、胸部、腹部、骨盤のコンピューター断層撮影（CT）による完全な評価（3か月以降のみ）、および治療後35日目と3か月後に臨床検査室評価を受け、その後は6か月ごとまたは研究を中止するまで受けます。基準は満たされています。

各コホートは、2 段階の MiniMax デザインを使用して実施されます。 この設計では、各投与様式が、35 パーセントの患者において、循環分化クラスター 8 (CD8) プラス細胞の 5 パーセント以上の頻度で、移入された細胞の持続性を生み出すことができるかどうかを判断しようとします。望ましくないほど低い（15 パーセント）。不適切なスケジュールを受け入れる確率が 3 パーセント、適切なスケジュールを拒否する確率が 15 パーセントです。

最初に 22 人の患者が各コホートに登録されます。 特定のコホートで 4 つの免疫応答 (持続) が認められた場合、患者数は 39 人になります。 持続性を示す患者数が最も多いコホートは、免疫学的に活性があるとみなされ、さらなる開発に値すると考えられます。 この治療群で持続する患者が 39 名中 11 名未満の場合、それ以上の検討に値するとみなされません。

修正 E から開始して、10 人の患者が各新しいコホート (コホート 5 ～ 7) に登録されます。 3 つのアームのいずれかで、5% の CD8+ 循環細胞を有する患者が 10 人中 2 人以上いる場合、このコホートはさらに検討する価値があると考えられます。