Lymphocytes anti-MART-1 F5 pour traiter les patients atteints de mélanome à haut risque

Arrière-plan:

Nous avons conçu des lymphocytes du sang périphérique humain (PBL) pour qu'ils expriment un récepteur des lymphocytes T anti-MART-1 (TCR) qui reconnaît un épitope restreint HLA-A*0201 dérivé du clone DMF5 des lymphocytes infiltrant la tumeur (TIL).

Nous avons construit un seul vecteur rétroviral qui code à la fois pour les chaînes alpha et bêta et peut assurer le transfert génétique de ce récepteur des lymphocytes T (TCR) avec une grande efficacité sans qu'il soit nécessaire d'effectuer une sélection.

Dans les co-cultures avec un mélanome HLA-A * 0201 positif, les cellules T transduites par le TCR F5 anti-MART-1 ont sécrété une quantité significative d'IFN-, mais aucune sécrétion significative n'a été observée dans les co-cultures témoins avec des lignées cellulaires.

Les PBL transduits par F5 TCR anti-MART-1 pourraient tuer efficacement les tumeurs HLA-A*0201 positives. Il y avait peu ou pas de reconnaissance des cellules fibroblastes normales.

Ce TCR est plus de 10 fois plus réactif avec les cellules de mélanome que le TCR MART-1 F4 qui a induit la régression tumorale chez deux patients atteints de mélanome métastatique.

Il a été démontré que les poxvirus codant pour les antigènes de mélanome, similaires au vaccin ALVAC MART-1, réussissent à immuniser les patients contre ces antigènes.

Objectifs:

Objectifs principaux:

Évaluer la capacité de quatre stratégies différentes à améliorer la persistance des cellules T antitumorales dans la circulation à 5-10 jours et à 31-35 jours après le traitement (définies comme des cellules F5 dans les cohortes 1 et 2, et aldesleukine dans les cohortes 3 et 4) et éventuellement sélectionner une stratégie pour une étude plus approfondie.

Avec l'amendement E, l'objectif principal est d'évaluer la capacité de trois stratégies différentes à améliorer la persistance des lymphocytes T anti-tumoraux dans la circulation à 5-10 jours et à 31-35 jours après le traitement (définis comme des cellules F5 dans la cohorte 5 , aldesleukine dans la cohorte 6 et le vaccin ALVAC MART-1 dans la cohorte 7) et éventuellement sélectionner une stratégie pour une étude plus approfondie.

Admissibilité:

Les patients HLA-A*0201 positifs et âgés de 18 ans ou plus doivent avoir :

• mélanomes primaires avec des lésions ulcérées et supérieures ou égales à 2,0 mm, ou toute lésion supérieure ou égale à 4,0 mm d'épaisseur, ou supérieure ou égale à 1 ganglion lymphatique positif, ou récidive locale, ou maladie métastatique réséquée , dans les 6 mois suivant la résection chirurgicale.
• doit être cliniquement exempt de maladie au moment de l'entrée dans le protocole, comme documenté par des études radiologiques dans les 4 semaines suivant l'entrée du patient.
• peut avoir reçu un traitement adjuvant antérieur par immunothérapie, y compris l'interféron, tant que 3 semaines se sont écoulées depuis le traitement systémique antérieur.
• valeurs normales pour les valeurs de laboratoire de base.

Les patients peuvent ne pas avoir :

• mélanome oculaire ou muqueux;
• déjà été immunisé avec MART-1 ;
• maladies médicales majeures concomitantes ;
• toute forme d'immunodéficience primaire ou secondaire ;
• hypersensibilité sévère à l'un des agents utilisés dans cette étude ;

Conception:

Des cellules mononucléaires du sang périphérique (PBMC) obtenues par leucaphérèse (environ 1 fois 10^10 cellules) seront cultivées en présence d'anti-CD3 (OKT3) et d'aldesleukine afin de stimuler la croissance des lymphocytes T.

La transduction est initiée par exposition d'environ 10^8 à 5 fois 10^9 cellules au surnageant de vecteur rétroviral contenant les gènes anti-MART-1 F5 TCR. Ces cellules transduites (appelées cellules F5) seront multipliées et testées pour leur activité anti-tumorale.

Les cellules F5 seront administrées par voie intraveineuse à la dose de 1 fois 10^9 à 7 fois 10^10 cellules.

Les patients seront randomisés dans l'une des quatre cohortes suivantes :

1. Cellules F5 au jour 0 seules
2. Cellules F5 au jour 0 suivies de l'injection sous-cutanée de 1,0 mg de peptide MART-1:26-35(27L) dans Montanide ISA-51 VG au jour 0 et au jour 30.
3. Cellules F5 au jour 0 suivi de l'injection sous-cutanée de 125 000 UI/kg/jour d'aldesleukine aux jours 0 à 4.

4. Cellules F5 au jour 0 plus peptide MART-1:26-35(27L) dans Montanide ISA-51 VG aux jours 0 et 30, et 125 000 UI/kg d'aldesleukine aux jours 0 à 4.

   À partir de l'amendement E, les quatre cohortes ci-dessus seront fermées à la régularisation et les patients seront randomisés dans les cohortes suivantes :

5. Cellules F5 au jour 0 suivant l'injection sous-cutanée du vaccin ALVAC MART-1. La deuxième dose du vaccin ALVAC MART-1 est administrée au jour 14.
6. Cellules F5 au jour 0 après injection sous-cutanée du vaccin ALVAC MART-1, puis injection sous-cutanée de 125 000 UI/kg/jour d'aldesleukine les jours 0 à 4. La deuxième dose du vaccin ALVAC MART-1 est administrée au jour 14.
7. Vaccin ALVAC MART-1 aux jours 0 et 14.

Les patients subiront une évaluation complète avec un examen physique, une tomodensitométrie (TDM) du thorax, de l'abdomen et du bassin (3 mois et plus seulement) et une évaluation en laboratoire clinique au jour 35 et 3 mois après le traitement, puis tous les six mois ou jusqu'à la fin de l'étude. critères sont remplis.

Chacune des cohortes sera menée à l'aide d'une conception MiniMax en deux étapes. Cette conception tentera de déterminer si chacune des modalités d'administration peut produire une persistance des cellules transférées à une fréquence supérieure ou égale à 5 % du groupe circulant de différenciation 8 (CD8) plus les cellules chez 35 % des patients, par opposition à indésirablement faible (15 %), avec une probabilité de 3 % d'accepter un mauvais horaire et une probabilité de 15 % de rejeter un bon horaire.

Au départ, 22 patients seront inscrits dans chaque cohorte. Si quatre réponses immunologiques (persistance) sont notées dans une cohorte donnée, alors l'accumulation à 39 patients aura lieu. La cohorte avec le plus grand nombre de patients présentant une persistance sera considérée comme immunologiquement active et sera considérée comme digne d'un développement ultérieur. Si ce bras compte moins de 11 patients sur 39 avec persistance, il ne sera pas considéré comme digne d'être examiné plus avant.

A partir de l'amendement E, 10 patients seront enrôlés dans chaque nouvelle cohorte (cohortes 5-7). Si dans l'un des trois bras, il y a 2 patients ou plus sur 10 avec 5 % de cellules CD8+ circulantes, alors cette cohorte sera considérée comme digne d'être examinée plus avant.