고위험 흑색종 환자를 치료하기 위한 항-MART-1 F5 림프구

배경:

우리는 종양 침윤 림프구(TIL) 클론 DMF5에서 파생된 HLA-A*0201 제한된 에피토프를 인식하는 항-MART-1 T 세포 수용체(TCR)를 발현하도록 인간 말초 혈액 림프구(PBL)를 조작했습니다.

우리는 알파 및 베타 체인을 모두 인코딩하고 선택을 수행할 필요 없이 높은 효율성으로 이 T 세포 수용체(TCR)의 유전적 전달을 중재할 수 있는 단일 레트로바이러스 벡터를 구성했습니다.

HLA-A*0201 양성 흑색종과의 공동 배양에서 항-MART-1 F5 TCR 형질도입된 T 세포는 상당한 양의 IFN-을 분비했지만 세포주와의 대조군 공동 배양에서는 유의한 분비가 관찰되지 않았습니다.

항-MART-1 F5 TCR 형질도입된 PBL은 HLA-A*0201 양성 종양을 효율적으로 죽일 수 있습니다. 정상 섬유아세포 세포에 대한 인식이 거의 또는 전혀 없었습니다.

이 TCR은 전이성 흑색종 환자 2명에서 종양 퇴행을 매개한 MART-1 F4 TCR보다 흑색종 세포에 대해 10배 이상 더 반응합니다.

ALVAC MART-1 백신과 유사한 흑색종 항원을 암호화하는 폭스바이러스는 이러한 항원에 대해 환자를 성공적으로 면역화하는 것으로 나타났습니다.

목표:

주요 목표:

치료 후 5-10일 및 31-35일에 순환계에서 항종양 T 세포의 지속성을 향상시키는 4가지 다른 전략의 능력을 평가하기 위해(코호트 1 및 2에서 F5 세포로 정의되고 코호트에서 알데스류킨으로 정의됨) 3 및 4) 추가 연구를 위해 잠재적으로 하나의 전략을 선택합니다.

수정안 E의 주요 목표는 치료 후 5-10일 및 31-35일에 순환계에서 항종양 T 세포의 지속성을 향상시키는 세 가지 다른 전략의 능력을 평가하는 것입니다(코호트 5에서 F5 세포로 정의됨). , 코호트 6에서는 알데스류킨, 코호트 7에서는 ALVAC MART-1 백신) 추가 연구를 위해 잠재적으로 하나의 전략을 선택합니다.

적임:

HLA-A*0201 양성이고 18세 이상인 환자는 다음이 있어야 합니다.

• 궤양이 있고 2.0mm 이상의 병변이 있는 원발성 흑색종 또는 두께가 4.0mm 이상인 모든 병변 또는 양성 림프절 1개 이상 또는 국소 재발 또는 절제된 전이성 질환 , 수술적 절제 후 6개월 이내.
• 환자 입력 4주 이내에 방사선학적 연구에 의해 기록된 대로 프로토콜 입력 시점에 임상적으로 질병이 없어야 합니다.
• 이전의 전신 요법 이후 3주가 경과한 한, 인터페론을 포함한 면역 요법으로 사전 보조 치료를 받았을 수 있습니다.
• 기본 실험실 값에 대한 정상 값.

환자는 다음이 없을 수 있습니다.

• 안구 또는 점막 흑색종;
• 이전에 MART-1로 면역화됨;
• 동시 주요 의학적 질병;
• 모든 형태의 1차 또는 2차 면역결핍;
• 본 연구에 사용된 임의의 약제에 대한 심각한 과민성;

설계:

백혈구 성분채집술(10^10 세포의 약 1배)로 얻은 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)는 T 세포 성장을 자극하기 위해 항-CD3(OKT3) 및 알데스류킨의 존재 하에서 배양됩니다.

형질도입은 항-MART-1 F5 TCR 유전자를 포함하는 레트로바이러스 벡터 상층액에 약 10^8 ~ 5배 10^9 세포를 노출시켜 시작됩니다. 이러한 형질도입된 세포(F5 세포라고 함)는 확장되고 항종양 활성에 대해 테스트됩니다.

F5 세포는 10^9 세포의 1배에서 10^10 세포의 7배 용량으로 정맥 투여됩니다.

환자는 다음 4개 코호트 중 하나로 무작위 배정됩니다.

1. 0일째에만 F5 세포
2. 0일에 F5 세포에 이어 0일과 30일에 Montanide ISA-51 VG에 1.0 mg MART-1:26-35(27L) 펩티드를 피하 주사했습니다.
3. 0일에 F5 세포에 이어서 0-4일에 125,000 IU/kg/일 알데스류킨의 피하 주사.

4. 0일과 30일에 Montanide ISA-51 VG에 MART-1:26-35(27L) 펩타이드를 더한 0일의 F5 세포 및 0일과 30일에 125,000 IU/kg 알데스류킨.

   수정안 E부터 위의 4개 코호트가 누적되지 않고 환자가 다음 코호트에 무작위 배정됩니다.

5. ALVAC MART-1 백신의 피하 주사 후 0일째의 F5 세포. ALVAC MART-1 백신의 두 번째 용량은 14일에 제공됩니다.
6. ALVAC MART-1 백신을 피하 주사한 후 0-4일에 125,000 IU/kg/일 알데스류킨을 피하 주사한 후 0일에 F5 세포. ALVAC MART-1 백신의 두 번째 용량은 14일에 제공됩니다.
7. ALVAC MART-1 백신 0일과 14일.

환자는 신체 검사, 흉부, 복부 및 골반의 컴퓨터 단층 촬영(CT)(3개월 이후에만) 및 임상 실험실 평가를 통해 완전한 평가를 받게 됩니다. 기준이 충족됩니다.

각 코호트는 2단계 MiniMax 디자인을 사용하여 수행됩니다. 이 디자인은 각각의 투여 양식이 순환 분화 클러스터 8(CD8) 플러스 세포의 5% 이상의 빈도로 전달된 세포의 지속성을 생성할 수 있는지 여부를 결정하려고 시도할 것입니다. 좋지 않은 일정을 수용할 확률은 3%, 좋은 일정을 거부할 확률은 15%로 바람직하지 않게 낮습니다(15%).

처음에는 22명의 환자가 각 코호트에 등록됩니다. 주어진 코호트에서 4개의 면역학적 반응(지속성)이 기록되는 경우, 39명의 환자에 대한 발생이 일어날 것입니다. 지속성을 나타내는 환자 수가 가장 많은 코호트는 면역학적으로 활성인 것으로 간주되며 추가 개발이 필요한 것으로 간주됩니다. 이 팔이 39명의 환자 중 지속성을 보이는 환자가 11명 미만이면 더 이상 고려할 가치가 없는 것으로 간주됩니다.

개정 E부터 시작하여 10명의 환자가 각각의 새로운 코호트(코호트 5-7)에 등록됩니다. 3개의 팔 중 하나에 5% CD8+ 순환 세포가 있는 10명의 환자 중 2명 이상이 있는 경우 이 코호트는 추가로 고려할 가치가 있는 것으로 간주됩니다.