Анти-MART-1 F5-лимфоциты для лечения пациентов с меланомой высокого риска

Фон:

Мы сконструировали лимфоциты периферической крови человека (PBL) для экспрессии анти-MART-1 T-клеточного рецептора (TCR), который распознает рестрицированный эпитоп HLA-A*0201, полученный из клона DMF5 инфильтрирующих опухоль лимфоцитов (TIL).

Мы сконструировали единственный ретровирусный вектор, который кодирует как альфа-, так и бета-цепи и может опосредовать генетический перенос этого Т-клеточного рецептора (TCR) с высокой эффективностью без необходимости проведения какой-либо селекции.

В кокультурах с HLA-A*0201-положительной меланомой Т-клетки, трансдуцированные анти-MART-1 F5 TCR, секретировали значительное количество IFN-, но в контрольных кокультурах с клеточными линиями значительной секреции не наблюдалось.

PBL, трансдуцированные анти-MART-1 F5 TCR, могут эффективно уничтожать HLA-A*0201-положительные опухоли. Распознавание нормальных клеток фибробластов было незначительным или отсутствовало вообще.

Этот TCR более чем в 10 раз более реактивен с клетками меланомы, чем TCR MART-1 F4, который опосредовал регрессию опухоли у двух пациентов с метастатической меланомой.

Было показано, что поксвирусы, кодирующие антигены меланомы, подобные вакцине ALVAC MART-1, успешно иммунизируют пациентов против этих антигенов.

Цели:

Основные цели:

Чтобы оценить способность четырех различных стратегий повышать персистенцию противоопухолевых Т-клеток в кровотоке через 5–10 дней и через 31–35 дней после лечения (определяемых как клетки F5 в когортах 1 и 2 и альдеслейкин в когортах 3 и 4) и потенциально выбрать одну стратегию для дальнейшего изучения.

Основная цель Поправки E состоит в том, чтобы оценить способность трех различных стратегий повышать персистенцию противоопухолевых Т-клеток в кровотоке через 5–10 дней и через 31–35 дней после лечения (определяется как клетки F5 в когорте 5). , альдеслейкин в когорте 6 и вакцина ALVAC MART-1 в когорте 7) и, возможно, выбрать одну стратегию для дальнейшего изучения.

Право на участие:

Пациенты с положительным результатом на HLA-A*0201 в возрасте 18 лет и старше должны иметь:

• первичные меланомы с изъязвлениями и размером более или равные 2,0 мм, или любые поражения толщиной более или равные 4,0 мм, или более или равные 1 положительному лимфатическому узлу, или местный рецидив, или удаленное метастатическое заболевание , в течение 6 месяцев после хирургической резекции.
• должны быть клинически свободны от заболеваний на момент включения в протокол, что подтверждено рентгенологическими исследованиями в течение 4 недель после включения пациента.
• возможно, ранее проводилось адъювантное лечение иммунотерапией, включая интерферон, в течение 3 недель после предшествующей системной терапии.
• нормальные значения основных лабораторных показателей.

У пациентов может отсутствовать:

• глазная или слизистая меланома;
• ранее были иммунизированы MART-1;
• сопутствующие серьезные медицинские заболевания;
• любая форма первичного или вторичного иммунодефицита;
• тяжелая гиперчувствительность к любому из агентов, используемых в этом исследовании;

Дизайн:

Мононуклеарные клетки периферической крови (PBMC), полученные с помощью лейкафереза ​​(примерно 1×10^10 клеток), будут культивировать в присутствии анти-CD3 (OKT3) и альдеслейкина для стимуляции роста Т-клеток.

Трансдукция инициируется воздействием приблизительно от 10 8 до 5 х 10 9 клеток на супернатант ретровирусного вектора, содержащий анти-MART-1 гены F5 TCR. Эти трансдуцированные клетки (называемые клетками F5) будут размножены и проверены на их противоопухолевую активность.

Клетки F5 будут вводиться внутривенно в дозе от 1×10^9 до 7×10^10 клеток.

Пациенты будут рандомизированы в одну из следующих четырех групп:

1. Клетки F5 только в день 0
2. Клетки F5 в день 0 с последующей подкожной инъекцией 1,0 мг пептида MART-1:26-35(27L) в Montanide ISA-51 VG в день 0 и день 30.
3. Клетки F5 в день 0 с последующей подкожной инъекцией 125000 МЕ/кг/день альдеслейкина в дни 0-4.

4. Клетки F5 на 0-й день плюс пептид MART-1:26-35(27L) в Montanide ISA-51 VG на 0-й и 30-й день и 125000 МЕ/кг альдеслейкина на 0-4-й день.

   Начиная с поправки E, четыре указанные выше когорты будут закрыты для набора, и пациенты будут рандомизированы в следующие когорты:

5. Клетки F5 на 0-й день после подкожной инъекции вакцины ALVAC MART-1. Вторая доза вакцины ALVAC MART-1 вводится на 14-й день.
6. Клетки F5 в день 0 после подкожной инъекции вакцины ALVAC MART-1, а затем подкожной инъекции 125000 МЕ/кг/день альдеслейкина в дни 0-4. Вторая доза вакцины ALVAC MART-1 вводится на 14-й день.
7. Вакцина ALVAC MART-1 в дни 0 и 14.

Пациенты будут проходить полное обследование с физическим осмотром, компьютерной томографией (КТ) грудной клетки, брюшной полости и таза (только через 3 месяца и позже) и клинической лабораторной оценкой на 35-й день и через 3 месяца после лечения, а затем каждые шесть месяцев или до окончания исследования. критерии соблюдены.

Каждая когорта будет проводиться с использованием двухэтапного дизайна MiniMax. Этот дизайн попытается определить, может ли каждый из способов введения вызывать персистенцию перенесенных клеток с частотой, превышающей или равной 5 процентам циркулирующего кластера дифференцировки 8 (CD8) плюс клетки у 35 процентов пациентов, в отличие от нежелательно низкое (15 %), с 3-процентной вероятностью принятия плохого графика и 15-процентной вероятностью отказа от хорошего графика.

Первоначально в каждую когорту будут включены 22 пациента. Если в данной когорте отмечаются четыре иммунологических ответа (персистенция), то будет иметь место прирост до 39 пациентов. Когорта с наибольшим количеством пациентов, проявляющих персистенцию, будет считаться иммунологически активной и заслуживающей дальнейшего развития. Если в этой группе менее 11 из 39 пациентов с персистенцией, она не будет считаться заслуживающей дальнейшего рассмотрения.

Начиная с поправки E, в каждую новую когорту (когорты 5-7) будет включено 10 пациентов. Если в любой из трех групп есть 2 или более из 10 пациентов с 5% циркулирующих клеток CD8+, то эта когорта будет считаться заслуживающей дальнейшего рассмотрения.