Anti-MART-1 F5-lymfocytter til behandling af højrisiko melanompatienter

Baggrund:

Vi har konstrueret humane perifere blodlymfocytter (PBL'er) til at udtrykke en anti-MART-1 T-celle receptor (TCR), der genkender en HLA-A*0201 begrænset epitop afledt af den tumorinfiltrerende lymfocytter (TIL) klon DMF5.

Vi konstruerede en enkelt retroviral vektor, der koder for både alfa- og beta-kæder og kan mediere genetisk overførsel af denne T-cellereceptor (TCR) med høj effektivitet uden behov for at udføre nogen selektion.

I co-kulturer med HLA-A*0201-positivt melanom udskilte anti-MART-1 F5 TCR-transducerede T-celler en betydelig mængde IFN-, men ingen signifikant sekretion blev observeret i kontrol-co-kulturer med cellelinjer.

Den anti-MART-1 F5 TCR-transducerede PBL kunne effektivt dræbe HLA-A*0201-positive tumorer. Der var ringe eller ingen genkendelse af normale fibroblastceller.

Denne TCR er over 10 gange mere reaktiv med melanomceller end MART-1 F4 TCR, der medierede tumorregression hos to patienter med metastatisk melanom.

Poxvirus, der koder for melanomantigener, svarende til ALVAC MART-1-vaccinen, har vist sig med succes at immunisere patienter mod disse antigener.

Mål:

Primære mål:

At evaluere evnen af ​​fire forskellige strategier til at øge persistensen af ​​antitumor-T-celler i kredsløbet 5-10 dage og 31-35 dage efter behandling (defineret som F5-celler i kohorte 1 og 2, og aldesleukin i kohorter 3 og 4) og potentielt vælge en strategi til videre undersøgelse.

Med ændringsforslag E er det primære formål at evaluere evnen af ​​tre forskellige strategier til at forbedre persistensen af ​​antitumor-T-celler i kredsløbet 5-10 dage og 31-35 dage efter behandling (defineret som F5-celler i kohorte 5) , aldesleukin i kohorte 6 og ALVAC MART-1-vaccine i kohorte 7) og potentielt vælge en strategi til yderligere undersøgelse.

Berettigelse:

Patienter, der er HLA-A*0201 positive og 18 år eller ældre, skal have:

• primære melanomer med læsioner, der er ulcererede og større end eller lig med 2,0 mm, eller læsioner, der er større end eller lig med 4,0 mm i tykkelse, eller større end eller lig med 1 positiv lymfeknude, eller lokalt tilbagefald eller resekeret metastatisk sygdom , inden for 6 måneder efter kirurgisk resektion.
• skal være klinisk sygdomsfri på tidspunktet for indtastning af protokol som dokumenteret ved røntgenologiske undersøgelser inden for 4 uger efter patientens indtræden.
• kan have haft tidligere adjuverende behandling med immunterapi, inklusive interferon, så længe der er gået 3 uger siden tidligere systemisk behandling.
• normale værdier for grundlæggende laboratorieværdier.

Patienter har muligvis ikke:

• okulært eller slimhindemelanom;
• tidligere blevet immuniseret med MART-1;
• samtidige større medicinske sygdomme;
• enhver form for primær eller sekundær immundefekt;
• svær overfølsomhed over for et hvilket som helst af midlerne anvendt i denne undersøgelse;

Design:

Perifere mononukleære blodceller (PBMC) opnået ved leukaferese (ca. 1 gange 10^10 celler) vil blive dyrket i nærvær af anti-CD3 (OKT3) og aldesleukin for at stimulere T-cellevækst.

Transduktion initieres ved eksponering af ca. 10^8 til 5 gange 10^9 celler for retroviral vektorsupernatant indeholdende anti-MART-1 F5 TCR-generne. Disse transducerede celler (kaldet F5-celler) vil blive udvidet og testet for deres antitumoraktivitet.

F5-celler vil blive administreret intravenøst ​​i en dosis på 1 gange 10^9 til 7 gange 10^10 celler.

Patienterne vil blive randomiseret i en af ​​følgende fire kohorter:

1. F5-celler alene på dag 0
2. F5-celler på dag 0 efterfulgt af den subkutane injektion af 1,0 mg MART-1:26-35(27L)-peptid i Montanide ISA-51 VG på dag 0 og dag 30.
3. F5-celler på dag 0 efterfulgt af den subkutane injektion af 125.000 IE/kg/dag aldesleukin på dag 0-4.

4. F5-celler på dag 0 plus MART-1:26-35(27L) peptid i Montanide ISA-51 VG på dag 0 og dag 30, og 125.000 IE/kg aldesleukin på dag 0-4.

   Fra og med ændringsforslag E vil de fire ovenstående kohorter være lukket for optjening, og patienter vil blive randomiseret til følgende kohorter:

5. F5-celler på dag 0 efter subkutan injektion af ALVAC MART-1-vaccine. Anden dosis ALVAC MART-1-vaccine gives på dag 14.
6. F5-celler på dag 0 efter subkutan injektion af ALVAC MART-1-vaccine og derefter subkutan injektion af 125.000 IE/kg/dag aldesleukin på dag 0-4. Anden dosis ALVAC MART-1-vaccine gives på dag 14.
7. ALVAC MART-1-vaccine på dag 0 og 14.

Patienterne vil gennemgå fuldstændig evaluering med fysisk undersøgelse, computertomografi (CT) af brystet, maven og bækkenet (kun 3 måneder og derefter) og klinisk laboratorieevaluering på dag 35 og 3 måneder efter behandlingen og derefter hver sjette måned eller indtil undersøgelsen stopper. kriterier er opfyldt.

Hver af kohorterne vil blive udført ved hjælp af et to-trins MiniMax-design. Dette design vil forsøge at bestemme, om hver af administrationsmodaliteterne kan producere persistens af de overførte celler ved en frekvens på mere end eller lig med 5 procent af cirkulerende cluster of differentiation 8 (CD8) plus celler hos 35 procent af patienterne i modsætning til uønsket lav (15 procent), med 3 procents sandsynlighed for at acceptere en dårlig tidsplan og 15 procent sandsynlighed for at afvise en god tidsplan.

I første omgang vil 22 patienter blive indskrevet i hver kohorte. Hvis der noteres fire immunologiske responser (persistens) i en given kohorte, vil der ske tillæg til 39 patienter. Den kohorte med det højeste antal patienter, der udviser persistens, vil blive betragtet som immunologisk aktive og vil blive betragtet som værdig til videreudvikling. Hvis denne arm har færre end 11 ud af 39 patienter med persistens, vil den ikke blive betragtet som værdig til yderligere overvejelse.

Fra og med ændringsforslag E vil 10 patienter blive indskrevet i hver ny kohorte (kohorte 5-7). Hvis der på nogen af ​​de tre arme er 2 eller flere af 10 patienter med 5 % CD8+ cirkulerende celler, vil denne kohorte blive betragtet som værdig til yderligere overvejelse.