Anti-MART-1-F5-Lymphozyten zur Behandlung von Hochrisiko-Melanompatienten

Hintergrund:

Wir haben menschliche periphere Blutlymphozyten (PBLs) so konstruiert, dass sie einen Anti-MART-1-T-Zellrezeptor (TCR) exprimieren, der ein HLA-A*0201-beschränktes Epitop erkennt, das vom Klon DMF5 der tumorinfiltrierenden Lymphozyten (TIL) stammt.

Wir haben einen einzelnen retroviralen Vektor konstruiert, der sowohl Alpha- als auch Betaketten kodiert und den genetischen Transfer dieses T-Zell-Rezeptors (TCR) mit hoher Effizienz vermitteln kann, ohne dass eine Selektion erforderlich ist.

In Co-Kulturen mit HLA-A*0201-positivem Melanom sezernierten Anti-MART-1-F5-TCR-transduzierte T-Zellen erhebliche Mengen an IFN-, in Kontroll-Co-Kulturen mit Zelllinien wurde jedoch keine signifikante Sekretion beobachtet.

Das mit Anti-MART-1 F5 TCR transduzierte PBL könnte HLA-A*0201-positive Tumoren effizient abtöten. Es wurden kaum oder keine normalen Fibroblastenzellen erkannt.

Dieser TCR reagiert mehr als zehnmal stärker auf Melanomzellen als der MART-1-F4-TCR, der bei zwei Patienten mit metastasiertem Melanom eine Tumorregression vermittelte.

Es wurde gezeigt, dass Pockenviren, die für Melanomantigene kodieren, ähnlich wie der ALVAC MART-1-Impfstoff, Patienten erfolgreich gegen diese Antigene immunisieren.

Ziele:

Hauptziele:

Bewertung der Fähigkeit von vier verschiedenen Strategien, die Persistenz von Antitumor-T-Zellen im Kreislauf 5–10 Tage und 31–35 Tage nach der Behandlung zu verbessern (definiert als F5-Zellen in den Kohorten 1 und 2 und Aldesleukin in den Kohorten). 3 und 4) und wählen Sie möglicherweise eine Strategie für die weitere Untersuchung aus.

Mit Änderung E besteht das Hauptziel darin, die Fähigkeit von drei verschiedenen Strategien zu bewerten, die Persistenz von Antitumor-T-Zellen im Kreislauf 5–10 Tage und 31–35 Tage nach der Behandlung zu verbessern (definiert als F5-Zellen in Kohorte 5). , Aldesleukin in Kohorte 6 und ALVAC MART-1-Impfstoff in Kohorte 7) und möglicherweise eine Strategie für weitere Studien auswählen.

Teilnahmeberechtigung:

Patienten, die HLA-A*0201-positiv sind und mindestens 18 Jahre alt sind, müssen Folgendes haben:

• Primäre Melanome mit Läsionen, die ulzeriert sind und größer oder gleich 2,0 mm sind, oder Läsionen, die größer oder gleich 4,0 mm dick sind oder größer oder gleich 1 positiver Lymphknoten sind, oder ein lokales Rezidiv oder eine resezierte metastatische Erkrankung , innerhalb von 6 Monaten nach der chirurgischen Resektion.
• muss zum Zeitpunkt der Aufnahme in das Protokoll klinisch krankheitsfrei sein, wie durch radiologische Untersuchungen innerhalb von 4 Wochen nach Aufnahme des Patienten dokumentiert.
• möglicherweise zuvor eine adjuvante Behandlung mit Immuntherapie, einschließlich Interferon, erhalten haben, solange seit der vorherigen systemischen Therapie 3 Wochen vergangen sind.
• Normalwerte für grundlegende Laborwerte.

Patienten haben möglicherweise nicht:

• Augen- oder Schleimhautmelanom;
• zuvor mit MART-1 immunisiert worden sind;
• gleichzeitige schwere medizinische Erkrankungen;
• jede Form von primärem oder sekundärem Immundefekt;
• schwere Überempfindlichkeit gegen einen der in dieser Studie verwendeten Wirkstoffe;

Design:

Durch Leukapherese gewonnene mononukleäre Zellen des peripheren Blutes (PBMC) (ungefähr 1 mal 10^10 Zellen) werden in Gegenwart von Anti-CD3 (OKT3) und Aldesleukin kultiviert, um das T-Zell-Wachstum zu stimulieren.

Die Transduktion wird eingeleitet, indem etwa 10^8 bis 5 mal 10^9 Zellen dem retroviralen Vektorüberstand ausgesetzt werden, der die Anti-MART-1-F5-TCR-Gene enthält. Diese transduzierten Zellen (F5-Zellen genannt) werden vermehrt und auf ihre Antitumoraktivität getestet.

F5-Zellen werden intravenös in einer Dosis von 1 mal 10^9 bis 7 mal 10^10 Zellen verabreicht.

Die Patienten werden randomisiert einer der folgenden vier Kohorten zugeteilt:

1. F5-Zellen allein am Tag 0
2. F5-Zellen am Tag 0, gefolgt von der subkutanen Injektion von 1,0 mg MART-1:26-35(27L)-Peptid in Montanide ISA-51 VG am Tag 0 und Tag 30.
3. F5-Zellen am Tag 0, gefolgt von der subkutanen Injektion von 125.000 IE/kg/Tag Aldesleukin an den Tagen 0–4.

4. F5-Zellen am Tag 0 plus MART-1:26-35(27L)-Peptid in Montanide ISA-51 VG am Tag 0 und Tag 30 und 125.000 IU/kg Aldesleukin an den Tagen 0-4.

   Ab Änderung E werden die vier oben genannten Kohorten für die Rekrutierung geschlossen und die Patienten werden randomisiert den folgenden Kohorten zugeteilt:

5. F5-Zellen am Tag 0 nach subkutaner Injektion des ALVAC MART-1-Impfstoffs. Die zweite Dosis des ALVAC MART-1-Impfstoffs wird am 14. Tag verabreicht.
6. F5-Zellen am Tag 0 nach subkutaner Injektion des ALVAC MART-1-Impfstoffs und anschließender subkutaner Injektion von 125.000 IE/kg/Tag Aldesleukin an den Tagen 0–4. Die zweite Dosis des ALVAC MART-1-Impfstoffs wird am 14. Tag verabreicht.
7. ALVAC MART-1-Impfstoff an den Tagen 0 und 14.

Die Patienten werden einer vollständigen Untersuchung mit körperlicher Untersuchung, Computertomographie (CT) von Brust, Bauch und Becken (nur 3 Monate und danach) und einer klinischen Laboruntersuchung am 35. Tag und 3 Monate nach der Behandlung und dann alle sechs Monate oder bis zum Studienende unterzogen Kriterien erfüllt sind.

Jede der Kohorten wird mit einem zweistufigen MiniMax-Design durchgeführt. Mit diesem Entwurf soll ermittelt werden, ob jede der Verabreichungsmodalitäten bei 35 Prozent der Patienten eine Persistenz der übertragenen Zellen mit einer Häufigkeit von mindestens 5 Prozent der zirkulierenden Differenzierungscluster 8 (CD8) plus Zellen bei 35 Prozent der Patienten bewirken kann unerwünscht niedrig (15 Prozent), mit einer Wahrscheinlichkeit von 3 Prozent, einen schlechten Zeitplan zu akzeptieren, und einer Wahrscheinlichkeit von 15 Prozent, einen guten Zeitplan abzulehnen.

Zunächst werden 22 Patienten in jede Kohorte aufgenommen. Wenn in einer bestimmten Kohorte vier immunologische Reaktionen (Persistenz) festgestellt werden, würde eine Ansammlung auf 39 Patienten erfolgen. Die Kohorte mit der höchsten Anzahl an Patienten, die Persistenz zeigen, wird als immunologisch aktiv angesehen und als entwicklungswürdig erachtet. Wenn in diesem Arm weniger als 11 von 39 Patienten mit Persistenz vorliegen, wird er nicht als einer weiteren Betrachtung wert angesehen.

Ab Änderung E werden 10 Patienten in jede neue Kohorte (Kohorten 5–7) aufgenommen. Wenn es in einem der drei Arme 2 oder mehr von 10 Patienten mit 5 % zirkulierenden CD8+-Zellen gibt, wird diese Kohorte als weitere Überlegung wert angesehen.