Anti-MART-1 F5-lymfocytter for å behandle høyrisiko melanompasienter

Bakgrunn:

Vi har konstruert humane perifere blodlymfocytter (PBL) for å uttrykke en anti-MART-1 T-cellereseptor (TCR) som gjenkjenner en HLA-A*0201-begrenset epitop avledet fra tumorinfiltrerende lymfocytter (TIL)-klonen DMF5.

Vi konstruerte en enkelt retroviral vektor som koder for både alfa- og beta-kjeder og kan mediere genetisk overføring av denne T-cellereseptoren (TCR) med høy effektivitet uten behov for å utføre noen seleksjon.

I kokulturer med HLA-A*0201 positivt melanom, utskilte anti-MART-1 F5 TCR-transduserte T-celler betydelig mengde IFN-, men ingen signifikant sekresjon ble observert i kontrollkokulturer med cellelinjer.

Den anti-MART-1 F5 TCR-transduserte PBL kunne effektivt drepe HLA-A*0201-positive svulster. Det var liten eller ingen gjenkjennelse av normale fibroblastceller.

Denne TCR er over 10 ganger mer reaktiv med melanomceller enn MART-1 F4 TCR som medierte tumorregresjon hos to pasienter med metastatisk melanom.

Poxvirus som koder for melanomantigener, lik ALVAC MART-1-vaksinen, har vist seg å lykkes med å immunisere pasienter mot disse antigenene.

Mål:

Primære mål:

For å evaluere evnen til fire ulike strategier for å øke utholdenheten til antitumor-T-celler i sirkulasjonen 5-10 dager og 31-35 dager etter behandling (definert som F5-celler i kohorter 1 og 2, og aldesleukin i kohorter 3 og 4) og muligens velge én strategi for videre studier.

Med Endring E er hovedmålet å evaluere evnen til tre forskjellige strategier for å forbedre utholdenheten til antitumor-T-celler i sirkulasjonen 5-10 dager og 31-35 dager etter behandling (definert som F5-celler i kohort 5 , aldesleukin i kohort 6 og ALVAC MART-1-vaksine i kohort 7) og muligens velge én strategi for videre studier.

Kvalifisering:

Pasienter som er HLA-A*0201 positive og 18 år eller eldre må ha:

• primære melanomer med lesjoner som er sår og større enn eller lik 2,0 mm, eller alle lesjoner som er større enn eller lik 4,0 mm i tykkelse, eller større enn eller lik 1 positiv lymfeknute, eller lokalt residiv, eller resekert metastatisk sykdom , innen 6 måneder etter kirurgisk reseksjon.
• må være klinisk sykdomsfri på tidspunktet for innføring av protokollen som dokumentert av røntgenologiske studier innen 4 uker etter inntreden av pasient.
• kan ha hatt tidligere adjuvant behandling med immunterapi, inkludert interferon, så lenge det har gått 3 uker siden tidligere systemisk behandling.
• normale verdier for grunnleggende laboratorieverdier.

Pasienter har kanskje ikke:

• okulært eller mukosalt melanom;
• tidligere blitt immunisert med MART-1;
• samtidige store medisinske sykdommer;
• enhver form for primær eller sekundær immunsvikt;
• alvorlig overfølsomhet overfor noen av midlene brukt i denne studien;

Design:

Perifere mononukleære blodceller (PBMC) oppnådd ved leukaferese (ca. 1 ganger 10^10 celler) vil bli dyrket i nærvær av anti-CD3 (OKT3) og aldesleukin for å stimulere T-cellevekst.

Transduksjon initieres ved eksponering av omtrent 10^8 til 5 ganger 10^9 celler for retroviral vektorsupernatant som inneholder anti-MART-1 F5 TCR-genene. Disse transduserte cellene (kalt F5-celler) vil bli utvidet og testet for deres antitumoraktivitet.

F5-celler vil bli administrert intravenøst ​​i en dose på 1 ganger 10^9 til 7 ganger 10^10 celler.

Pasienter vil bli randomisert inn i en av følgende fire kohorter:

1. F5-celler på dag 0 alene
2. F5-celler på dag 0 etterfulgt av subkutan injeksjon av 1,0 mg MART-1:26-35(27L)-peptid i Montanide ISA-51 VG på dag 0 og dag 30.
3. F5-celler på dag 0 etterfulgt av subkutan injeksjon av 125 000 IE/kg/dag aldesleukin på dag 0-4.

4. F5-celler på dag 0 pluss MART-1:26-35(27L) peptid i Montanide ISA-51 VG på dag 0 og dag 30, og 125 000 IE/kg aldesleukin på dag 0-4.

   Fra og med endring E, vil de fire kohortene ovenfor være stengt for opptjening, og pasienter vil bli randomisert til følgende kohorter:

5. F5-celler på dag 0 etter subkutan injeksjon av ALVAC MART-1-vaksine. Andre dose av ALVAC MART-1-vaksine gis på dag 14.
6. F5-celler på dag 0 etter subkutan injeksjon av ALVAC MART-1-vaksine og deretter subkutan injeksjon av 125 000 IE/kg/dag aldesleukin på dag 0-4. Andre dose av ALVAC MART-1-vaksine gis på dag 14.
7. ALVAC MART-1-vaksine på dag 0 og 14.

Pasientene vil gjennomgå fullstendig evaluering med fysisk undersøkelse, computertomografi (CT) av brystet, magen og bekkenet (bare 3 måneder og deretter) og klinisk laboratorieevaluering på dag 35, og 3 måneder etter behandling og deretter hver sjette måned eller inntil studien avsluttes. kriterier er oppfylt.

Hver av kohortene vil bli utført ved hjelp av en to-trinns MiniMax-design. Denne utformingen vil forsøke å bestemme om hver av administrasjonsmåtene kan produsere persistens av de overførte cellene med en frekvens på større enn eller lik 5 prosent av sirkulerende klynge av differensiering 8 (CD8) pluss celler hos 35 prosent av pasientene i motsetning til uønsket lav (15 prosent), med 3 prosent sannsynlighet for å akseptere en dårlig timeplan og 15 prosent sannsynlighet for å avvise en god timeplan.

I utgangspunktet vil 22 pasienter bli registrert i hver kohort. Hvis fire immunologiske responser (persistens) blir notert i en gitt kohort, vil akkumulering av 39 pasienter finne sted. Kohorten med høyest antall pasienter som viser utholdenhet vil bli ansett som immunologisk aktive og vil bli vurdert som verdig videreutvikling. Hvis denne armen har færre enn 11 av 39 pasienter med utholdenhet, vil den ikke anses som verdig til videre vurdering.

Fra og med endring E vil 10 pasienter bli registrert i hvert nytt kohort (kull 5-7). Hvis det på noen av de tre armene er 2 eller flere av 10 pasienter med 5 % CD8+ sirkulerende celler, vil denne kohorten anses som verdig til videre vurdering.