抗 MART-1 F5 淋巴细胞治疗高危黑色素瘤患者

背景：

我们设计了人外周血淋巴细胞 (PBL) 来表达抗 MART-1 T 细胞受体 (TCR)，该受体识别源自肿瘤浸润淋巴细胞 (TIL) 克隆 DMF5 的 HLA-A*0201 限制性表位。

我们构建了一个编码 alpha 和 beta 链的逆转录病毒载体，可以高效地介导这种 T 细胞受体 (TCR) 的遗传转移，而无需进行任何选择。

在与 HLA-A*0201 阳性黑色素瘤的共培养物中，抗 MART-1 F5 TCR 转导的 T 细胞分泌大量 IFN-γ，但在与细胞系的对照共培养物中未观察到显着分泌。

抗 MART-1 F5 TCR 转导的 PBL 可有效杀死 HLA-A*0201 阳性肿瘤。 对正常成纤维细胞的识别很少或没有。

这种 TCR 与黑色素瘤细胞的反应比介导两名转移性黑色素瘤患者肿瘤消退的 MART-1 F4 TCR 高 10 倍以上。

编码黑色素瘤抗原的痘病毒，类似于 ALVAC MART-1 疫苗，已被证明可以成功地使患者免疫这些抗原。

目标：

主要目标：

评估四种不同策略在治疗后 5-10 天和 31-35 天增强循环中抗肿瘤 T 细胞持久性的能力（定义为队列 1 和 2 中的 F5 细胞，队列中的阿地白介素3 和 4) 并可能选择一种策略进行进一步研究。

对于修正案 E，主要目的是评估三种不同策略在治疗后 5-10 天和 31-35 天时增强循环中抗肿瘤 T 细胞持久性的能力（定义为队列 5 中的 F5 细胞） ，队列 6 中的阿地白介素和队列 7 中的 ALVAC MART-1 疫苗）并可能选择一种策略进行进一步研究。

合格：

HLA-A*0201 阳性且年满 18 岁的患者必须：

• 原发性黑色素瘤，病灶溃疡且大于或等于 2.0 毫米，或任何病灶厚度大于或等于 4.0 毫米，或大于或等于 1 个阳性淋巴结，或局部复发，或切除转移性疾病, 手术切除后 6 个月内。
• 在患者进入 4 周内通过放射学研究证明，在进入方案时必须在临床上无疾病。
• 可能已经接受过包括干扰素在内的免疫疗法的辅助治疗，只要自先前的全身治疗以来已经过去了 3 周。
• 基本实验室值的正常值。

患者可能没有：

• 眼部或粘膜黑色素瘤;
• 以前接种过 MART-1 疫苗；
• 并发重大疾病；
• 任何形式的原发性或继发性免疫缺陷；
• 对本研究中使用的任何药物严重过敏；

设计：

通过白细胞分离术获得的外周血单核细胞 (PBMC)（大约 10^10 个细胞的 1 倍）将在抗 CD3 (OKT3) 和阿地白介素存在的情况下培养，以刺激 T 细胞生长。

通过将大约 10^8 到 5 倍 10^9 的细胞暴露于含有抗 MART-1 F5 TCR 基因的逆转录病毒载体上清液来启动转导。 这些转导细胞（称为 F5 细胞）将被扩增并测试其抗肿瘤活性。

F5 细胞将以 1 倍 10^9 至 7 倍 10^10 细胞的剂量静脉内给药。

患者将被随机分配到以下四个队列之一：

1. 仅第 0 天的 F5 细胞
2. 第 0 天的 F5 细胞，然后在第 0 天和第 30 天皮下注射 Montanide ISA-51 VG 中的 1.0 mg MART-1:26-35(27L) 肽。
3. 第 0 天的 F5 细胞随后在第 0-4 天皮下注射 125,000 IU/kg/天阿地白介素。

4. 第 0 天的 F5 细胞加上第 0 天和第 30 天在 Montanide ISA-51 VG 中的 MART-1:26-35(27L) 肽，以及第 0-4 天的 125,000 IU/kg 阿地白介素。

   从修正案 E 开始，上述四个队列将停止招募，患者将被随机分配到以下队列：

5. 皮下注射 ALVAC MART-1 疫苗后第 0 天的 F5 细胞。 第 14 天接种第二剂 ALVAC MART-1 疫苗。
6. 皮下注射 ALVAC MART-1 疫苗后第 0 天的 F5 细胞，然后在第 0-4 天皮下注射 125,000 IU/kg/天阿地白介素。 第 14 天接种第二剂 ALVAC MART-1 疫苗。
7. 第 0 天和第 14 天接种 ALVAC MART-1 疫苗。

患者将在第 35 天和治疗后 3 个月接受全面评估，包括体格检查、胸部、腹部和骨盆的计算机断层扫描 (CT)（仅 3 个月及之后）和临床实验室评估，然后每六个月一次或直到研究结束符合标准。

每个队列都将使用两阶段 MiniMax 设计进行。 该设计将尝试确定每种给药方式是否可以在 35% 的患者中以大于或等于循环分化簇 8 (CD8) + 细胞的 5% 的频率产生转移细胞的持久性，而不是不理想的低 (15%)，接受不良时间表的可能性为 3%，拒绝良好时间表的可能性为 15%。

每个队列最初将招募 22 名患者。 如果在给定队列中注意到四种免疫反应（持久性），则将发生 39 名患者的累积。 表现出持久性的患者数量最多的队列将被认为具有免疫活性，并且将被认为值得进一步开发。 如果该组在 39 名患者中有少于 11 名持续存在，则认为不值得进一步考虑。

从修正案 E 开始，每个新群组（群组 5-7）将招募 10 名患者。 如果在三组中的任何一组中，10 名患者中有 2 名或更多名患者具有 5% CD8+ 循环细胞，则该队列将被视为值得进一步考虑。