口腔創傷治癒の分子解剖学

バックグラウンド：

口腔粘膜創傷の治癒過程は皮膚の創傷治癒過程と区別される 2 つの重要な特性、すなわち、より迅速な治癒と瘢痕組織形成の欠如です。 2 つの組織の明らかな類似性を考慮すると、これは注目に値します。 ただし、水分補給、成長因子の利用可能性、炎症反応、微生物への曝露など、治癒環境には顕著な違いがあります。 2 つの上皮の異なる治癒反応に対するこれらの各因子の因果関係に関する知識はほとんどが逸話であり、口腔創傷治癒については一般に十分に研究されていません。 この研究は、皮膚の創傷治癒と比較した口腔創傷治癒の包括的な分子定義を提供することを目指しています。 全体的な目的は、口腔粘膜の迅速かつほぼ傷跡のない治癒を可能にする特定の要因を特定することです。 これらの生理学的および分子的決定因子の同定は、ヒトの口腔の健康に広範な影響を与えるでしょう。 とりわけ、外傷、手術、放射線療法、感染症、その他の口腔病変によって形成された重大なサイズの口腔病変（未治療の場合は永続的な障害や機能不全につながる）の治癒を促進するための、的を絞った手順の探索の場を提供することになるだろう。 。 さらに、これらの研究で特定された、迅速で瘢痕のない治癒を促進する可能性がある経路および/または分子は、治癒を促進し、組織の機能的完全性を損なう可能性がある見苦しい瘢痕を最小限に抑えるために、非口腔粘膜部位への適用が検討される可能性がある。

仮説:

• 皮膚の創傷治癒と口腔粘膜の創傷治癒では、遺伝子とタンパク質の発現に大きな違いがあります。
• 皮膚創傷の上皮細胞における、サイトカインやケモカインなどの炎症関連遺伝子の大規模な上方制御に関連する炎症細胞の動員が、これらの違いの原因となる可能性があります。
• 皮膚組織には重大な瘢痕が存在するが、口腔粘膜には存在しないことを説明できる特定の遺伝子プログラムがあります。

目的:

このパイロット研究提案の全体的な目的は、正常な口腔創傷修復の初期段階 (1 ～ 6 日) における遺伝子およびタンパク質の発現プロファイルを確立することです。 これらのプロファイルを皮膚創傷治癒のプロファイルと比較することにより、治癒過程のバイオマーカーを表す可能性がある、または病理学的創傷治癒および癌における新たな治療標的として機能する可能性がある口腔創傷修復専用の分子を同定できる可能性がある。 検証すべき具体的な仮説の 1 つは、創傷浸潤ケラチノサイトによる炎症誘発性遺伝子ネットワークの発現レベルが、ヒトの口腔創傷トランスクリプトームと皮膚創傷トランスクリプトームの最も大きな違いを構成するということです。 この特定の仮説は、動物における最近の補完的な口腔および皮膚の創傷治癒研究から得られたデータから開発されました。

資格:

18歳から40歳までの健康な男性ボランティアがこの研究に登録されます。

デザイン：

口腔粘膜サンプル: 滅菌した 3 mm ダーマル パンチを使用して、咬合面のすぐ上の頬の粘膜に均一な全層生検を作成します。 深さ約 2 mm の円形の組織片が生検当日 (1 日目) に除去されます。 これらの被験者は、その後、次のようにランダムにグループ化されます。

グループ 1: これ以上サンプルは収集されません。写真は 3 日目、6 日目、9 日目、13 日目、15 日目に撮影されます (タイムテーブルを参照)。 このグループは、皮膚と比較して口腔粘膜の最初の創傷として選択された領域に瘢痕化がないことなど、本研究の条件下での正常な治癒過程を記録するのに役立つであろう。

グループ 2: 2 回目の生検は 3 日目に行われます。これには、0 日目で説明したのと同じ手順に従って、無菌の 5 mm パンチを使用して最初の生検の領域が含まれます。タイムテーブルに設定されたスケジュールに従って写真が撮影されます。 この 2 回目の生検により、最初の生検で誘発された治癒領域のサンプリングが可能になります。 2 ミリメートル広いパンチ サイズを選択し、最初のパンチと同心のサンプルを採取することで、対象領域を確実に完全に除去できます。

グループ 3: グループ 2 で説明したのと同様の方法で、それぞれ 6 日目に 2 回目の生検が行われます。写真はタイムテーブルに従って撮影されます。

皮膚サンプル：口腔生検と並行して、グループ 2 および 3 に対する 2 回目の生検を含む、同じスケジュールおよび手順に従って、同じ被験者からの口腔生検と同様のサイズおよび深さの皮膚生検が腋窩領域から取得されます。

傷はデジタルカメラで写真に撮られ、上記のスケジュールに従って来院時に治癒が観察されます。 いずれの場合も、切除された組織は氷上で直ちに二等分されます。サンプルの半分は、標準的な組織学および免疫組織化学のために 4% ホルムアルデヒド/PBS で固定され、パラフィンに包埋されます。残りの半分は、OCT を充填したプラスチックベースモールドに配置され、液体窒素で瞬間冷凍され、80 (無限) で保存されます。ゲノムおよびプロテオミクス分析のために処理されるまで)C。