A szájsebgyógyítás molekuláris anatómiája

HÁTTÉR:

Két fontos tulajdonság különbözteti meg a szájnyálkahártya sebeinek gyógyulási folyamatát a bőrétől: a gyorsabb gyógyulás és a hegszövetképződés hiánya. Ez figyelemre méltó, tekintettel a két szövet látszólagos hasonlóságára. Mindazonáltal szembetűnő különbségek vannak a gyógyulási környezetben, például a hidratációban, a növekedési faktor elérhetőségében, a gyulladásos reakcióban és a mikrobiális expozícióban. A két epitélium eltérő gyógyulási reakciójához e tényezők mindegyikének okozati hozzájárulására vonatkozó ismeretek többnyire anekdotikusak, és a szájsebgyógyulást általában kevéssé tanulmányozták. Ez a tanulmány arra törekszik, hogy globális molekuláris definíciót adjon az orális sebgyógyulásnak a bőr gyógyulásához képest. Az általános cél az lesz, hogy azonosítsák azokat a specifikus tényezőket, amelyek lehetővé teszik a szájnyálkahártya gyors és szinte hegmentes gyógyulását. Ezen fiziológiai és molekuláris determinánsok azonosítása széles körben kihat az emberi száj egészségére. Többek között helyszínt adna a trauma, műtét, sugárterápia, fertőzés és egyéb szájpatológiák következtében kialakult kritikus méretű szájkárosodások gyógyulását felgyorsító eljárások célzott feltárására, amelyek kezelés nélkül maradandó fogyatékossághoz és diszfunkcióhoz vezetnek. . Ezen túlmenően, az ezekben a vizsgálatokban azonosított útvonalak és/vagy molekulák, amelyek elősegíthetik a gyors, hegmentes gyógyulást, megfontolhatóak a nem szájnyálkahártya-helyeken történő alkalmazáskor a gyógyulás elősegítése és a csúnya hegek minimalizálása érdekében, amelyek szintén veszélyeztethetik a szövet funkcionális integritását.

Hipotézisek:

• Jelentős különbségek vannak a gén- és fehérjeexpresszióban a bőr és a szájnyálkahártya sebgyógyulása között.
• A gyulladással összefüggő gének, köztük a citokinek és a kemokinek nagymértékű felszabályozásával összefüggő gyulladásos sejtek toborzása a bőrsebek hámsejtjeiben magyarázhatja ezeket a különbségeket.
• Vannak olyan specifikus génprogramok, amelyek megmagyarázzák a jelentős hegesedés jelenlétét a bőrszövetekben, de nem a szájnyálkahártyán.

CÉLKITŰZÉSEK:

E kísérleti tanulmányi javaslat átfogó célja a gén- és fehérjeexpressziós profilok meghatározása a normál szájsebgyógyulás korai szakaszában (1-6 nap). Ha összehasonlítjuk ezeket a profilokat a bőr sebgyógyulási profiljaival, képesek lehetünk olyan molekulákat azonosítani, amelyek kizárólag az orális sebek helyreállítására szolgálnak, és amelyek a gyógyulási folyamat biomarkerei lehetnek, vagy új terápiás célpontok lehetnek a patológiás sebgyógyulásban és a rákbetegségben. Az egyik tesztelendő hipotézis az, hogy a gyulladást elősegítő génhálózatok sebbe infiltráló keratinociták általi expressziója jelenti a legjelentősebb különbséget a humán orális és bőrsebtranszkriptomák között. A specifikus hipotézist a közelmúltban, állatokon végzett, kiegészítő száj- és bőrsebgyógyulási vizsgálatainkból nyert adatokból dolgoztuk ki.

JOGOSULTSÁG:

Ebbe a vizsgálatba 18 és 40 év közötti egészséges férfi önkénteseket vonnak be.

TERVEZÉS:

Szájnyálkahártya-minták: Steril, 3 mm-es dermális lyukasztóval egységes, teljes vastagságú biopsziát készítünk az arc nyálkahártyájában, közvetlenül az okkluzális sík felett. A biopszia napján (1. nap) körülbelül 2 mm mély, kör alakú szövetdarabokat távolítanak el. Ezeket a tantárgyakat a továbbiakban véletlenszerűen csoportosítjuk a következőképpen:

1. csoport: nem gyűjtenek további mintákat; A képek a 3., 6., 9., 13. és 15. napon készülnek (lásd az órarendet). Ez a csoport segít dokumentálni a normál gyógyulási folyamatot a jelen vizsgálat körülményei között, beleértve a szájnyálkahártyán a kezdeti sebhez kiválasztott területen a bőrhöz képest az ijesztés hiányát.

2. csoport: a 3. napon egy második biopsziát vesznek, amely magában foglalja az első biopszia területét steril 5 mm-es lyukasztással, a 0. napon leírt eljárást követve; a képek az Órarendben rögzített ütemezés szerint készülnek. Ez a második biopszia lehetővé teszi az első biopszia által kiváltott gyógyulási terület mintavételét. Két milliméterrel szélesebb lyukasztóméret kiválasztásával és az elsőhöz koncentrikus mintavétellel biztosíthatjuk a vizsgált terület teljes eltávolítását.

3. csoport: egy második biopsziát veszünk a 6. napon, a 2. csoportnál leírtakhoz hasonló módon; A képek az órarend szerint készülnek.

Bőrminták: A szájbiopsziával párhuzamosan az azonos személyektől származó szájbiopsziához hasonló méretű és mélységű bőrbiopsziákat vesznek a hónalj régióból, ugyanazt az ütemezést és eljárást követve, beleértve a második biopsziát is a 2. és 3. csoportban.

A sebeket digitális fényképezőgéppel fényképezzük, és a gyógyulást a klinikai látogatások alkalmával a fenti ütemterv szerint követjük nyomon. A kimetszett szöveteket minden esetben jégen azonnal kettévágják; a minta felét 4%-os formaldehidben/PBS-ben rögzítik és paraffinba ágyazzák a standard szövettani és immunhisztokémiai vizsgálatokhoz, a fennmaradó felét pedig OCT-vel töltött műanyag alapformákba helyezik, folyékony nitrogénben gyorsfagyasztják, és 80 °C-on (Infinite) tárolják. )C, amíg fel nem dolgozzák genomi és proteomikai elemzéshez.