L'anatomie moléculaire de la cicatrisation buccale

ARRIÈRE-PLAN:

Deux propriétés importantes distinguent le processus de cicatrisation des plaies de la muqueuse buccale de celui de la peau : une cicatrisation plus rapide et l'absence de formation de tissu cicatriciel. Ceci est remarquable étant donné les similitudes apparentes des deux tissus. Il existe cependant des différences importantes dans l'environnement de guérison, telles que l'hydratation, la disponibilité des facteurs de croissance, la réponse inflammatoire et l'exposition microbienne. La connaissance de la contribution causale de chacun de ces facteurs à la réponse de cicatrisation différentielle des deux épithéliums est principalement anecdotique, et la cicatrisation des plaies buccales a généralement été mal étudiée. Cette étude vise à fournir une définition moléculaire globale de la cicatrisation buccale par rapport à celle de la peau. L'objectif général sera d'identifier les facteurs spécifiques qui permettent une guérison rapide et presque sans cicatrice de la muqueuse buccale. L'identification de ces déterminants physiologiques et moléculaires aura des implications étendues pour la santé bucco-dentaire humaine. Entre autres, il fournirait des lieux pour l'exploration ciblée de procédures visant à accélérer la guérison des lésions buccales de taille critique formées par un traumatisme, une chirurgie, une radiothérapie, une infection et d'autres pathologies buccales, qui, si elles ne sont pas traitées, entraînent une incapacité permanente et un dysfonctionnement. . De plus, les voies et/ou molécules identifiées dans ces études qui peuvent faciliter une cicatrisation rapide et sans cicatrice pourraient être envisagées pour une application sur des sites muqueux non buccaux afin de favoriser la cicatrisation et de minimiser les cicatrices disgracieuses, qui peuvent également compromettre l'intégrité fonctionnelle du tissu.

Hypothèses:

• Il existe des différences significatives dans l'expression des gènes et des protéines entre la cicatrisation des plaies dans la peau et la muqueuse buccale.
• Le recrutement de cellules inflammatoires associé à une importante régulation à la hausse des gènes associés à l'inflammation, y compris les cytokines et les chimiokines, dans les cellules épithéliales des plaies cutanées peut expliquer ces différences.
• Il existe des programmes génétiques spécifiques qui peuvent expliquer la présence de cicatrices importantes dans les tissus cutanés, mais pas dans la muqueuse buccale.

OBJECTIFS:

L'objectif global de cette proposition d'étude pilote est d'établir les profils d'expression des gènes et des protéines au cours des premières étapes (1 à 6 jours) de la cicatrisation normale des plaies buccales. En comparant ces profils avec ceux de la cicatrisation cutanée, nous pourrons peut-être identifier des molécules exclusives à la cicatrisation buccale qui pourraient représenter des biomarqueurs du processus de cicatrisation ou servir de nouvelles cibles thérapeutiques dans la cicatrisation pathologique et le cancer. Une hypothèse spécifique à tester est que le niveau d'expression des réseaux de gènes pro-inflammatoires par les kératinocytes infiltrant les plaies constitue la différence la plus significative entre les transcriptomes humains des plaies orales et cutanées. L'hypothèse spécifique a été développée à partir des données obtenues à partir de nos récentes études complémentaires sur la cicatrisation des plaies orales et cutanées chez les animaux.

ADMISSIBILITÉ:

Des volontaires masculins en bonne santé âgés de 18 à 40 ans seront inscrits à cette étude.

CONCEPTION:

Échantillons de muqueuse buccale : Un poinçon dermique stérile de 3 mm sera utilisé pour créer une biopsie uniforme de pleine épaisseur dans la muqueuse de la joue juste au-dessus du plan occlusal. Des morceaux de tissu circulaires d'environ 2 mm de profondeur seront prélevés le jour de la biopsie (jour 1). Ces sujets seront par la suite regroupés aléatoirement comme suit :

Groupe 1 : aucun autre échantillon ne sera prélevé ; les photos seront prises les jours 3, 6, 9, 13 et 15 (voir Horaires). Ce groupe aidera à documenter le processus de cicatrisation normal dans les conditions de la présente étude, y compris l'absence d'effarouchement dans la zone sélectionnée pour la plaie initiale dans la muqueuse buccale par rapport à la peau.

Groupe 2 : une deuxième biopsie sera réalisée au jour 3, qui inclura la zone de la première biopsie avec un punch stérile de 5 mm, en suivant la même procédure que celle décrite pour le jour 0 ; les photos seront prises selon le calendrier défini dans l'horaire. Cette seconde biopsie permettra de prélever la zone de cicatrisation induite par la première biopsie. En sélectionnant une taille de poinçon de deux millimètres plus large et en prélevant un échantillon concentrique au premier, nous pouvons assurer une élimination complète de la zone d'intérêt.

Groupe 3 : une deuxième biopsie sera prise au jour 6, respectivement, d'une manière similaire à celle décrite pour le groupe 2 ; les photos seront prises selon le calendrier.

Échantillons de peau : parallèlement aux biopsies orales, des biopsies cutanées de taille et de profondeur similaires à la biopsie orale des mêmes sujets seront obtenues dans la région axillaire selon le même calendrier et la même procédure, y compris une deuxième biopsie pour les groupes 2 et 3.

Les blessures seront photographiées avec un appareil photo numérique et la guérison sera surveillée lors des visites à la clinique selon le calendrier ci-dessus. Les tissus excisés dans chaque cas seront immédiatement coupés en deux sur de la glace ; la moitié de l'échantillon sera fixée dans du formaldéhyde à 4 %/PBS et incluse dans de la paraffine pour l'histologie et l'immunohistochimie standard, et la moitié restante sera placée dans des moules de base en plastique remplis d'OCT, congelée dans de l'azote liquide et stockée à 80 (Infinite )C jusqu'à ce qu'il soit traité pour l'analyse génomique et protéomique.