구강 상처 치유의 분자 해부학

배경:

구강 점막 상처의 치유 과정을 피부 상처와 구별하는 두 가지 중요한 특성이 있습니다. 더 빠른 치유와 반흔 조직 형성의 부재입니다. 이것은 두 조직의 명백한 유사성을 고려할 때 주목할 만합니다. 그러나 수화, 성장 인자 가용성, 염증 반응 및 미생물 노출과 같은 치유 환경에는 현저한 차이가 있습니다. 두 상피의 차등 치유 반응에 대한 이러한 각 요인의 인과적 기여에 대한 지식은 대부분 일화이며 구강 상처 치유는 일반적으로 제대로 연구되지 않았습니다. 이 연구는 피부와 비교하여 구강 상처 치유의 세계적인 분자 정의를 제공하고자 합니다. 전반적인 목표는 구강 점막의 신속하고 거의 흉터 없는 치유를 가능하게 하는 특정 요인을 식별하는 것입니다. 이러한 생리학적 및 분자적 결정 요인의 확인은 인간의 구강 건강에 광범위한 영향을 미칠 것입니다. 무엇보다도 외상, 수술, 방사선 요법, 감염 및 기타 구강 병리에 의해 형성된 심각한 크기의 구강 병변의 치유를 가속화하기 위한 절차를 대상으로 탐색할 수 있는 장소를 제공하며, 치료하지 않을 경우 영구 장애 및 기능 장애로 이어집니다. . 또한, 이러한 연구에서 확인된 경로 및/또는 분자는 치유를 촉진하고 조직의 기능적 무결성을 손상시킬 수 있는 보기 흉한 흉터를 최소화하기 위해 비구강 점막 부위에 적용하기 위해 빠르고 흉터 없는 치유를 촉진할 수 있습니다.

가설:

• 피부와 구강 점막의 상처 치유 사이에는 유전자와 단백질 발현에 상당한 차이가 있습니다.
• 피부 상처의 상피 세포에서 사이토카인 및 케모카인을 포함한 염증 관련 유전자의 대규모 상향 조절과 관련된 염증 세포의 모집은 이러한 차이를 설명할 수 있습니다.
• 피부 조직에는 상당한 반흔이 존재하지만 구강 점막에는 존재하지 않는 것을 설명할 수 있는 특정 유전자 프로그램이 있습니다.

목표:

이 파일럿 연구 제안의 전반적인 목적은 정상적인 구강 상처 복구의 초기 단계(1-6일) 동안 유전자 및 단백질 발현 프로파일을 확립하는 것입니다. 이러한 프로필을 피부 상처 치유의 프로필과 비교함으로써 우리는 치유 과정의 바이오마커를 나타내거나 병리학적 상처 치유 및 암에서 새로운 치료 표적이 될 수 있는 구강 상처 복구 전용 분자를 식별할 수 있습니다. 테스트할 특정 가설 중 하나는 상처 침윤 각질 세포에 의한 전염증성 유전자 네트워크의 발현 수준이 인간의 구강 및 피부 상처 전사체 사이에서 가장 중요한 차이를 구성한다는 것입니다. 특정 가설은 동물에 대한 최근 보완적인 구강 및 피부 상처 치유 연구에서 얻은 데이터에서 개발되었습니다.

적임:

18세에서 40세 사이의 건강한 남성 지원자가 이 연구에 등록됩니다.

설계:

구강 점막 샘플: 멸균 3mm 피부 펀치를 사용하여 교합면 바로 위 뺨의 점막에서 균일한 전층 생검을 생성합니다. 생검 당일(1일)에 약 2mm 깊이의 원형 조직 조각을 제거합니다. 이러한 주제는 이후에 다음과 같이 무작위로 그룹화됩니다.

그룹 1: 더 이상 샘플을 수집하지 않습니다. 사진은 3, 6, 9, 13, 15일에 촬영됩니다(시간표 참조). 이 그룹은 피부와 비교하여 구강 점막의 초기 상처에 대해 선택된 영역에서 흉터가 없는 것을 포함하여 본 연구의 조건 하에서 정상적인 치유 과정을 문서화하는 데 도움을 줄 것입니다.

그룹 2: 두 번째 생검은 0일에 설명된 것과 동일한 절차에 따라 멸균 5mm 펀치로 첫 번째 생검 영역을 포함하는 3일에 수행됩니다. 사진은 시간표에 설정된 일정에 따라 촬영됩니다. 이 두 번째 생검은 첫 번째 생검에 의해 유도된 치유 영역의 샘플링을 가능하게 합니다. 2밀리미터 더 넓은 펀치 크기를 선택하고 샘플을 첫 번째 샘플과 동심으로 취함으로써 관심 영역을 완전히 제거할 수 있습니다.

그룹 3: 그룹 2에 대해 설명된 것과 유사한 방식으로 각각 6일째에 두 번째 생검을 수행합니다. 사진은 시간표에 따라 촬영됩니다.

피부 샘플: 구강 생검과 병행하여 그룹 2 및 3에 대한 두 번째 생검을 포함하여 동일한 일정 및 절차에 따라 겨드랑이 부위에서 동일한 대상의 구강 생검과 유사한 크기 및 깊이의 피부 생검을 얻습니다.

상처는 디지털 카메라로 사진을 찍고 위의 일정에 따라 클리닉 방문 시 치유를 모니터링합니다. 각각의 경우 절제된 조직은 즉시 얼음 위에서 양분됩니다. 샘플의 절반은 4% 포름알데히드/PBS에 고정되고 표준 조직학 및 면역조직화학을 위해 파라핀에 포매되고 나머지 절반은 OCT가 채워진 플라스틱 베이스 몰드에 배치되고 액체 질소에서 급속 냉동되며 80(무한 )C 게놈 및 단백질 분석을 위해 처리될 때까지.