Suun haavan paranemisen molekyylianatomia

TAUSTA:

Kaksi tärkeää ominaisuutta erottavat suun limakalvohaavojen paranemisprosessin ihon haavoista: nopeampi paraneminen ja arpikudoksen muodostumisen puuttuminen. Tämä on merkittävää ottaen huomioon näiden kahden kudoksen ilmeiset yhtäläisyydet. Parantumisympäristössä on kuitenkin huomattavia eroja, kuten nesteytys, kasvutekijän saatavuus, tulehdusvaste ja mikrobialtistus. Tieto kunkin näistä tekijöistä kausaalisesta vaikutuksesta näiden kahden epiteelin eroavaiseen paranemisvasteeseen on enimmäkseen anekdoottista, ja suun haavan paranemista on yleensä tutkittu huonosti. Tämän tutkimuksen tavoitteena on tarjota globaali molekyylimääritelmä suun haavan paranemiselle verrattuna ihon paranemiseen. Yleisenä tavoitteena on tunnistaa ne tekijät, jotka mahdollistavat suun limakalvon nopean ja lähes arpittoman paranemisen. Näiden fysiologisten ja molekulaaristen determinanttien tunnistamisella on laajat vaikutukset ihmisten suun terveyteen. Se tarjoaisi muun muassa paikkoja kohdennettuun tutkimiseen toimenpiteisiin, jotka nopeuttavat trauman, leikkauksen, sädehoidon, infektion ja muiden suun patologioiden aiheuttamien kriittisen kokoisten suuvaurioiden paranemista, jotka hoitamattomana johtavat pysyvään vammaan ja toimintahäiriöön. . Lisäksi näissä tutkimuksissa tunnistettuja reittejä ja/tai molekyylejä, jotka voivat helpottaa nopeaa, arpeutettua paranemista, voidaan harkita käyttöä muissa kuin suun limakalvokohdissa parantamaan paranemista ja minimoimaan rumia arpia, jotka voivat myös vaarantaa kudoksen toiminnallisen eheyden.

Hypoteesit:

• Geenien ja proteiinien ilmentymisessä on merkittäviä eroja ihon ja suun limakalvojen haavan paranemisen välillä.
• Tulehdukseen liittyvien geenien, mukaan lukien sytokiinit ja kemokiinit, suureen lisääntymiseen liittyvien tulehdussolujen kerääntyminen ihohaavojen epiteelisoluihin saattaa selittää nämä erot.
• On olemassa erityisiä geeniohjelmia, jotka voivat selittää merkittävän arpeutumisen ihokudoksissa, mutta eivät suun limakalvossa.

TAVOITTEET:

Tämän pilottitutkimusehdotuksen yleisenä tavoitteena on määrittää geenien ja proteiinien ilmentymisprofiilit normaalin suun haavan korjauksen alkuvaiheessa (1-6 päivää). Vertaamalla näitä profiileja ihohaavojen paranemisen profiileihin voimme ehkä tunnistaa molekyylejä, jotka liittyvät yksinomaan suun haavan korjaamiseen ja jotka voisivat edustaa paranemisprosessin biomarkkereita tai toimia uusina terapeuttisina kohteina patologisessa haavan paranemisessa ja syövässä. Eräs erityinen testattava hypoteesi on, että tulehdusta edistävien geeniverkkojen ilmentymistaso haavaan tunkeutuvien keratinosyyttien toimesta muodostaa merkittävimmän eron ihmisen suun ja ihon haavan transkriptien välillä. Spesifinen hypoteesi on kehitetty tiedoista, jotka on saatu viimeaikaisista täydentävistä suun ja ihohaavojen paranemistutkimuksistamme eläimillä.

KELPOISUUS:

Tähän tutkimukseen otetaan mukaan terveitä 18–40-vuotiaita vapaaehtoisia miehiä.

DESIGN:

Suun limakalvonäytteet: Steriilillä 3 mm:n dermaalisella lyönnillä luodaan tasainen, täysipaksuinen biopsia posken limakalvolle juuri purentatason yläpuolella. Noin 2 mm syvyiset pyöreät kudospalat poistetaan biopsiapäivänä (päivä 1). Nämä aiheet ryhmitellään myöhemmin satunnaisesti seuraavasti:

Ryhmä 1: muita näytteitä ei kerätä; kuvat otetaan päivinä 3, 6, 9, 13 ja 15 (katso Aikataulu). Tämä ryhmä auttaa dokumentoimaan normaalin paranemisprosessin tämän tutkimuksen olosuhteissa, mukaan lukien pelottamisen puute alkuperäiselle haavalle valitulla alueella suun limakalvossa verrattuna ihoon.

Ryhmä 2: toinen biopsia otetaan päivänä 3, joka sisältää ensimmäisen biopsian alueen steriilillä 5 mm:n lyönnillä noudattaen samaa menettelyä kuin kuvattiin päivälle 0; kuvat otetaan Aikataulussa määritellyn aikataulun mukaan. Tämä toinen biopsia mahdollistaa näytteenoton ensimmäisen biopsian aiheuttamasta paranemisalueesta. Valitsemalla rei'ityskoon kaksi millimetriä leveämpi ja ottamalla samankeskisen näytteen ensimmäiseen nähden, voimme taata, että haluttu alue poistetaan kokonaan.

Ryhmä 3: toinen biopsia otetaan päivänä 6, vastaavasti, samalla tavalla kuin on kuvattu ryhmälle 2; kuvat otetaan aikataulun mukaan.

Ihonäytteet: Suun kautta otettujen biopsioiden rinnalla ihobiopsiat, jotka ovat samankokoisia ja -syvyydeltään samankokoisia ja -syvyisiä kuin suun biopsia samoista koehenkilöistä, otetaan kainaloalueelta samaa aikataulua ja menettelyä noudattaen, mukaan lukien toinen biopsia ryhmille 2 ja 3.

Haavat valokuvataan digikameralla ja paranemista seurataan klinikalla yllä olevan aikataulun mukaisesti. Kussakin tapauksessa leikatut kudokset puolitetaan välittömästi jäällä; puolet näytteestä kiinnitetään 4-prosenttiseen formaldehydiin/PBS:ään ja upotetaan parafiiniin standardinmukaista histologiaa ja immunohistokemiaa varten, ja loput puolet laitetaan OCT-täytettyihin muovipohjamuotteihin, pakastetaan nestemäisessä typessä ja varastoidaan 80 °C:ssa (Infinite). )C, kunnes se on käsitelty genomista ja proteomista analyysiä varten.