口腔伤口愈合的分子解剖学

背景：

两个重要特性将口腔粘膜伤口的愈合过程与皮肤伤口的愈合过程区分开来：更快的愈合和不形成疤痕组织。 鉴于这两种组织的明显相似性，这是非常了不起的。 然而，愈合环境存在显着差异，例如水合作用、生长因子可用性、炎症反应和微生物暴露。 关于这些因素中的每一个对两种上皮细胞的不同愈合反应的因果贡献的知识大多是轶事，并且通常对口腔伤口愈合的研究很少。 本研究旨在提供口腔伤口愈合与皮肤伤口愈合相比的全球分子定义。 总体目标将是确定能够使口腔粘膜快速且几乎无疤痕愈合的具体因素。 鉴定这些生理和分子决定因素将对人类口腔健康产生广泛影响。 除其他外，它将为有针对性地探索程序提供场所，以加速由外伤、手术、放射治疗、感染和其他口腔病症形成的严重口腔损伤的愈合，如果不治疗，这些损伤会导致永久性残疾和功能障碍. 此外，在这些研究中发现的可能促进快速、无疤痕愈合的途径和/或分子可以考虑应用于非口腔粘膜部位，以促进愈合并最大限度地减少难看的疤痕，这也可能损害组织的功能完整性。

假设：

• 皮肤和口腔黏膜伤口愈合的基因和蛋白表达存在显着差异。
• 与皮肤伤口上皮细胞中炎症相关基因（包括细胞因子和趋化因子）的大量上调相关的炎症细胞的募集可能是造成这些差异的原因。
• 有特定的基因程序可以解释皮肤组织而非口腔粘膜中存在明显疤痕。

目标：

该试点研究提案的总体目标是在正常口腔伤口修复的早期阶段（1-6 天）建立基因和蛋白质表达谱。 通过将这些特征与皮肤伤口愈合的特征进行比较，我们或许能够识别口腔伤口修复独有的分子，这些分子可以代表愈合过程的生物标志物或作为病理性伤口愈合和癌症的新治疗靶点。 要检验的一个具体假设是，伤口浸润性角质形成细胞促炎基因网络的表达水平构成了人类口腔和皮肤伤口转录组之间最显着的差异。 具体的假设是根据我们最近在动物身上进行的补充性口腔和皮肤伤口愈合研究中获得的数据得出的。

合格：

18 至 40 岁的健康男性志愿者将参加本研究。

设计：

口腔粘膜样本：将使用无菌的 3 毫米真皮穿孔器在咬合平面上方的脸颊粘膜中创建均匀的全层活检。 活组织检查当天（第 1 天）将去除约 2 毫米深的圆形组织块。 这些受试者随后将被随机分组​​如下：

第 1 组：不再采集样本；照片将在第 3、6、9、13 和 15 天拍摄（见时间表）。 该小组将帮助记录本研究条件下的正常愈合过程，包括与皮肤相比，口腔粘膜初始伤口选择区域没有疤痕。

第 2 组：将在第 3 天进行第二次活检，其中包括使用 5 毫米无菌穿孔器进行的第一次活检区域，遵循与第 0 天所述相同的程序；照片将根据时间表中设定的时间表拍摄。 这第二次活检将能够对第一次活检引起的愈合区域进行取样。 通过选择宽两毫米的冲孔尺寸并取与第一个同心的样品，我们可以确保完全去除感兴趣的区域。

第 3 组：将在第 6 天分别以与第 2 组所述类似的方式进行第二次活检；照片将根据时间表拍摄。

皮肤样本：与口腔活检平行，将按照相同的时间表和程序从腋窝区域获得与来自同一受试者的口腔活检相似大小和深度的皮肤活检，包括第 2 组和第 3 组的第二次活检。

伤口将用数码相机拍照，并根据上述时间表在诊所就诊时监测愈合情况。 每种情况下的切除组织将立即在冰上一分为二；一半样品将固定在 4% 甲醛/PBS 中并包埋在石蜡中用于标准组织学和免疫组织化学，其余一半将放置在 OCT 填充的塑料基模中，在液氮中快速冷冻，并储存在 80（无限)C 直到进行基因组和蛋白质组学分析。