Den molekylære anatomien til oral sårheling

BAKGRUNN:

To viktige egenskaper skiller prosessen med tilheling av munnslimhinnesår fra de i huden: raskere tilheling og fravær av arrvevsdannelse. Dette er bemerkelsesverdig gitt de tilsynelatende likhetene mellom de to vevene. Det er imidlertid fremtredende forskjeller i det helbredende miljøet, som hydrering, vekstfaktortilgjengelighet, inflammatorisk respons og mikrobiell eksponering. Kunnskapen om årsaksbidraget til hver av disse faktorene til den differensielle helbredelsesresponsen til de to epitelene er for det meste anekdotisk, og oral sårheling er generelt dårlig studert. Denne studien søker å gi en global molekylær definisjon av oral sårheling sammenlignet med hudens. Det overordnede målet vil være å identifisere de spesifikke faktorene som muliggjør rask og nesten arrfri tilheling av munnslimhinnen. Identifisering av disse fysiologiske og molekylære determinantene vil ha omfattende implikasjoner for menneskers orale helse. Blant annet vil det gi arenaer for målrettet utforskning av prosedyrer for å akselerere helbredelsen av kritisk størrelse orale lesjoner dannet av traumer, kirurgi, strålebehandling, infeksjon og andre orale patologier, som, hvis ubehandlet, fører til permanent funksjonshemming og dysfunksjon. . Dessuten kan veier og/eller molekyler identifisert i disse studiene som kan lette rask, arrfri tilheling vurderes for påføring på ikke-orale slimhinnesteder for å fremme heling og minimere skjemmende arr, noe som også kan kompromittere den funksjonelle integriteten til vevet.

Hypoteser:

• Det er betydelige forskjeller i gen- og proteinuttrykk mellom sårheling i hud og munnslimhinne.
• Rekrutteringen av inflammatoriske celler assosiert med en stor oppregulering av betennelsesassosierte gener, inkludert cytokiner og kjemokiner, i epitelcellene til hudsår kan forklare disse forskjellene.
• Det finnes spesifikke genprogrammer som kan forklare tilstedeværelsen av betydelig arrdannelse i hudvev, men ikke i munnslimhinnen.

MÅL:

Det overordnede målet med dette pilotstudieforslaget er å etablere gen- og proteinekspresjonsprofiler i de tidlige stadiene (1-6 dager) av normal oral sårreparasjon. Ved å sammenligne disse profilene med de for kutan sårheling, kan vi kanskje identifisere molekyler som er eksklusive for oral sårreparasjon som kan representere biomarkører for helingsprosessen eller tjene som nye terapeutiske mål i patologisk sårheling og kreft. En spesifikk hypotese som skal testes er at nivået av ekspresjon av pro-inflammatoriske gennettverk av sårinfiltrerende keratinocytter utgjør den mest signifikante forskjellen mellom humane orale og kutane sårtranskriptomer. Den spesifikke hypotesen er utviklet fra data hentet fra våre nylige komplementære orale og hudsårhelingsstudier på dyr.

KVALIFIKASJON:

Friske mannlige frivillige i alderen 18 til 40 vil bli registrert i denne studien.

DESIGN:

Munnslimhinneprøver: En steril 3 mm dermal punch vil bli brukt for å lage ensartet, full-tykkelse biopsi i slimhinnen i kinnet like over okklusalplanet. Sirkulære vevsbiter på ca. 2 mm dybde vil bli fjernet på biopsidagen (dag 1). Disse emnene vil deretter bli tilfeldig gruppert som følger:

Gruppe 1: ingen ytterligere prøver vil bli samlet inn; Bildene vil bli tatt på dag 3, 6, 9, 13 og 15 (se timeplan). Denne gruppen vil bidra til å dokumentere den normale helingsprosessen under forholdene i denne studien, inkludert mangelen på skremming i området valgt for det første såret i munnslimhinnen sammenlignet med huden.

Gruppe 2: en andre biopsi vil bli tatt på dag 3, som vil inkludere området til den første biopsien med sterilt 5 mm stempel, etter samme prosedyre som beskrevet for dag 0; bilder vil bli tatt i henhold til tidsplanen satt i timeplanen. Denne andre biopsien vil muliggjøre prøvetaking av det helbredende området indusert av den første biopsien. Ved å velge en stansestørrelse to millimeter bredere og ta en prøve konsentrisk til den første, kan vi sikre fullstendig fjerning av interesseområdet.

Gruppe 3: en andre biopsi vil bli tatt på henholdsvis dag 6, på lignende måte som beskrevet for gruppe 2; bilder vil bli tatt i henhold til timeplanen.

Hudprøver: Parallelt med orale biopsier, vil hudbiopsier av tilsvarende størrelse og dybde som oral biopsi fra de samme forsøkspersonene bli tatt fra aksillærområdet etter samme tidsplan og prosedyre, inkludert en andre biopsi for gruppe 2 og 3.

Sår vil bli fotografert med digitalkamera og tilhelingen overvåkes ved klinikkbesøk i henhold til planen ovenfor. Det utskårne vevet i hvert tilfelle vil umiddelbart halveres på is; halvparten av prøven vil bli fiksert i 4% formaldehyd/PBS og innebygd i parafin for standard histologi og immunhistokjemi, og den resterende halvparten vil bli plassert i OCT-fylte plastbaseformer, flash-frosset i flytende nitrogen og lagret ved 80°C (uendelig). )C inntil behandlet for genomisk og proteomisk analyse.