行動、実行機能、神経伝達物質機能およびゲノム発現の評価 Kuvan Nonresponders (IST)

予想される研究参加者集団は、サプロプテリンの投与によって血中フェニルアラニン（PHE）レベルの低下を示さない（非応答者）ことが以前に判明した、Hayward Genetics Center から治療を受けている確立された約 30 人の PKU 患者でした。 被験者は、独自のコントロールとして機能しました。 その後、さらに多くのサプロプテリン未使用の患者が研究に追加され、IRB の承認により 21 歳以上の年齢除外は省略されました。 主要評価項目は、行動および認知機能、神経伝達物質レベル、およびベースラインレベルと比較した治療4週間後の酵素活性の遺伝子発現を測定するように設計されました。

研究のベースラインで、各患者は、通常の遺伝クリニックの場所で約 1 時間のクリニック訪問に参加しました。 研究の目的、デザイン、および要件が議論され、同意/同意が確認され、署名されました。

執行機能のパフォーマンスと行動の評価目録（BASC-2およびBRIEFTツール）は、主任研究者（PI）および/または研究コーディネーターによって患者と親に投与されました。

尿サンプルは、神経伝達物質レベルの測定のために非侵襲的に収集されました。 マイクロアレイ発現分析および血漿アミノ酸の分析のために、静脈穿刺により採取した血液(3～5ml)。 完了のために参加者に以前に提供された3日間の食事記録が収集されました。

参加者には、4 週間分の Kuvan® が提供され、研究期間中の服用方法が説明されました。 サプロプテリン投与に起因しない研究効果を最小限に抑えるために、通常の食事摂取量 (食品の選択と代謝式) を維持することの重要性が強調されました。 サプロプテリンは、4 週間の研究期間の終わりに中止されました。 これに対する例外は、サプロプテリンに反応することが判明した未経験の患者でした。

これらの測定はすべて、研究期間の第 4 週の終わりに研究参加者と同じ場所で繰り返されました。

1 週目と 2 週目の終わりに、追加の血液サンプルがヘイワード遺伝学センターに送られ、PHE とチロシン (TYR) のレベルが測定され、患者の通常の食事摂取量に有意な変化が生じていないことが確認されました。 これらのサンプルは、通常のモニタリングと同様に、各患者の地域の州保健ユニットで採取されました。 3 日間の食事日記の栄養分析は、Hayward Genetics Center で実施されました。

1. 行動と実行機能は、公開された検証済みの目録を使用して評価され、患者の自己報告として、また必要に応じて親 (または保護者) の報告として完成されました。 使用された手段は、子供のための行動評価システム（BASC-2）の親の評価尺度と自己申告型性格評価尺度、および実行機能の行動評価目録（BRIEF）の実行機能の親フォーム手段でした。 必要に応じてハーバード医療センターの専門家からの相談を受けて、調査コーディネーターおよび PI が電子評価機器を使用して、完成した目録を採点しました。
2. 尿サンプルは非侵襲的に収集され、カテコールと神経伝達物質の分析のために、この技術を専門とする NIH 研究所に送られました。 偏りを防ぐために、サンプルはこの実験室に対して盲検化されました。
3. サプロプテリン投与の結果としての遺伝子発現、したがって酵素活性への影響を決定するために、Hayward Genetics Molecular Laboratory で血液サンプルのマイクロアレイ分析が行われました。
4. 血漿アミノ酸はヘイワード・ジェネティックス・バイオケミカル・ラボラトリーで分析され、患者がサプロプテリンに「反応しない」（結果として血中 PHE が低下しない）ことが実証されました。また、患者が通常の食事制限を維持できていないことを示す可能性のある血漿アミノ酸の変化を監視します。 反応した Kuvan に未経験の患者が記録され、コンパレータとして機能します。
5. 患者（または親/保護者）が自宅で記入した3日間の食事日記は、研究期間中の通常の食事摂取量の実質的な変化を記録しました. これらは、MetabolicPro ウェブベースの分析プログラムを使用して、Hayward Genetics Center で分析されました。