Evaluering af adfærd, eksekutiv funktion, neurotransmitterfunktion og genomisk udtryk Kuvan Non-responders (IST)

Den forventede population af undersøgelsesdeltagere var ca. 30 etablerede PKU-patienter, der modtog behandling fra Hayward Genetics Center, som tidligere viste sig ikke at udvise noget fald i blodets phenylalanin (PHE) niveauer (non-responders) ved administration af sapropterin. Emner fungerede som deres egne kontroller. Et yderligere antal patienter, der er naive over for sapropterin, blev efterfølgende føjet til undersøgelsen, og alderseksklusionen på over 21 år blev udeladt pr. IRB-godkendelse. Primære endepunkter blev designet til at være måling af adfærdsmæssig og kognitiv funktion, neurotransmitterniveauer og genekspression af enzymaktivitet efter 4 ugers behandling sammenlignet med baseline-niveauer.

Ved undersøgelsens baseline deltog hver patient i et cirka 1 times klinikbesøg på deres sædvanlige genetikklinik. Undersøgelsens formål, design og krav blev diskuteret, og samtykke/samtykke blev gennemgået og underskrevet.

Bedømmelsesopgørelser over udøvende funktioners ydeevne og adfærd (BASC-2 og BRIEF værktøjer) blev administreret til patienter og forældre af den primære efterforsker (PI) og/eller undersøgelseskoordinatoren.

Urinprøver blev indsamlet non-invasivt til måling af neurotransmitterniveauer. Blod som opsamlet ved venepunktur (3-5 ml) til mikroarray-ekspressionsanalyse og analyse af plasmaaminosyrer. Der blev indsamlet 3-dages madoptegnelser, der tidligere var givet til deltagerne til afslutning.

Deltagerne fik en 4 ugers forsyning af Kuvan® og instruktioner om, hvordan de skulle tage medicinen i undersøgelsesperioden. Vigtigheden af ​​at opretholde det sædvanlige diætindtag (fødevarevalg og metabolisk formel) for at minimere enhver forskningseffekt, der ikke kan tilskrives sapropterinadministration, blev understreget. Sapropterin blev seponeret ved slutningen af ​​den 4 uger lange undersøgelsesperiode. Undtagelsen herfra var for de naive patienter, som viste sig at reagere på sapropterin.

Alle disse målinger blev gentaget på de samme steder med undersøgelsesdeltagere i slutningen af ​​uge 4 i undersøgelsesperioden.

I slutningen af ​​uge 1 og 2 blev yderligere blodprøver sendt til Hayward Genetics Center til måling af PHE og tyrosin (TYR) niveauer for at konstatere, at der ikke er sket væsentlige ændringer i en patients sædvanlige diætindtag. Disse prøver blev udtaget på hver patients lokale sundhedsenhed, som det gøres til sædvanlig overvågning. Næringsstofanalyse af 3-dages maddagbøger blev udført på Hayward Genetics Center.

1. Adfærd og eksekutiv funktion blev vurderet ved hjælp af offentliggjorte validerede opgørelser, udfyldt som patient selvrapporter og som forældre (eller værge) rapporter, når det var relevant. De anvendte instrumenter var Behavioural Assessment System for Children (BASC-2) forældrevurderingsskala og selvrapporterende personlighedsvurderingsskala og Behavioural Rating Inventory of Executive Function (BRIEF) Parent Form Instruments of Executive Function. Fuldførte opgørelser blev scoret ved hjælp af elektroniske evalueringsinstrumenter af studiekoordinatoren og PI, med konsultation fra Harvard Medical Center-eksperter efter behov.
2. Urinprøver blev ikke-invasivt indsamlet og sendt til analyse af katekoler og neurotransmittere til et NIH-laboratorium med speciale i denne teknik. Prøver blev blindet til dette laboratorium for at forhindre bias.
3. Mikroarray-analyse af blodprøver blev udført på Hayward Genetics Molecular Laboratory for at bestemme enhver effekt på genekspression, og dermed enzymaktivitet, som et resultat af sapropterinadministration.
4. Plasmaaminosyrer blev analyseret på Hayward Genetics Biochemical Laboratory for at dokumentere, at patienter "ikke reagerer" på sapropterin (ingen resulterende sænkning af blod-PHE); og at overvåge eventuelle ændringer i plasmaaminosyrer, der kunne indikere en patients manglende opretholdelse af sædvanlige diætrestriktioner. Patienter, der var naive over for Kuvan, og som reagerede, blev noteret og fungerede som komparatorer.
5. 3-dages maddagbøger udfyldt af patienter (eller forældre/værger) i hjemmet dokumenterede eventuelle væsentlige ændringer i det sædvanlige diætindtag i løbet af undersøgelsesperioden. Disse blev analyseret på Hayward Genetics Center ved hjælp af MetabolicPro webbaseret analyseprogram.