T細胞性急性リンパ芽球性白血病患者のサンプル研究

目的:

• 初代 T 細胞性急性リンパ芽球性白血病 (T-ALL) の代謝状態と制御を、休止中の末梢 T 細胞と比較して決定します。
• 代謝ストレス経路とアポトーシスに対する代謝阻害の効果を確立します。
• 代謝阻害が化学療法または標的療法薬とどのように相互作用して T-ALL 細胞を死滅させるかを決定します。

概要: 単独で、またはガンマ セクレターゼ阻害剤 (GSI) または PI3K 阻害剤と共に培養された T-ALL サンプルは、グルコース トランスポーター 1 (Glut1) 発現、ミトコンドリア質量、5' アデノシン一リン酸活性化プロテイン キナーゼ (AMPK) のリン酸化フローを含む代謝特性について分析されます。 ）、アセチル-CoAカルボキシラーゼ（ACC）、およびフローサイトメトリーによるラパマイシンの哺乳類標的（mTOR）。 T-ALL サンプルおよび正常な CD4+ T 細胞 (コントロール) も ± 2-デオキシグルコースまたは ± グルタミノリシス阻害剤培地にさらされ、時間の経過に伴う代謝ストレス応答、特に AMPK 活性化、オートファジー (LC3-II 処理の免疫蛍光) について分析されます。アポトーシスを示すBCL2関連Xタンパク質（Bak）およびBax活性化。 次に、これらの細胞 (T-ALL およびコントロール) をシクロホスファミド、デキサメタゾン、または B 細胞 CLL/リンパ腫 2 (Bcl-2) 阻害剤、ABT-737 と共に培養して、経時的な細胞死を測定します。