クロストリジウム・ディフィシル性下痢症に対する明確な糞便微生物叢移植

この研究は、最初に12人の被験者を登録します。 これまでに報告されたFMTの比較的大きな経験に基づいて、発熱、白血球増加症、下痢の停止、および被験者の8人以上（80％）の腹部不快感の消失によって決定される迅速かつ持続的な反応が予想されます。 治療を受けた最初の 6 人の患者のうち 3 人を超える患者でそのような反応が観察されない場合、FMT 混合物の組成を再評価するか、複数の接種物を投与する必要があるかどうかを検討します。 80% 以上の成功率が達成された場合、マイクロバイオームの臨床フォローアップと研究が合計 12 か月継続されます。 その間に、他の接種材料送達方法をテストするための新しい承認を取得する予定です (例: NG チューブまたは緩衝溶液での経口投与による)。 未知の可変組成の生糞便の使用とは対照的に、接種材料は定義され、定義された培地を使用した嫌気性条件下で成長します。 治療の前投与では、接種材料をグラム株で検査し、培養して、使用したオルガリズムが含まれていることを確認します。 汚染物質の可能性は非常に低いと考えられており、未知の病原体による汚染は本質的に不可能です. 追加の安全対策として、接種物は、食品やその他の非滅菌材料用に設計された胃腸管に投与されます。

被験者の 8 人以上 (80%) で、発熱、白血球増多症、下痢が止まり、腹部の不快感がなくなったことから、迅速かつ持続的な反応が見られると予想されます。 治療を受けた最初の 6 人の患者のうち 3 人を超える患者でそのような反応が観察されない場合、FMT 混合物の組成を再評価するか、複数の接種物を投与する必要があるかどうかを検討します。 80% の成功率が達成された場合、マイクロバイオームの臨床フォローアップと研究が合計 12 か月継続されます。

包含基準:

VA患者のみが、推奨用量のメトロニダゾールまたはバンコマイシンで10〜14日間治療され、反応しなかったか、反応して4週間以内に再発したCDIの診断が確認された場合、研究に適格です。治療の終わり。 診断は、下痢 (2 日間連続して 24 時間に 3 回以上の不定形便) および腹部不快感の存在によって確認されたとみなされます。 発熱、白血球増加、および血清アルブミンが 3 gm/dL 未満であることは記録されますが、診断には必要ありません。 患者は、インフォームド コンセントを与え、ベイラー IRB によって承認された適切な同意書に署名した後に含まれます。

手順: MEDVAMC で再発性 CDI が証明された患者は、参加するよう求められます。 入力されたすべての VA 患者の健康記録には、調査研究に登録されているというフラグが立てられます。 Tvede と Rask-Madsen によって記述された菌株は、後の出版物にこれらの菌株の記録がなく、ATCC、DSMZ、または CCUG などの公的な菌株リポジトリのいずれからも入手できないため、臨床分離株であると推測します。 これらの特定の菌株の代わりに、最初にヒトの糞便から分離され、ATCC から購入した、完全に配列決定された次の菌株を使用します: Bacteroides ovatus ATCC 8483、Bacteroides vulgatus ATCC 8482、および Bacteroides thetaiotaomicron ATCC 29148。 初代培養物は、前還元嫌気性血液寒天ANABA（Remel、Lenexa、KS）でGLP手順（添付のSOP）に従って増殖させ、その後、各株のブロス培養物を前還元培地で37℃で48時間嫌気的に培養します。自家製のみじん切り肉ミディアム。 細菌を 1,600 x g で 10 分間の遠心分離によって収集し、マクファーレン基準を使用して細菌濃度を推定し、最終濃度 10 の 8 乗から 9 cfu/mL を目標として、5 mL の滅菌前還元 0.9% 生理食塩水に再懸濁します。 アリコート (0.1 mL) を取り出して、連続希釈およびプレーティング、および前還元 ANABA プレート上で 37°C での嫌気性インキュベーションを行い、実際の細菌濃度を決定します。 3 つの生理食塩水懸濁液のそれぞれ 2 mL を 194 mL の滅菌前還元 0.9% 生理食塩水と組み合わせて、注入カクテルを形成します。 次に、200 mL の細菌懸濁液を、オリンパスの超薄型胃十二指腸鏡を使用して小腸に投与します。 小腸経路は、接種物の生存に対する胃酸の潜在的に有害な影響を回避し、胃に投与された量の逆流を防止または低減するために選択される。 その後、被験者は最大12か月間追跡されます。

移植手順: 患者は、経口バンコマイシン (125 mg q 6 時間) を 4 日間前処理して、C. difficile の負荷を軽減します。最終用量は、手順の前夜の午後 6 時に与えられます (約 14-16 時間前)。 FMT)。 FMTの前の夜と手順の朝に、患者は20 mgのオメプラゾールを経口で受け取ります。 処置の朝、直径 5.5 mm の「超薄型」胃鏡を口から患者の小腸に挿入し、先端をトライツ靭帯またはそれを超えて配置しようとします。 200 mL の細菌懸濁液は、内視鏡の生検チャネルを介して導入されたカテーテルを介して小腸に注入され、25 mL の滅菌前還元 0.9% 生理食塩水で洗い流されます。 内視鏡の除去後、回復後、患者は通常の食事と身体活動を再開することが許可されます。

被験者は、14日間、入院中は毎日診察を受けます（退院後は毎日電話で連絡を受けます）。 その後、被験者は 3 か月間は 30 日間、毎月、その後 1 年間は 3 か月ごとに連絡を受けます。 標準的なアンケートを使用して、接触ごとに症状を記録します。 鑑別、基本代謝パネルおよびアルブミンを含むCBCを含む臨床検査は、3日、10日、および30プラスまたはマイナス7日で取得されます。

臨床転帰の結果は、糞便マイクロバイオームに対する治療の効果の評価と組み合わされます。 便のサンプルは、最長 1 年間、または再発が証明されるまで定期的に収集されます。 便サンプルと直腸スワブは、最初の研究期間中、退院までまたは14日間毎日採取され、その後、30日ごとに3か月間隔で1年間便サンプルが採取されます。 退院後、サンプルはフェデラル・エクスプレスのコールドパックを使用して検査室に送られます。 これにより、C.ディフィシルに対する治療の効果と、投与された細菌の運命（ゲノム全体が配列決定され、公開されている）を詳細に調べることができるはずです。 詳しくは添付ファイル参照）。