Defineret fækal mikrobiota-transplantation for Clostridium Difficile-diarré

Denne undersøgelse vil i første omgang omfatte 12 forsøgspersoner. Baseret på den relativt store erfaring med FMT, der er rapporteret til dato, forventer vi en hurtig og vedvarende respons som bestemt af ophør af feber, leukocytose og diarré og et tab af abdominalt ubehag hos >8 (80%) af forsøgspersonerne. Hvis et sådant respons ikke observeres hos >3 af de første 6 behandlede patienter, vil vi revurdere sammensætningen af ​​FMT-blandingen og/eller overveje, om der skal gives mere end et inokulum. Hvis succesraten på 80 % eller derover opnås, fortsætter klinisk opfølgning og undersøgelser af mikrobiomet i i alt 12 måneder. I løbet af den tid ville vi planlægge at opnå nye godkendelser til at teste andre metoder til inokulumlevering (f.eks. via NG-rør eller oral administration i en bufferopløsning). I modsætning til brugen af ​​rå afføring af ukendt og variabel sammensætning, er podestoffet defineret og dyrket under anerobiske forhold med definerede medier. Før indgivelse af terapi vil podestoffet blive undersøgt med gram-stamme og derefter blive dyrket for at sikre, at det indeholder de orgamismer, der blev brugt. Chancen for en kontaminant menes at være meget usandsynlig, og kontaminering med et ukendt patogen er stort set umuligt. Som en ekstra sikkerhedsforanstaltning gives inokulumet i mave-tarmkanalen, som er designet til fødevarer og andre ikke-sterile materialer.

Vi forventer en hurtig og vedvarende respons, som bestemt af ophør af feber, leukocytose og diarré og et tab af abdominalt ubehag hos >8 (80%) af forsøgspersonerne. Hvis et sådant respons ikke observeres hos >3 af de første 6 behandlede patienter, vil vi revurdere sammensætningen af ​​FMT-blandingen og/eller overveje, om der skal gives mere end et inokulum. Hvis succesraten på 80 % opnås, fortsætter klinisk opfølgning og undersøgelser af mikrobiomet i i alt 12 måneder.

Inklusionskriterier:

Kun VA-patienter vil være berettiget til undersøgelsen, hvis de har haft en bekræftet diagnose af CDI, der er blevet behandlet i 10-14 dage med anbefalede doser af metronidazol eller vancomycin og enten har undladt at reagere eller har reageret og fået tilbagefald inden for 4 uger efter afslutningen af ​​behandlingen. Diagnosen vil blive betragtet som bekræftet af tilstedeværelsen af ​​diarré (>3 uformede afføringer i en 24-timers periode i 2 på hinanden følgende dage) og abdominal ubehag. Tilstedeværelsen af ​​feber, leukocytose og et serumalbumin <3 gm/dL vil blive registreret, men vil ikke være nødvendigt for diagnosen. Patienter vil blive inkluderet, efter at de har givet informeret samtykke og underskrevet den relevante samtykkeformular, der er godkendt af Baylor IRB.

Procedure: Patienter med påvist tilbagevendende CDI på MEDVAMC vil blive bedt om at deltage. Sundhedsjournalerne for alle VA-patienter, der er indtastet, vil blive markeret, at de er tilmeldt en forskningsundersøgelse. Vi antager, at stammerne beskrevet af Tvede og Rask-Madsen var kliniske isolater, da der ikke er nogen registrering af disse stammer i senere publikationer, og de er ikke tilgængelige fra nogen af ​​de offentlige stammedepoter såsom ATCC, DSMZ eller CCUG. I stedet for disse specifikke stammer vil vi bruge følgende fuldt sekventerede type stammer, oprindeligt isoleret fra human fæces og købt fra ATCC: Bacteroides ovatus ATCC 8483, Bacteroides vulgatus ATCC 8482 og Bacteroides thetaiotaomicron ATCC 29148. Primære kulturer vil blive dyrket i overensstemmelse med GLP-procedurer (SOP vedlagt) på præ-reduceret anaerob blodagar ANABA (Remel, Lenexa, KS), derefter vil bouillonkulturer af hver stamme blive anaerobt dyrket ved 37°C i 48 timer i præ-reduceret hakket kød medium, der vil blive lavet i huset. Bakterier vil blive opsamlet ved centrifugering ved 1.600 x g i 10 minutter og resuspenderet i 5 ml sterilt præ-reduceret 0,9% saltvand ved hjælp af Macfarlane-standarder til at estimere bakteriekoncentrationer for at målrette en slutkoncentration på 10 til styrken 8 til 9 cfu/mL. Alikvoter (0,1 ml) fjernes til seriefortynding og udpladning og anaerob inkubation ved 37°C på præ-reducerede ANABA-plader for at bestemme faktiske bakteriekoncentrationer. To ml af hver af de tre saltvandssuspensioner vil blive kombineret med 194 ml sterilt præreduceret 0,9 % saltvand for at danne infusionscocktailen. Den 200 ml bakterielle suspension vil derefter blive indgivet i tyndtarmen ved hjælp af et Olympus ultra-slankt gastroduodenoskop. Tyndtarmsvejen er valgt for at undgå de potentielt skadelige virkninger af mavesyre på inokulumets overlevelse og for at forhindre eller reducere tilbagesvaling af det volumen, der indgives i maven. Forsøgspersoner vil derefter blive fulgt i op til 12 måneder.

Transplantationsprocedure: Patienterne vil blive forbehandlet med 4 dages oral vancomycin (125 mg q 6 timer) for at reducere C. difficile-belastningen, hvor den endelige dosis gives kl. 18.00 aftenen før proceduren (ca. 14-16 timer før proceduren). FMT). Om aftenen før FMT og igen om morgenen efter proceduren vil patienterne modtage 20 mg omeprazol gennem munden. Om morgenen for proceduren vil et "super-slankt" gastroskop med en diameter på 5,5 mm per mund blive ført ind i patientens tyndtarm med et forsøg på at placere spidsen ved eller uden for Treitz ligament. To hundrede ml af bakteriesuspensionen vil blive dryppet ind i tyndtarmen via et kateter, der indføres gennem endoskopets biopsikanal og skylles med 25 ml sterilt præreduceret 0,9 % saltvand. Efter fjernelse af endoskopet, efter bedring, vil patienter få lov til at genoptage en normal diæt og fysiske aktiviteter.

Forsøgspersoner vil blive tilset dagligt, når de er på hospitalet (og kontaktes dagligt telefonisk, efter de er udskrevet) i 14 dage. Forsøgspersoner vil derefter blive kontaktet efter 30 dage og månedligt i 3 måneder, derefter hver 3. måned i et år. Symptomer vil blive registreret ved hver kontakt ved hjælp af et standardspørgeskema. Laboratorieundersøgelser inklusive CBC med differentielt, grundlæggende metabolisk panel og albumin vil blive opnået efter 3 dage, efter 10 dage og efter 30 plus eller minus 7 dage.

Resultaterne af det kliniske resultat vil blive kombineret med evaluering af terapiens effekt på det fækale mikrobiom. Afføringsprøve vil blive indsamlet regelmæssigt i op til 1 år eller indtil bevist tilbagefald. Afføringsprøver og rektale podninger vil blive taget dagligt i den indledende undersøgelsesperiode indtil udskrivelse fra hospitalet eller 14 dage og derefter afføringsprøver med 30 dage og med 3 måneders mellemrum i et år. Efter udskrivelse fra hospitalet vil prøver blive sendt til laboratoriet ved hjælp af kolde pakker af Federal Express. Dette skulle give os mulighed for i detaljer at undersøge effekten af ​​terapien på C. difficile såvel som på skæbnen for de administrerede bakterier (for hvilke hele genomet er blevet sekventeret og offentliggjort). for detaljer se vedhæftede filer).