Clostridium Difficile 설사에 대한 정의된 분변 미생물군 이식

이 연구는 처음에 12명의 피험자를 등록할 것입니다. 현재까지 보고된 FMT에 대한 상대적으로 많은 경험을 바탕으로 우리는 열, 백혈구 증가증 및 설사의 중단과 피험자의 >8(80%)에서 복부 불편감의 상실로 결정되는 신속하고 지속적인 반응을 예상합니다. 치료를 받은 처음 6명의 환자 중 >3명에서 그러한 반응이 관찰되지 않으면 FMT 혼합물의 구성을 재평가하고/하거나 하나 이상의 접종을 해야 하는지 여부를 고려할 것입니다. 80% 이상의 성공률을 달성하면 총 12개월 동안 임상 추적 및 마이크로바이옴 연구를 계속하게 됩니다. 그 기간 동안 우리는 다른 접종물 전달 방법(예: NG 튜브 또는 완충 용액의 경구 투여)을 테스트하기 위해 새로운 승인을 얻을 계획입니다. 알 수 없고 다양한 구성의 생 대변을 사용하는 것과는 대조적으로, 접종물은 정의된 배지를 사용하여 혐기성 조건에서 정의되고 성장합니다. 치료 전 투여 시 접종물은 그람 균주로 검사한 다음 사용된 오르가즘을 포함하는지 확인하기 위해 배양됩니다. 오염 물질의 가능성은 매우 희박한 것으로 생각되며 알려지지 않은 병원균에 의한 오염은 본질적으로 불가능합니다. 추가 안전 조치로 접종물을 식품 및 기타 비멸균 물질용으로 설계된 위장관에 투여합니다.

열, 백혈구증가증 및 설사의 중단과 피험자의 >8(80%)에서 복부 불쾌감의 상실로 결정되는 신속하고 지속적인 반응을 예상합니다. 치료를 받은 처음 6명의 환자 중 >3명에서 그러한 반응이 관찰되지 않으면 FMT 혼합물의 구성을 재평가하고/하거나 하나 이상의 접종을 해야 하는지 여부를 고려할 것입니다. 80%의 성공률이 달성되면 총 12개월 동안 임상 추적 및 마이크로바이옴 연구를 계속하게 된다.

포함 기준:

VA 환자는 권장 용량의 메트로니다졸 또는 반코마이신으로 10-14일 동안 치료를 받은 CDI 진단이 확인되었고 반응에 실패했거나 반응 후 4주 이내에 재발한 경우에만 연구에 참가할 수 있습니다. 치료 끝. 진단은 설사(연속 2일 동안 24시간 동안 3회 이상의 형태가 형성되지 않은 변) 및 복부 불편감의 존재에 의해 확인된 것으로 간주됩니다. 열, 백혈구증가증 및 혈청 알부민 < 3gm/dL의 존재가 기록되지만 진단에 필요하지는 않습니다. 환자는 정보에 입각한 동의를 하고 Baylor IRB에서 승인한 적절한 동의 양식에 서명한 후에 포함됩니다.

절차: MEDVAMC에서 입증된 재발성 CDI가 있는 환자에게 참여를 요청합니다. 입력한 모든 VA 환자의 건강 기록에는 그들이 연구 연구에 등록되어 있음이 표시됩니다. 우리는 Tvede와 Rask-Madsen에 의해 기술된 균주가 임상적 분리주라고 추정합니다. 이후 간행물에 이러한 균주에 대한 기록이 없고 ATCC, DSMZ 또는 CCUG와 같은 공개 균주 저장소에서 사용할 수 없기 때문입니다. 이러한 특정 균주 대신 원래 인간 대변에서 분리되고 ATCC에서 구입한 완전히 시퀀싱된 유형 균주인 Bacteroides ovatus ATCC 8483, Bacteroides vulgatus ATCC 8482 및 Bacteroides thetaiotaomicron ATCC 29148을 사용할 것입니다. 1차 배양은 사전 환원된 혐기성 혈액 한천 ANABA(Remel, Lenexa, KS)에서 GLP 절차(SOP 첨부)에 따라 성장될 것이며, 각 균주의 국물 배양물은 사전 환원된 혐기성 혈액 배지에서 48시간 동안 37°C에서 혐기적으로 배양될 것입니다. 집에서 만들 다진 고기 매체. 박테리아는 10분 동안 1,600 x g에서 원심분리에 의해 수집되고 Macfarlane 표준을 사용하여 5mL 멸균 사전 환원된 0.9% 식염수에 재현탁되어 박테리아 농도를 추정하여 10에서 8에서 9cfu/mL의 거듭제곱의 최종 농도를 목표로 합니다. 실제 박테리아 농도를 결정하기 위해 미리 환원된 ANABA 플레이트에서 37°C에서 연속 희석 및 플레이팅 및 혐기성 인큐베이션을 위해 분취량(0.1mL)을 제거합니다. 3개의 식염수 현탁액 각각 2mL를 멸균 사전 환원된 0.9% 식염수 194mL와 결합하여 주입 칵테일을 형성합니다. 그런 다음 200mL의 박테리아 현탁액을 Olympus 울트라 슬림 위십이지장경을 사용하여 소장에 투여합니다. 소장 경로는 접종물의 생존에 대한 위산의 잠재적으로 유해한 영향을 피하고 위로 투여된 부피의 역류를 방지하거나 줄이기 위해 선택됩니다. 피험자는 최대 12개월 동안 추적됩니다.

이식 절차: 환자는 C. difficile 부하를 줄이기 위해 4일 동안 경구용 반코마이신(125mg q 6시간)으로 전처리되며, 최종 용량은 시술 전날 저녁 오후 6시에 제공됩니다(약 14-16시간 전) FMT). FMT 전날 저녁과 시술 당일 아침에 환자는 20mg의 오메프라졸을 경구 투여받습니다. 시술 당일 아침에 직경 5.5mm의 "초슬림형" 위 내시경을 입으로 환자의 소장으로 통과시켜 팁을 Treitz 인대 또는 그 너머에 위치시키려고 시도합니다. 200mL의 박테리아 현탁액을 내시경의 생검 채널을 통해 삽입된 카테터를 통해 소장에 주입하고 25mL의 멸균 사전 환원된 0.9% 식염수로 플러시합니다. 내시경 제거 후 회복 후 환자는 정상적인 식사와 신체 활동을 재개할 수 있습니다.

피험자는 14일 동안 병원에 있을 때 매일 보게 됩니다(그리고 퇴원 후 매일 전화로 연락함). 피험자는 30일에 연락하고 3개월 동안 매월 연락한 다음 1년 동안 3개월마다 연락합니다. 증상은 표준 설문지를 사용하여 각 접촉 시 기록됩니다. 감별, 기본 대사 패널 및 알부민이 포함된 CBC를 포함한 실험실 검사는 3일, 10일 및 30 플러스 또는 마이너스 7일에 획득됩니다.

임상 결과의 결과는 분변 마이크로바이옴에 대한 요법의 효과 평가와 결합될 것입니다. 대변 ​​샘플은 최대 1년까지 또는 재발이 확인될 때까지 정기적으로 수집됩니다. 대변 ​​샘플 및 직장 면봉은 초기 연구 기간 동안 병원에서 퇴원할 때까지 또는 14일 동안 매일 채취한 다음 30일 및 3개월 간격으로 1년 동안 대변 샘플을 채취합니다. 퇴원 후 샘플은 Federal Express를 통해 콜드 팩을 사용하여 실험실로 보내집니다. 이를 통해 C. difficile에 대한 치료 효과와 투여된 박테리아의 운명(전체 게놈이 시퀀싱되고 게시됨)에 대한 치료 효과를 자세히 조사할 수 있습니다. 자세한 내용은 첨부파일 참조).