Gedefinieerde fecale microbiota-transplantatie voor Clostridium Difficile-diarree

Deze studie zal in eerste instantie 12 proefpersonen inschrijven. Op basis van de relatief grote ervaring met FMT die tot nu toe is gerapporteerd, verwachten we een snelle en aanhoudende respons zoals bepaald door het stoppen van koorts, leukocytose en diarree en een verlies van buikpijn bij> 8 (80%) van de proefpersonen. Als een dergelijke respons niet wordt waargenomen bij >3 van de eerste 6 behandelde patiënten, zullen we de samenstelling van het FMT-mengsel opnieuw evalueren en/of overwegen of meer dan één inoculum moet worden gegeven. Als het slagingspercentage van 80% of meer wordt bereikt, zullen de klinische follow-up en studies van het microbioom in totaal 12 maanden duren. Gedurende die tijd zouden we nieuwe goedkeuringen willen verkrijgen om andere methoden van inoculumtoediening te testen (bijv. via NG-buis of orale toediening in een gebufferde oplossing). In tegenstelling tot het gebruik van rauwe ontlasting van onbekende en variabele samenstelling, wordt het inoculum gedefinieerd en gekweekt onder aerobe omstandigheden met gedefinieerde media. Voorafgaand aan de toediening van de therapie zal het inoculum worden onderzocht door gramstam en vervolgens worden gekweekt om er zeker van te zijn dat het de gebruikte organismen bevat. De kans op een verontreiniging wordt zeer onwaarschijnlijk geacht en besmetting met een onbekende ziekteverwekker vrijwel onmogelijk. Als extra veiligheidsmaatregel wordt het inoculum toegediend in het maagdarmkanaal dat is ontworpen voor voedsel en andere niet-steriele materialen.

We verwachten een snelle en aanhoudende respons, zoals bepaald door het stoppen van koorts, leukocytose en diarree en een verlies van abdominaal ongemak bij> 8 (80%) van de proefpersonen. Als een dergelijke respons niet wordt waargenomen bij >3 van de eerste 6 behandelde patiënten, zullen we de samenstelling van het FMT-mengsel opnieuw evalueren en/of overwegen of meer dan één inoculum moet worden gegeven. Als het slagingspercentage van 80% wordt bereikt, zullen de klinische follow-up en studies van het microbioom in totaal 12 maanden duren.

Inclusiecriteria:

Alleen VA-patiënten komen in aanmerking voor de studie als ze een bevestigde diagnose van CDI hebben gehad die gedurende 10-14 dagen zijn behandeld met de aanbevolen doses metronidazol of vancomycine en ofwel niet hebben gereageerd, ofwel hebben gereageerd en binnen 4 weken terugvielen. het einde van de behandeling. De diagnose wordt als bevestigd beschouwd door de aanwezigheid van diarree (> 3 ongevormde ontlasting in een periode van 24 uur gedurende 2 opeenvolgende dagen) en buikpijn. De aanwezigheid van koorts, leukocytose en een serumalbumine <3 gm/dL worden geregistreerd, maar zijn niet noodzakelijk voor de diagnose. Patiënten worden opgenomen nadat ze geïnformeerde toestemming hebben gegeven en het juiste toestemmingsformulier hebben ondertekend dat is goedgekeurd door de Baylor IRB.

Procedure: Patiënten met bewezen recidiverende CDI in het MEDVAMC zullen worden gevraagd om deel te nemen. De gezondheidsdossiers van alle ingevoerde VA-patiënten zullen worden gemarkeerd als zijnde ingeschreven in een onderzoeksstudie. We nemen aan dat de door Tvede en Rask-Madsen beschreven stammen klinische isolaten waren, aangezien er geen vermelding van deze stammen is in latere publicaties en ze niet beschikbaar zijn in een van de openbare bronnen van stammen, zoals ATCC, DSMZ of CCUG. In plaats van deze specifieke stammen zullen we de volgende stammen van het volledig gesequenced type gebruiken, oorspronkelijk geïsoleerd uit menselijke uitwerpselen en gekocht bij ATCC: Bacteroides ovatus ATCC 8483, Bacteroides vulgatus ATCC 8482 en Bacteroides thetaiotaomicron ATCC 29148. Primaire culturen zullen worden gekweekt volgens GLP-procedures (bijgevoegde SOP) op voorgereduceerde anaerobe bloedagar ANABA (Remel, Lenexa, KS), vervolgens zullen bouillonculturen van elke stam anaëroob worden gekweekt bij 37°C gedurende 48 uur in voorgereduceerde medium gehakt vlees dat in huis wordt gemaakt. Bacteriën worden verzameld door centrifugatie bij 1.600 x g gedurende 10 minuten en opnieuw gesuspendeerd in 5 ml steriele voorgereduceerde 0,9% zoutoplossing, waarbij Macfarlane-standaarden worden gebruikt om de bacterieconcentraties te schatten om een ​​eindconcentratie van 10 tot de macht 8 tot 9 kve/ml te bereiken. Aliquots (0,1 ml) worden verwijderd voor seriële verdunning en uitplaten en anaerobe incubatie bij 37°C op voorgereduceerde ANABA-platen om de werkelijke bacterieconcentraties te bepalen. Twee ml van elk van de drie zoutoplossingssuspensies wordt gecombineerd met 194 ml steriele, vooraf gereduceerde 0,9% zoutoplossing om de infusiecocktail te vormen. De 200 ml bacteriesuspensie wordt vervolgens in de dunne darm toegediend met behulp van een ultradunne gastro-duodenoscoop van Olympus. De route via de dunne darm wordt gekozen om de potentieel schadelijke effecten van maagzuur op de overleving van het inoculum te vermijden en om reflux van het in de maag toegediende volume te voorkomen of te verminderen. De proefpersonen worden vervolgens gedurende maximaal 12 maanden gevolgd.

Transplantatieprocedure: Patiënten zullen worden voorbehandeld met 4 dagen orale vancomycine (125 mg q 6 uur) om de belasting van C. difficile te verminderen, waarbij de laatste dosis wordt gegeven om 18.00 uur op de avond vóór de procedure (ongeveer 14-16 uur vóór FMT). Op de avond voor FMT en opnieuw op de ochtend van de procedure krijgen patiënten 20 mg omeprazol via de mond. Op de ochtend van de procedure wordt een "superdunne" gastroscoop met een diameter van 5,5 mm per mond in de dunne darm van de patiënt gebracht met een poging om de punt op of voorbij het ligament van Treitz te plaatsen. Tweehonderd ml van de bacteriesuspensie zal in de dunne darm worden ingebracht via een katheter die door het biopsiekanaal van de endoscoop wordt ingebracht en wordt gespoeld met 25 ml steriele vooraf gereduceerde 0,9% zoutoplossing. Na verwijdering van de endoscoop, na herstel, mogen patiënten hun normale dieet en fysieke activiteiten hervatten.

Proefpersonen zullen gedurende 14 dagen dagelijks worden gezien in het ziekenhuis (en dagelijks telefonisch gecontacteerd nadat ze zijn ontslagen). Er wordt dan 30 dagen en maandelijks gedurende 3 maanden contact opgenomen met de proefpersonen, daarna elke 3 maanden gedurende een jaar. Symptomen worden bij elk contact geregistreerd aan de hand van een standaardvragenlijst. Laboratoriumonderzoeken inclusief CBC met differentieel, basismetabolisch panel en albumine worden verkregen na 3 dagen, na 10 dagen en na 30 plus of min 7 dagen.

De resultaten van de klinische uitkomst zullen worden gecombineerd met evaluatie van het effect van de therapie op het fecale microbioom. Er wordt regelmatig een ontlastingsmonster genomen tot 1 jaar of tot bewezen terugval. Tijdens de initiële onderzoeksperiode zullen dagelijks ontlastingsmonsters en rectale uitstrijkjes worden genomen tot ontslag uit het ziekenhuis of 14 dagen, en vervolgens ontlastingsmonsters om de 30 dagen en met tussenpozen van 3 maanden gedurende een jaar. Na ontslag uit het ziekenhuis worden monsters met behulp van cold packs naar het laboratorium gestuurd door Federal Express. Dit moet ons in staat stellen om in detail het effect van de therapie op de C. difficile te onderzoeken, evenals op het lot van de toegediende bacteriën (waarvan het volledige genoom is gesequenced en gepubliceerd). voor details zie bijlagen).