Trasplante de microbiota fecal definida para la diarrea por Clostridium difficile

Este estudio reclutará inicialmente a 12 sujetos. Con base en la experiencia relativamente grande con FMT informada hasta la fecha, anticipamos una respuesta rápida y sostenida determinada por el cese de la fiebre, la leucocitosis y la diarrea y una pérdida de molestias abdominales en >8 (80%) de los sujetos. Si no se observa dicha respuesta en >3 de los primeros 6 pacientes tratados, reevaluaremos la composición de la mezcla de FMT y/o consideraremos si se debe administrar más de un inóculo. Si se logra una tasa de éxito del 80 % o más, el seguimiento clínico y los estudios del microbioma continuarán durante un total de 12 meses. Durante ese tiempo, planearíamos obtener nuevas aprobaciones para probar otros métodos de administración de inóculo (p. ej., a través de una sonda nasogástrica o administración oral en una solución tamponada). A diferencia del uso de heces crudas de composición variable y desconocida, el inóculo se define y se cultiva en condiciones anaerobias con medios definidos. Antes de la administración de la terapia, el inóculo se examinará mediante una cepa de Gram y luego se cultivará para asegurarse de que contiene los organismos que se usaron. Se cree que la posibilidad de un contaminante es muy poco probable y la contaminación con un patógeno desconocido es esencialmente imposible. Como medida de seguridad adicional, el inóculo se administra en el tracto gastrointestinal, que está diseñado para alimentos y otros materiales no estériles.

Anticipamos una respuesta rápida y sostenida, determinada por el cese de la fiebre, la leucocitosis y la diarrea y la desaparición de las molestias abdominales en >8 (80 %) de los sujetos. Si no se observa dicha respuesta en >3 de los primeros 6 pacientes tratados, reevaluaremos la composición de la mezcla de FMT y/o consideraremos si se debe administrar más de un inóculo. Si se alcanza la tasa de éxito del 80 %, el seguimiento clínico y los estudios del microbioma continuarán durante un total de 12 meses.

Criterios de inclusión:

Solo los pacientes de VA serán elegibles para el estudio si han tenido un diagnóstico confirmado de CDI que ha sido tratado durante 10 a 14 días con las dosis recomendadas de metronidazol o vancomicina y no ha respondido, o ha respondido y recaído dentro de las 4 semanas posteriores. el final del tratamiento. El diagnóstico se considerará confirmado por la presencia de diarrea (> 3 deposiciones sin formar en un período de 24 horas durante 2 días sucesivos) y molestias abdominales. Se registrará la presencia de fiebre, leucocitosis y albúmina sérica < 3 g/dl, pero no será necesaria para el diagnóstico. Los pacientes serán incluidos después de que hayan dado su consentimiento informado y hayan firmado el formulario de consentimiento apropiado que haya sido aprobado por el IRB de Baylor.

Procedimiento: Se invitará a participar a los pacientes con ICD recurrente comprobada en el MEDVAMC. Los registros de salud de todos los pacientes de VA ingresados ​​se marcarán como que están inscritos en un estudio de investigación. Suponemos que las cepas descritas por Tvede y Rask-Madsen fueron aislamientos clínicos ya que no hay registro de estas cepas en publicaciones posteriores y no están disponibles en ninguno de los repositorios públicos de cepas como ATCC, DSMZ o CCUG. En lugar de estas cepas específicas, utilizaremos las siguientes cepas completamente secuenciadas, originalmente aisladas de heces humanas y adquiridas de la ATCC: Bacteroides ovatus ATCC 8483, Bacteroides vulgatus ATCC 8482 y Bacteroides thetaiotaomicron ATCC 29148. Los cultivos primarios se cultivarán de acuerdo con los procedimientos GLP (SOP adjunto) en agar sangre anaeróbico prerreducido ANABA (Remel, Lenexa, KS), luego los caldos de cultivo de cada cepa se cultivarán anaeróbicamente a 37 °C durante 48 horas en agar sangre anaeróbico prerreducido carne picada mediana que se hará en casa. Las bacterias se recogerán mediante centrifugación a 1.600 x g durante 10 minutos y se resuspenderán en 5 ml de solución salina prerreducida estéril al 0,9 %, usando los estándares de Macfarlane para estimar las concentraciones bacterianas y alcanzar una concentración final de 10 elevado a 8 a 9 ufc/ml. Se extraerán alícuotas (0,1 ml) para diluciones en serie y placas e incubación anaeróbica a 37 °C en placas de ANABA prerreducidas para determinar las concentraciones bacterianas reales. Dos ml de cada una de las tres suspensiones de solución salina se combinarán con 194 ml de solución salina al 0,9 % estéril previamente reducida para formar el cóctel de infusión. A continuación, se administrará la suspensión bacteriana de 200 ml en el intestino delgado mediante un gastroduodenoscopio ultrafino de Olympus. La vía del intestino delgado se elige para evitar los efectos potencialmente nocivos del ácido gástrico sobre la supervivencia del inóculo y para prevenir o reducir el reflujo del volumen administrado al estómago. Luego se seguirá a los sujetos hasta por 12 meses.

Procedimiento de trasplante: los pacientes recibirán un tratamiento previo con 4 días de vancomicina oral (125 mg cada 6 horas) para reducir la carga de C. difficile, y la dosis final se administrará a las 6:00 p. m. la noche anterior al procedimiento (aproximadamente 14 a 16 horas antes). TMF). La noche anterior al FMT y nuevamente la mañana del procedimiento, los pacientes recibirán 20 mg de omeprazol por vía oral. En la mañana del procedimiento, se pasará un gastroscopio "superdelgado" de 5,5 mm de diámetro por boca en el intestino delgado del paciente con un intento de colocar la punta en o más allá del ligamento de Treitz. Se instilarán 200 ml de la suspensión bacteriana en el intestino delgado a través de un catéter introducido a través del canal de biopsia del endoscopio y se enjuagará con 25 ml de solución salina al 0,9 % prerreducida estéril. Después de la extracción del endoscopio, después de la recuperación, los pacientes podrán reanudar una dieta y actividades físicas normales.

Los sujetos serán vistos diariamente cuando estén en el hospital (y contactados diariamente por teléfono después de que sean dados de alta) durante 14 días. Luego, se contactará a los sujetos a los 30 días y mensualmente durante 3 meses, luego cada 3 meses durante un año. Los síntomas se registrarán en cada contacto mediante un cuestionario estándar. Los exámenes de laboratorio que incluyen CBC con diferencial, panel metabólico básico y albúmina se obtendrán a los 3 días, a los 10 días y a los 30 más o menos 7 días.

Los resultados del resultado clínico se combinarán con la evaluación del efecto de la terapia en el microbioma fecal. La muestra de heces se recolectará regularmente hasta 1 año o hasta que se demuestre la recaída. Las muestras de heces y los hisopos rectales se obtendrán diariamente durante el período inicial del estudio hasta el alta del hospital o 14 días y luego las muestras de heces a los 30 días y en intervalos de 3 meses durante un año. Después del alta del hospital, las muestras se enviarán al laboratorio utilizando compresas frías por Federal Express. Esto debería permitirnos examinar en detalle el efecto de la terapia sobre C. difficile, así como sobre el destino de las bacterias administradas (cuyo genoma completo ha sido secuenciado y publicado). para más detalles ver adjuntos).