メチル-qPCR : 同種造血幹細胞移植中のエプスタイン-バーウイルス関連リンパ球増殖の新しい予測マーカー (EBVALLO)
科学的背景
エプスタイン-バーウイルスは、複数の異なるリンパ腫の病因において原因となる役割を果たします。 移植後リンパ増殖性疾患 (PTLD) は、最も頻繁に発生する EBV による増殖です。 同種幹細胞移植後の PTLD の発生率は 5% 未満ですが、危険因子が確立されている患者では 10 ～ 20% まで増加する可能性があります。 EBV-DNA 血症は EBV-PTLD の予測因子であり、全血に対して qPCR を使用して定期的に実行されます。 患者が定義された EBV-DNA 血症の閾値を超えている場合、抗 CD20 抗体による先制治療戦略が使用されます。 このアプローチは、EBV によって誘導されるリンパ球増殖 (潜伏サイクル) および/または複製するウイルス (複製サイクル) を区別しないため、制限されたままです。
エピジェネティックな修飾は、潜在遺伝子発現から溶解遺伝子発現への切り替えを調節する上で中心的な役割を果たします。 特定の DNA 修飾は、ウイルス感染の状態 (潜在性と溶解性) に関連する EBV ゲノムの分子シグネチャと見なすことができます。 したがって、これらの署名は、in vivo でのウイルス感染の状態を特徴付ける強力なツールとして想定される場合があります。
プロジェクトの説明私たちの主な目的は、同種幹細胞移植 HSCT 後に高 EBV-DNA 血症を呈する患者の EBV 溶解性および EBV 潜在性ゲノム (増殖細胞) のそれぞれの割合を、EBV ゲノムのエピジェネティックな修飾を分析することによって推定することです特定のサイト。 私たちの二次的な目的は、i) 各「潜伏型 対 溶菌性 EBV」プロファイルに関連する危険因子を特定すること、および ii) 「潜伏型 対 溶菌性 EBV」プロファイルをリツキシマブ注入への反応および患者の転帰と相関させることです。
この目的のために、レトロスペクティブ研究 (n=80) とプロスペクティブ研究 (推定 n=58) が確立されます。 このプロジェクトのさまざまなステップは次のとおりです。
- エピジェネティックな修飾を研究する。 研究室では、潜在ゲノムと溶解ゲノムを区別するための新しいアプローチを開発しています。
- ウイルスの潜伏期または溶解期に特異的なさまざまな EBV 転写産物の RT-PCR による定量分析を実現するには、この方法は、RNA の完全性を維持する条件下で、EBV ウイルス量が増加した患者の血液サンプルから抽出した RNA に適用されます。 結果は、HSCT 患者 (n=58) の前向きコホートで検証されます (Saint-Antoine Hospital および La Pitié-Salpêtrière Hospital)。
- 血漿、唾液、および総血液サンプル中の EBV ゲノムの定量分析を現在の日常的な手順で実行するには、総血液サンプルに加えて、遊離ウイルス粒子が EBV 再活性化時にこれらの生体液に蓄積することが知られているため、血漿および唾液を収集します。 これらのサンプルは、ヒトサンプル中の EBV を定量化するために医療ウイルス学研究室で日常的に使用されている正規化された手順によって処理されます。
期待される結果 EBV ゲノムのエピジェネティックな修飾を研究するための簡単な方法を確立することにより、高 EBV ウイルス負荷の重要性と HSCT 後の PTLD の病態生理学を理解することが期待されます。 HSCT患者の潜伏/溶解プロファイルを区別し、PTLDを発症するそれぞれのリスクを相関させることを目指しています。 ウイルス量の増加と PTLD に直面したときに HSCT 後の設定でエピジェネティックな EBV プロファイルを確立することで、HSCT 後の EBV 状態を決定する生物学的メカニズムの理解が向上します。 これにより、主要な医療上および経済上の問題が改善されるはずです。 これらの結果は、主要な治療法となる可能性があります
調査の概要
詳細な説明
学習期間 :
総試験期間: 37 か月 募集期間: 24 か月 各患者の参加期間: 13 か月
包含基準:
レトロスペクティブ研究: 2010 年から 2015 年の間にサン アントワーヌ病院で HSCT を受け、高レベル EBV-DNA 血症 (3.3 log コピー/mL 以上) のためにリツキシマブで治療された患者。
前向き研究：2016年から2017年にサン・アントワーヌ病院とラ・ピティエ・サルペトリエールでHSCTを受け、高レベルEBV-DNA血症（10,000c/mL以上）のためにリツキシマブで治療された患者、および/または移植後のリンパ増殖性疾患を有する患者(PTLD) 対象集団 エプスタイン-バーウイルス (EBV) ウイルス量が多い同種造血幹細胞移植 (allo-HSCT) 患者
研究のエンドポイント:
主要評価項目 (主要目的に関連) EBV ウイルス負荷が高い (3.3 log コピー/ml を超える) HSCT 患者のコホートにおける、EBV ゲノムの特定の部位のメチル化レベルによって定義される潜在的 対 複製的 EBV プロファイルのそれぞれのパーセンテージリツキシマブによる治療開始前。 メチル化指数は、患者の血液サンプルに対して実行されたメチル-qPCR の「サイクル閾値」のそれぞれの差から計算されます。
- EBV q-PCRの結果による患者の特徴
メチル qPCR によって定義された EBV プロファイルによる患者の転帰:
- リツキシマブ注入に対する反応（最大 4 回の注入後の EBV DNA 血症 < 3.3 log コピー/mL）
- 再発のない生存として定義される 12 か月の無病生存期間 (DFS)
- 12 か月の全生存期間 (OS)
- 12か月での再発率（RI）
- 12 か月の非再発死亡率 (NRM)
- 12か月以内のHSCT後の感染の数
統計分析 ：
潜在ゲノムと溶菌ゲノムの特性の比較は、パラメトリック (スチューデント t 検定) またはノンパラメトリック (Mann Whitney 検定) を使用して実行されます。
「溶解性ＥＢＶ」プロファイルに関連する危険因子を決定するための多変量解析は、ロジスティック回帰を使用して実行される。
- 「潜伏対溶解性ＥＢＶプロファイル」とリツキシマブ注入に対する応答との間の相関関係は、リツキシマブに対する応答に潜在的に関連する他のすべての要因をモデルに含むロジスティック回帰を使用して実行される。 OS と DFS は、Kaplan-Meier 法を使用して推定されます。 RIおよびNRMの累積発生率は、組み入れ日から再発日または寛解中の死亡日までそれぞれ計算され、他のイベントは競合するリスクです。 死亡または進行は、急性 GVHD の発生率を推定するための競合イベントと見なされます。 生存エンドポイントの多変量解析は、Cox 比例ハザード モデルを使用して実行されます。 タイプ I エラー率は、イベント結果までの時間に関連する要因を決定するために 0.05 に固定されています。 すべての統計分析は、R ソフトウェア パッケージ (R Foundation for Statistical Computing、ウィーン、オーストリア) を使用して実行されます。
研究の種類
入学 (実際)
段階
- 適用できない
連絡先と場所
研究場所
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Paris、フランス、75012
- Service d'Hematologie Clinique
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参加基準
適格基準
就学可能な年齢
健康ボランティアの受け入れ
受講資格のある性別
説明
包含基準:
後ろ向き研究:
- サンアントワーヌ病院で HSCT を受けた患者
- 2010年から2015年の間、
- 高レベルの EBV-DNA 血症 (3.3 log コピー/mL を超える) に対してリツキシマブで治療。
前向き研究：
- Saint-Antoine 病院と la Pitié-Salpêtrière で HSCT を受けた患者
- 2017年から2018年にかけて、
- 高レベルの EBV-DNA 血症 (10,000c/mL 以上) に対してリツキシマブで治療されている、
- および/または移植後リンパ増殖性疾患(PTLD)を有する
除外基準:
- インフォームドコンセントへの署名の拒否
- 社会保障制度の受給者でない患者
研究計画
研究はどのように設計されていますか？
デザインの詳細
- 主な目的：基礎科学
- 割り当て：なし
- 介入モデル：単一グループの割り当て
- マスキング：なし（オープンラベル）
武器と介入
参加者グループ / アーム |
介入・治療 |
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他の：EBV+同種移植集団
レトロスペクティブ研究 (n=80) : 2010 年から 2015 年の間にサン アントワーヌ病院で HSCT を受け、高レベル EBV-DNA 血症 (3.3 log コピー/mL 以上) のためにリツキシマブで治療された患者。 前向き研究 (n=58) : 2016-2017 年にサン アントワーヌ病院とラ ピティエ サルペトリエールで HSCT を受け、高レベル EBV-DNA 血症 (10 000c/mL 以上) のためにリツキシマブで治療された患者、および/または移植後リンパ増殖性疾患（PTLD） 関係集団 エプスタイン・バーウイルス（EBV）ウイルス量が多い同種造血幹細胞移植（allo-HSCT）患者 |
D0:
D8: 血液サンプル 結果は、逆転写定量的 PCR (RT-qPCR) によるウイルスの潜伏期または複製期に特異的な EBV 転写産物の分析と、唾液中の遊離ウイルスの検出と比較されます。ウイルスの再活性化 |
この研究は何を測定していますか？
主要な結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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潜伏 EBV プロファイルと複製 EBV プロファイルのそれぞれのパーセンテージ
時間枠：12ヶ月
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リツキシマブによる治療開始前の EBV ウイルス量が高い (10,000 c/ml を超える) HSCT 患者のコホートにおける、EBV ゲノムのエピジェネティックな修飾によって定義されます。
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12ヶ月
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二次結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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EBV結果による患者の特徴
時間枠：12ヶ月
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ウイルス負荷の高い同種 HSCT において、潜伏 EBV プロファイルと複製 EBV プロファイルに関連する危険因子を特定する。
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12ヶ月
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EBVプロファイルによる患者の転帰
時間枠：12ヶ月
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-リツキシマブ注入に対する反応（最大4回の注入後のEBV DNA血症<3 logコピー/ mL）
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12ヶ月
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協力者と研究者
捜査官
- 主任研究者：Eolia Brissot, Associate Professor、Assistance Publique - Hôpitaux de Paris
研究記録日
主要日程の研究
研究開始 (実際)
一次修了 (実際)
研究の完了 (実際)
試験登録日
最初に提出
QC基準を満たした最初の提出物
最初の投稿 (実際)
学習記録の更新
投稿された最後の更新 (実際)
QC基準を満たした最後の更新が送信されました
最終確認日
詳しくは
本研究に関する用語
追加の関連 MeSH 用語
その他の研究ID番号
- NI15023
個々の参加者データ (IPD) の計画
個々の参加者データ (IPD) を共有する予定はありますか?
医薬品およびデバイス情報、研究文書
米国FDA規制医薬品の研究
米国FDA規制機器製品の研究
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