インプラント周囲疾患の影響を受ける歯周歯とインプラント周囲の微生物叢。

歯内療法用に滅菌ペーパーポイントを介して採取されたもので、歯周炎の影響を受けた歯科要素の周囲に存在する溝状の液体と、同じ患者では、インプラント周囲炎の影響を受けたインプラントのインプラント周囲溝の内側に存在する液体が採取されました。 より多くのインプラントがインプラント周囲炎の影響を受けていると考えられる場合、参加者は最悪の箇所をサンプル部位として選択します。 歯周病に罹患した歯の場合も同じ原理に従います。 細菌を正確に同定するために、サンプルは細菌ゲノムメタ分析を受ける必要があります。 細菌叢をよりよく比較するために、同じ患者の健康な歯であっても、検査部位として選択され、歯肉溝液が採取されます。

研究者らは、病原体種に関する完全な知識が正しい治療戦略の出発点であると考えています。 しかし、口腔微生物叢の個々の特徴を念頭に置くことが非常に重要です。

初めに注目すべきデータは次のとおりです。

アーミテージ 1999 分類内の正確な枠組みを含む歯周病の兆候と症状、およびインプラント周囲疾患。 研究の目的として、インプラント周囲炎の定義は、プロービング時の出血およびまたは化膿（BOP および Supp）および X 線撮影による骨損失（BL）を伴う、最小プロービング深さ 4 mm のインプラントに関するものです。

第 8 回欧州歯周病コンセンサス会議ワーキング グループ 4 の定義の順序で記録された BL の証拠: 予備的な rx が存在しない場合、予想される骨レベルから BL > 2 mm。予備受信が存在する場合、受信は測定記録の SD (1 ～ 1.5 mm) の 2 ～ 3 倍です。

1. X線撮影による検出と事前介入を並行技術で実行します（CBCTはオプション）。
2. 術前、術中、術後の写真（存在する場合）
3. 最長 6 か月 / 1 年間の追跡調査（オプション） この研究では、微生物学的調査のために募集された患者の歯周溝およびインプラント周囲溝の周囲で採取された GCF が提供されます。 サンプルの分析は「ブラインド」で実行されます。 使用されるプローブは UNC15 であり、校正された臨床医 1 名のみがプローブを実行します。 病原菌微生物叢は、同じ患者の健康な歯の周囲で採取された健康な歯の微生物叢と比較されます。

歯肉縁上の細菌性プラークによるサンプルの汚染を避けるためのサンプル部位の前処理は、次のように行われます。

- サンプリングの 2 日前に、患者は歯肉縁下のプラークを除去することのみを目的とした専門的な洗浄カップとブラシを受けます。 また、1日2回のブラッシングや必要に応じて他の器具の使用など、適切な口腔衛生指導も提供されます。

サンプリング手順: 採取は、チップ 30 および ISO テーパー 4% までの滅菌ペーパー ポイントを通して実行されます。 最小の抵抗が感じられるまでのサンプリング手法は、図に示され、文字 c でマークされている手法 (脳頭蓋内深部法) になります。 各ペーパーポイントは 5 秒間所定の位置に留まり、その後特別な滅菌容器に容易に保管され、冷蔵保管され、検査を実施する研究所の環境に 60 分以内に配送されます。 血液汚染を示す採取物は検査から除外されます。

微生物学的プロトコル

1. サンプルの収集と DNA の分離 メタゲノム分析の場合、研究に含まれる患者による紙片/ペーパーポイントのサンプルは、4 °C の PBS (リン酸緩衝生理食塩水) で一晩溶出されます。その後、サンプルは 10,000 で遠心分離されます。 4℃で15分間rpm。 ペーパーポイントを除去した後、上清は QIAamp DNA Mini キットを使用した DNA の抽出に使用されます。 DNA は、QUBIT Kit dsDNA HS ASSAY KIT (Life Technologies) を使用して Qubit® 2.0 Fluorometer (Thermo Fisher) で定量されます。
2. 16S rRNA の分析 - メタゲノミクス メタゲノム分析は、MiSeq プラットフォーム Illumina で実行されます。 遺伝子ライブラリーは、MiSeq v3 試薬キットを通じて配列決定されます。 16S rRNA 超可変領域は、プライマー V5 ～ V7 を使用して 5 ng/l の DNA 濃度を使用して増幅されます。

ライブラリーは磁気ビーズ (AgencourtAmpure XP、Beckman) によって精製され、ライブラリーのフラグメントの濃度と分布はマイクロアナライザー 2100 (Agilent Technologies) の DNA チップ 1000 で評価されます。 配列 (アンプリコン データ セット) の解析と OTU (OperationalTaxonomicUnits) の決定は、16S rRNA 遺伝子データベース Greengenes を使用して QIIME パイプラインによって実行されます。

包含基準:

• 技術的なGBRを使用せずに少なくとも1年間使用されている資産（したがって、抽出後も調査から除外されます）
• 自然骨に作用する
• 病歴フォームとイベント専用の歯周ボード、および J ClinPeriodontol 2012 で発表された研究に基づいた臨床医用のカードに記入します。 39 (補足 12): 224-244
• システムボードの種類によるレポート (オプションの手術手法)

除外基準:

• インプラントの挿入が禁忌となるサブイントラントの全身状態にある患者
• 手術後過去 3 か月以内に抗生物質を服用しているか、急性事象を解決するために何らかの治療を受けている患者。 同じことが後で研究の対象となる可能性があります。
• 妊娠中、授乳中、またはホルモン療法を受けている女性