임플란트 주위 질환에 의해 영향을 받는 치주 치아 및 임플란트 주변의 미생물군.

치주염에 의해 영향을 받은 치과 요소 주위에 존재하는 열구액, 및 동일한 환자에서 임플란트 주위염에 영향을 받은 임플란트의 임플란트 주위 열구 내부에 존재하는 유체를 근관 치료용으로 멸균 종이 포인트를 통해 수확했습니다. 더 많은 임플란트가 임플란트주위염의 영향을 받는 것으로 간주되면 참가자는 최악의 샘플 위치를 선택합니다. 치주병에 걸린 치아의 경우에도 같은 원리를 따를 것입니다. 샘플은 박테리아의 정확한 식별을 위해 박테리아 게놈 메타 분석을 거쳐야 합니다. 식물상을 더 잘 비교하기 위해 동일한 환자의 건강한 치아라도 시험 부위와 같이 선택하고 치은 열구액을 채취합니다.

연구자들은 병원체 종에 대한 완벽한 지식이 올바른 치료 전략의 출발점이라고 생각합니다. 그러나 구강 미생물의 개별 특성을 염두에 두는 것이 정말 중요합니다.

처음에 기록해야 할 데이터는 다음과 같습니다.

Armitage 1999 분류 및 임플란트 주위 질환 내에서 정확한 프레임을 사용한 치주 질환의 징후 및 증상. 임플란트 주위염의 연구 정의의 목적을 위해 프로빙 및/또는 화농(BOP 및 Supp) 및 방사선학적 골 손실(BL) 시 출혈이 있는 최소 프로빙 깊이가 4mm인 임플란트에 관한 것입니다.

8차 유럽 합의 치주학 실무 그룹 4회의 정의 순서대로 기록된 BL의 증거: BL > 예비 rx가 없는 경우 예상 뼈 수준에서 2mm; Rx는 예비 rx가 있는 경우 측정 기록의 SD(1-1,5mm)의 2-3배입니다.

1. 병렬 기술(CBCT 선택 사항)을 사용하여 진단 방사선 촬영 및 사전 개입을 감지합니다.
2. 수술 전, 수술 중 및 수술 후 사진(있는 경우)
3. 최대 6개월/1년 추적(선택 사항) 이 연구는 미생물 조사를 위해 모집된 환자의 치주 및 임플란트 주변 열구 주변에서 수확된 GCF를 제공합니다. 샘플 분석은 "맹검"으로 수행됩니다. 사용된 프로브는 UNC15이며 보정된 임상의 한 명만 프로빙을 수행합니다. 병원균 미생물총은 동일한 환자의 건강한 치아 주변에서 수확된 건강한 치아 미생물군과 비교됩니다.

치은연상 세균 플라크에 의한 샘플 오염을 방지하기 위해 샘플 부위의 전처리는 다음과 같이 진행됩니다.

- 샘플링 2일 전에 환자는 치은연하 플라크를 제거하기 위한 목적으로만 전문적인 세척 컵과 브러시를 사용합니다. 또한 우리는 하루에 두 번 칫솔질과 필요한 경우 다른 기구의 사용과 함께 적절한 구강 위생 교육을 제공받을 것입니다.

샘플링 절차: 수확된 것은 팁 30 및 ISO 테이퍼 4% 정도의 멸균 종이 포인트를 통해 수행됩니다. 샘플링 기술은 그림에 표시되고 최소 저항이 느껴질 때까지 문자 c(Crevicular deep method)로 표시됩니다. 각 페이퍼 포인트는 5초 동안 그대로 유지되며 특수 멸균 용기에 쉽게 보관되고 냉장 보관되며 검사를 수행할 연구소 환경으로 60분 이내에 배송됩니다. 혈액 오염을 나타내는 수확물은 검사에서 제외됩니다.

미생물 프로토콜

1. 샘플 수집 및 DNA 분리 metagenomic 분석을 위해 연구에 포함된 환자의 페이퍼 스트립/페이퍼 포인트 샘플을 4℃에서 PBS(인산염 완충 식염수)에서 밤새 용출합니다. 이후 샘플을 10,000에서 원심분리합니다. 4℃에서 15분 동안 rpm 종이 점을 제거한 후 상등액은 QIAamp DNA Mini 키트를 사용하여 DNA 추출에 사용됩니다. DNA는 QUBIT Kit dsDNA HS ASSAY KIT(Life Technologies)를 사용하여 Qubit® 2.0 Fluorometer(Thermo Fisher)로 정량화됩니다.
2. 16S rRNA 분석 - Metagenomics metagenomics 분석은 MiSeq 플랫폼 Illumina에서 수행됩니다. 유전자 라이브러리는 MiSeq v3 시약 키트를 통해 시퀀싱됩니다. 16S rRNA 초가변 영역은 프라이머 V5-V7과 함께 5ng/l의 DNA 농도를 사용하여 증폭됩니다.

라이브러리는 자기 비드(AgencourtAmpure XP, Beckman)에 의해 정제되고 라이브러리 단편의 농도 및 분포는 마이크로분석기 2100(Agilent Technologies)의 DNA 칩 1000에서 평가됩니다. 서열(앰플리콘 데이터 세트)의 분석 및 OTU(OperationalTaxonomicUnits)의 결정은 16S rRNA 유전자 데이터베이스 Green gene을 사용하여 QIIME 파이프라인에 의해 수행될 것이다.

포함 기준:

• 기술적 GBR 없이 최소 1년 동안 사용 중인 자산(따라서 추출 후 연구에서도 제외됨)
• 네이티브 뼈에 작업 입력
• J ClinPeriodontol 2012에 게시된 작업을 기반으로 하는 임상의를 위한 카드뿐만 아니라 이벤트 전용 의료 기록 양식 및 치주 보드를 작성합니다. 39(서플라이 12): 224-244
• 시스템 보드 유형 보고(선택적 수술 기법)

제외 기준:

• 보형물의 삽입을 금하는 subintrant systemic conditions에 있는 환자
• 지난 3개월 동안 환자는 수술 후 항생제를 복용했거나 급성 사건의 해결을 위해 모든 요법을 따랐습니다. 나중에 공부할 자격이 있을 수도 있습니다.
• 임신 중이거나 수유 중이거나 호르몬 치료를 받고 있는 여성