Микробиота вокруг пародонтальных зубов и имплантатов, пораженных периимплантатным заболеванием.

Собранная через стерильные бумажные штифты для эндодонтического использования жидкость из борозды, присутствующая вокруг зубного элемента, пораженного пародонтитом, и, у того же пациента, жидкость, присутствующая внутри борозды вокруг имплантата, пораженного периимплантитом. Если считается, что больше имплантатов поражено периимплантитом, участник выберет худшее место в качестве образца. Тот же принцип будет применяться в случае зуба, пораженного пародонтитом. Образцы должны быть подвергнуты бактериальному геномному метаанализу для точной идентификации бактерий. Для лучшего сравнения флоры даже здоровый зуб одного и того же пациента будет выбран в качестве тестовой площадки и на нем будет произведен забор жидкости десневой борозды.

Исследователи считают, что идеальное знание видов патогенов является отправной точкой для правильной терапевтической стратегии. Но очень важно учитывать индивидуальные особенности микрофлоры полости рта.

Данные, которые следует отметить в самом начале, таковы:

Признаки и симптомы заболеваний пародонта с точным определением в соответствии с классификацией Armitage 1999 и периимплантатные заболевания. Для целей исследования определение периимплантита касается имплантата с минимальной глубиной зондирования 4 мм с кровотечением при зондировании и/или нагноением (BOP и Supp) и рентгенографической потерей костной ткани (BL).

Доказательства BL, записанные в порядке определения 8-й Европейской консенсусной конференции по пародонтологии. Рабочая группа 4: BL > 2 мм от ожидаемого уровня кости, если предварительная рентгенография отсутствовала; Rx в 2-3 раза превышает стандартное отклонение записи измерения (1-1,5 мм) в случае наличия предварительного Rx.

1. Обнаружения диагностические рентгенографические и предварительные вмешательства выполняются с параллельной техникой (КЛКТ опционально).
2. Фотографии до, во время и после операции (если есть)
3. Последующее наблюдение в течение 6 месяцев / 1 года (дополнительно) В исследовании представлены данные GCF, собранные вокруг периодонтальной и периимплантатной борозды у пациентов, набранных для микробиологического исследования. Анализы образцов выполняются «вслепую». Используемый зонд — UNC15, и только один квалифицированный врач выполняет зондирование. Микрофлору патогена сравнивают с микрофлорой здорового зуба, собранной вокруг здорового зуба у того же пациента.

Предварительная обработка мест взятия образцов во избежание загрязнения образцов наддесневым бактериальным налетом будет проходить следующим образом:

- за 2 дня до забора пациенту проводится профессиональная чистка чашечек и ершиков с единственной целью устранения поддесневого налета. также нам будут предоставлены соответствующие инструкции по гигиене полости рта с чисткой зубов два раза в день и использованием других инструментов, где это необходимо.

Процедура отбора проб: Отбор проб осуществляется через стерильную бумажную точку на кончике 30 и конусности ISO 4%. Техника отбора проб будет показана на рисунке и отмечена буквой с (интракревикулярный глубокий метод) до тех пор, пока не почувствуется минимальное сопротивление. Каждая бумажная точка будет оставаться на месте в течение 5 секунд, затем ее можно будет легко убрать в специальный стерильный контейнер, хранить в холодильнике и в течение 60 минут доставить в институт, где будет проводиться обследование. Любой собранный материал, показывающий загрязнение кровью, будет исключен из экзамена.

Микробиологический протокол

1. Сбор образцов и выделение ДНК. Для метагеномного анализа образцы полосок бумаги/бумажных точек пациентов, включенных в исследование, будут элюированы в течение ночи в PBS (фосфатно-солевом буфере) при 4 °C. Впоследствии образцы будут центрифугированы при 10 000 об/мин в течение 15 мин при 4°С. После удаления бумажной точки супернатант будет использоваться для выделения ДНК с помощью набора QIAamp DNA Mini. ДНК будет количественно определена с помощью флуорометра Qubit® 2.0 (Thermo Fisher) с использованием набора QUBIT Kit dsDNA HS ASSAY KIT (Life Technologies).
2. Анализ 16S рРНК – метагеномика Метагеномный анализ будет проводиться на платформе MiSeq Illumina. Библиотеки генов будут секвенированы с помощью наборов реагентов MiSeq v3. Гипервариабельные области 16S рРНК будут амплифицировать с использованием концентрации ДНК 5 нг/л с праймерами V5-V7.

Библиотеки очищают с помощью магнитных шариков (AgencourtAmpure XP, Beckman), а концентрацию и распределение фрагментов библиотек оценивают на ДНК-чипе 1000 в микроанализаторе 2100 (Agilent Technologies). Анализ последовательностей (наборы данных ампликонов) и определение OTU (OperationalTaxonomicUnits) будут выполняться с помощью конвейера QIIME с использованием в качестве базы данных генов 16S рРНК Green Genes.

Критерии включения:

• Активы, находящиеся в эксплуатации не менее одного года без каких-либо технических НОД (поэтому исключены из исследования, а также после добычи)
• поступил Работает на нативной кости
• Заполните форму истории болезни и пародонтальную доску, посвященную этому событию, а также карточку для клинициста, основанную на работе, опубликованной в J ClinPeriodontol 2012; 39 (Приложение 12): 224-244
• Отчетность по типу системной платы (дополнительная хирургическая техника)

Критерий исключения:

• Пациенты с субинтрантными системными заболеваниями, противопоказывающими установку имплантатов.
• Больные в течение последних трех месяцев после операции принимали антибиотики или соблюдали любую терапию для разрешения острых явлений. То же самое может претендовать на исследование позже.
• Женщины, которые беременны или кормят грудью или проходят гормональную терапию