Mikrobiota runt parodontala tänder och implantat som påverkas av peri-implantatsjukdom.

Skördad via sterila papperspunkter, för endodontisk användning, den sulkulära vätskan som finns runt ett tandelement angripet av parodontit, och, hos samma patient, vätskan som finns inuti en periimplantat sulcus av ett implantat angripen periimplantit. Om fler implantat anses påverkade av perimplantit kommer deltagaren att välja det värsta som provställe. Samma princip kommer att följas i fallet med tanden som drabbats av tandlossning. Proverna måste genomgå bakteriell genomisk metaanalys för exakt identifiering av bakteriell. För en bättre jämförelse av floran kommer även en frisk tand från samma patient att väljas som testställe och en tandköttssprickvätska kommer att skördas på den.

Utredarna tror att den perfekta kunskapen om patogenarterna är utgångspunkten från en korrekt terapeutisk strategi. Men det är verkligen viktigt att tänka på de individuella egenskaperna hos oral mikroflora.

De uppgifter som ska noteras i början är:

Tecken och symtom på periodontal sjukdom, med exakt inramning inom Armitage 1999-klassificeringen, och peri-implantatsjukdom. För studiens syfte gäller definitionen av perimplantit ett implantat med ett 4 mm minimalt sonderingsdjup med blödning vid sondering och/eller suppuration (BOP och Supp) och radiografisk benförlust (BL).

Bevis för BL registrerat i definitionsordning för åttonde europeiska konsensuskonferensen för parodontologi arbetsgrupp 4: BL > 2 mm från förväntad bennivå om en preliminär rx saknades; Rx 2-3 gånger SD av mätposten (1-1,5 mm) om en preliminär rx var närvarande.

1. Detektioner diagnostisk röntgen och förintervention utförd med parallell teknik (CBCT tillval).
2. Fotografier före, inom och efter operation (om sådana finns)
3. Uppföljning upp till 6 månader/1 år (valfritt) Studien ger en GCF skördad runt periodontal och peri-implantat sulcus hos patienter som rekryterats för mikrobiologisk undersökning. Analyserna av proverna utförs "blinda". Den använda sonden är en UNC15 och endast en kalibrerad läkare utför sonderingen. Patogenmikrofloran kommer att jämföras med en frisk tandmikroflora skördad runt en frisk tand hos samma patient.

Förbehandling av provställena för att undvika kontaminering av proverna med det supragingivala bakteriella placket kommer att gå till enligt följande:

- 2 dagar före provtagning genomgår patienten professionella rengöringskoppar och borstar med det enda syftet att eliminera subgingival plack. Vi kommer också att få lämplig munhygieninstruktion med borstning två gånger/dag och användning av andra instrument där så krävs.

Provtagningsprocedur: Den skördade kommer att utföras genom sterilt papper spets i utsträckningen till spets 30 och ISO avsmalnande 4%. Provtagningstekniken kommer att vara den som visas i figuren och markerad med bokstaven c (intrakrevikulär djup metod) tills minimalt motstånd känns. Varje papperspunkt kommer att förbli på plats i 5 sekunder, sedan förvaras den lätt i en speciell steril behållare, förvaras i kyl och levereras inom 60 minuter Institutionsmiljö som kommer att utföra undersökningen. Alla skördade som visar blodföroreningar kommer att uteslutas från undersökningen.

Mikrobiologiskt protokoll

1. Provtagning och DNA-isolering För den metagenomiska analysen, prover av pappersremsa/papper pekar av patienter som ingår i studien, de kommer att elueras över natten i PBS (fosfatbuffrad saltlösning) vid 4 ° C. Därefter kommer proverna att centrifugeras vid 10 000 rpm i 15 min vid 4°C. Efter borttagning av pappersspetsen kommer supernatanten att användas för extraktion av DNA med QIAamp DNA Mini-kit. DNA kommer att kvantifieras med Qubit® 2.0 Fluorometer (Thermo Fisher) med QUBIT Kit dsDNA HS ASSAY KIT (Life Technologies).
2. Analys av 16S rRNA - Metagenomics De metagenomiska analyserna kommer att utföras på MiSeq-plattformen Illumina. Genbiblioteken kommer att sekvenseras genom MiSeq v3-reagenskiten. De hypervariabla 16S rRNA-regionerna kommer att amplifieras med en DNA-koncentration på 5 ng/l med primrarna V5-V7.

Biblioteken kommer att renas med magnetiska pärlor (AgencourtAmpure XP, Beckman), och koncentrationen och distributionen av fragmenten från biblioteken kommer att utvärderas på DNA Chip 1000 i mikroanalysatorn 2100 (Agilent Technologies). Analysen av sekvenserna (amplikondatauppsättningar) och bestämningen av OTU (OperationalTaxonomicUnits) kommer att utföras av QIIME-pipeline som använder som 16S rRNA-gendatabas Gröna gener.

Inklusionskriterier:

• Tillgångar i bruk i minst ett år utan någon teknisk GBR (därför utesluten från studien även efter extraktion)
• inträdde Verk om inhemskt ben
• Fyll i ett formulär för sjukdomshistoria och en tandlossningstavla tillägnad händelsen, samt ett kort för läkaren som bygger på arbetet som publicerades i J ClinPeriodontol 2012; 39 (bilaga 12): 224-244
• Rapportering i typen av systemkort (valfri kirurgisk teknik)

Exklusions kriterier:

• Patienter i subintranta systemiska tillstånd som kontraindikerar införande av implantat
• Patienter under de senaste tre månaderna efter operationen har tagit antibiotika eller följer någon terapi för att lösa akuta händelser. Detsamma kan kvalificera för studien senare.
• Kvinnor som är gravida eller ammar eller genomgår hormonbehandlingar