Mikrobiota rundt periodontale tenner og implantater påvirket av peri-implantat sykdom.

Innhøstet via sterile papirpunkter, for endodontisk bruk, sulkulærvæsken tilstede rundt et tannelement påvirket av periodontitt, og, hos samme pasient, væsken som er tilstede inne i en periimplantat-sulcus av en implantatpåvirket periimplantitt. Hvis flere implantater anses som påvirket av perimplantitt, vil deltakeren velge det verste som prøvested. Det samme prinsippet vil bli fulgt når det gjelder tannen som er rammet av periodontal sykdom. Prøvene må gjennomgås til bakteriell genomisk meta-analyse for nøyaktig identifikasjon av bakteriell. For en bedre sammenligning av floraen, vil selv en sunn tann fra samme pasient bli valgt som teststed og en tannkjøttspaltevæske vil bli høstet på den.

Etterforskerne mener at den perfekte kunnskapen om patogenarten er utgangspunktet fra en riktig terapeutisk strategi. Men det er veldig viktig å ta i tankene de individuelle egenskapene til oral mikroflora.

Dataene som skal noteres innledningsvis er:

Tegn og symptomer på periodontal sykdom, med presis innramming innenfor Armitage 1999-klassifiseringen, og peri-implantat sykdom. For formålet med studien gjelder definisjon av perimplantitt et implantat med en minimal sonderingsdybde på 4 mm med blødning ved sondering og/eller suppurasjon (BOP og Supp) og radiografisk bentap (BL).

Bevis for BL registrert i definisjonsrekkefølge for 8. European Consensus Conference of Periodontology Arbeidsgruppe 4: BL > 2 mm fra forventet bennivå hvis en foreløpig rx var fraværende; Rx 2-3 ganger SD av måleposten (1-1,5 mm) i tilfelle en foreløpig rx var tilstede.

1. Deteksjoner diagnostisk radiografisk og pre-intervensjon utført med parallell teknikk (CBCT valgfritt).
2. Fotografier før, intra og etter operasjon (hvis tilgjengelig)
3. Følg opp til 6 måneder / 1 år (valgfritt) Studien gir en GCF høstet rundt periodontal og peri-implantat sulcus hos pasienter rekruttert for mikrobiologisk undersøkelse. Analysene av prøvene utføres «blindt». Proben som brukes er en UNC15 og bare én kalibrert kliniker utfører sonderingen. Patogenmikrofloraen vil bli sammenlignet med en frisk tannmikroflora høstet rundt en sunn tann hos samme pasient.

Forbehandling av prøvestedene for å unngå kontaminering av prøvene med den supragingivale bakterieplakken vil foregå som følger:

- 2 dager før prøvetaking gjennomgår pasienten profesjonelle rensekopper og børster med det eneste formålet å eliminere subgingival plakk. Vi vil også få passende munnhygieneinstruksjoner med børsting to ganger om dagen og bruk av de andre instrumentene der det er nødvendig.

Prøvetakingsprosedyre: Det høstede vil bli utført gjennom sterilt papirspiss i utstrekning til spiss 30 og ISO konisk 4%. Prøvetakingsteknikken vil være den som er vist på figuren og merket med bokstaven c (intrakrevikulær dyp metode) inntil minimum motstand merkes. Hvert papirpunkt vil forbli på plass i 5 sekunder, deretter vil det enkelt lagres i en spesiell steril beholder, oppbevares i kjøleskap og leveres innen 60 minutter Instituttmiljø som vil utføre undersøkelsen. Enhver høstet som viser blodforurensning vil bli ekskludert fra eksamen.

Mikrobiologisk protokoll

1. Prøveinnsamling og DNA-isolering For den metagenomiske analysen, prøver av papirstrimmel / papir peker av pasienter inkludert i studien, vil de bli eluert over natten i PBS (fosfatbufret saltvann) ved 4 ° C. Deretter vil prøvene sentrifugeres ved 10.000 rpm i 15 minutter ved 4 °C. Etter fjerning av papirpunktet, vil supernatanten brukes til ekstraksjon av DNA ved hjelp av QIAamp DNA Mini-settet. DNAet vil bli kvantifisert med Qubit® 2.0 Fluorometer (Thermo Fisher) ved bruk av QUBIT Kit dsDNA HS ASSAY KIT (Life Technologies).
2. Analyse av 16S rRNA - Metagenomics De metagenomiske analysene vil bli utført på MiSeq-plattformen Illumina. Genbibliotekene vil bli sekvensert gjennom MiSeq v3-reagenssettene. De hypervariable 16S rRNA-regionene vil bli amplifisert ved å bruke en DNA-konsentrasjon på 5 ng/l med primerne V5-V7.

Bibliotekene vil bli renset med magnetiske kuler (AgencourtAmpure XP, Beckman), og konsentrasjonen og distribusjonen av fragmentene til bibliotekene vil bli evaluert på DNA Chip 1000 i mikroanalyzeren 2100 (Agilent Technologies). Analysen av sekvensene (amplikondatasett) og bestemmelsen av OTU (OperationalTaxonomicUnits) vil bli utført av QIIME pipeline som bruker som 16S rRNA gendatabase Green gener .

Inklusjonskriterier:

• Eiendeler i bruk i minst ett år uten teknisk GBR (derfor ekskludert fra studien også etter ekstraksjon)
• angitt Works on native bein
• Fyll ut et sykehistorieskjema og en periodontaltavle dedikert til arrangementet, samt et kort til klinikeren som bygger på arbeidet publisert i J ClinPeriodontol 2012; 39 (Suppl 12): 224-244
• Rapportering i type systemkort (valgfri kirurgisk teknikk)

Ekskluderingskriterier:

• Pasienter i subintrant systemiske tilstander som kontraindiserer innsetting av implantater
• Pasienter i løpet av de siste tre månedene etter operasjonen har tatt antibiotika eller følger en hvilken som helst terapi for å løse akutte hendelser. Det samme kan kvalifisere for studiet senere.
• Kvinner som er gravide eller ammer eller gjennomgår hormonbehandlinger