Mikrobioota periodontaalisten hampaiden ja implanttien ympärillä, joihin peri-implanttitauti vaikuttaa.

Kerätty steriilien paperipisteiden kautta endodontiaa varten, parodontiittiin sairastuneen hammaselementin ympärillä oleva sulkulaarineste ja samalla potilaalla implantin periimplantitissa oleva neste, joka vaikutti periimplantitiin. Jos periimplantiitin katsotaan kärsivän useammasta implantista, osallistuja valitsee näytepaikaksi pahimman. Samaa periaatetta noudatetaan parodontaalisairaaman hampaan kohdalla. Näytteille on suoritettava bakteerien genominen meta-analyysi bakteerin tarkkaa tunnistamista varten. Flooran paremman vertailun vuoksi jopa saman potilaan terve hammas valitaan samankaltaiseksi testipaikaksi ja sille kerätään ikenen rakoneste.

Tutkijat uskovat, että täydellinen tuntemus taudinaiheuttajalajeista on lähtökohta oikealle hoitostrategialle. Mutta on todella tärkeää ottaa huomioon suun mikroflooran yksilölliset ominaisuudet.

Aluksi huomioitavat tiedot ovat:

Parodontiittisairauden merkit ja oireet, joissa on tarkka kehystys Armitage 1999 -luokituksen mukaisesti, ja implanttia ympäröivä sairaus. Tutkimuksen tavoitteessa periimplantiitin määritelmä koskee implanttia, jonka koetussyvyys on vähintään 4 mm ja verenvuotoa koetuksesta ja/tai märkimisestä (BOP ja Supp) sekä radiografista luukatoa (BL).

Todisteet BL:stä kirjattiin 8. European Consensus Conference of Periodontology -työryhmä 4:n määritelmän mukaisessa järjestyksessä: BL > 2 mm odotetusta luutasosta, jos alustava rx puuttui; Rx 2-3 kertaa mittaustietueen SD (1-1,5 mm), jos alustava rx oli olemassa.

1. Havainnot diagnostiset radiografiset ja esiinterventiot suoritetaan rinnakkaistekniikalla (CBCT valinnainen).
2. Valokuvat ennen, intra ja post op (jos olemassa)
3. Seuranta enintään 6 kuukautta / 1 vuosi (valinnainen) Tutkimus tarjoaa GCF:n, joka on kerätty parodontaalisen ja implanttisuluksen ympäriltä potilailla, jotka on värvätty mikrobiologiseen tutkimukseen. Näytteiden analyysit suoritetaan "sokeat". Käytetty anturi on UNC15, ja vain yksi kalibroitu kliinikko suorittaa mittauksen. Patogeenin mikroflooraa verrataan terveen hampaan mikroflooraan, joka on kerätty saman potilaan terveen hampaan ympäriltä.

Näytekohtien esikäsittely, jotta vältetään näytteiden kontaminaatio supragingivaalisen bakteeriplakin vaikutuksesta, suoritetaan seuraavasti:

- 2 päivää ennen näytteenottoa potilaalle suoritetaan ammattimaiset puhdistuskupit ja harjat, joiden ainoana tarkoituksena on poistaa subgingivaalinen plakki. Lisäksi meille annetaan asianmukaiset suuhygieniaohjeet harjauksella kahdesti/vrk ja tarvittaessa muiden instrumenttien käyttöön.

Näytteenottomenettely: Keräys tehdään steriilin paperikärjen läpi kärkeen 30 asti ja ISO kartio 4 %. Näytteenottotekniikka on sama kuin kuvassa ja merkitty kirjaimella c (intrarevicular deep method), kunnes tunnet minimivastuksen. Jokainen paperipiste pysyy paikoillaan 5 sekuntia, minkä jälkeen se varastoidaan helposti erityiseen steriiliin astiaan, säilytetään jääkaapissa ja toimitetaan 60 minuutin kuluessa tutkimuksen suorittavaan instituuttiin. Kaikki korjatut tuotteet, joissa näkyy veren saastumista, suljetaan pois kokeesta.

Mikrobiologinen pöytäkirja

1. Näytteenotto ja DNA:n eristäminen Metagenomista analyysiä varten tutkimukseen osallistuneiden potilaiden paperiliuska-/paperipistenäytteet eluoidaan yön yli PBS:ssä (fosfaattipuskuroitu suolaliuos) 4 °C:ssa. Sen jälkeen näytteet sentrifugoidaan 10 000 asteessa. rpm 15 minuuttia 4 °C:ssa. Paperipisteen poistamisen jälkeen supernatanttia käytetään DNA:n uuttamiseen käyttämällä QIAamp DNA Mini -pakkausta. DNA kvantifioidaan Qubit® 2.0 Fluorometerilla (Thermo Fisher) käyttämällä QUBIT Kit dsDNA HS ASSAY KIT (Life Technologies) -sarjaa.
2. 16S rRNA:n analyysi - Metagenomiikka Metagenomiset analyysit suoritetaan MiSeq-alustalla Illumina. Geenikirjastot sekvensoidaan MiSeq v3 -reagenssipakkausten kautta. 16S rRNA:n hypervariaabelit alueet monistetaan käyttämällä DNA-pitoisuutta 5 ng/l alukkeiden V5-V7 kanssa.

Kirjastot puhdistetaan magneettihelmillä (AgencourtAmpure XP, Beckman), ja kirjastojen fragmenttien konsentraatio ja jakautuminen arvioidaan DNA Chip 1000:lla mikroanalysaattorissa 2100 (Agilent Technologies). Sekvenssien (amplikonitietojoukot) analyysi ja OTU:n (OperationalTaxonomicUnits) määritys suoritetaan QIIME-putkilinjalla käyttäen 16S rRNA-geenitietokantana Green genes .

Sisällyttämiskriteerit:

• Vähintään vuoden käytössä olleet omaisuuserät ilman teknistä GBR:tä (siis poissuljettu tutkimuksesta myös louhinnan jälkeen)
• tuli Teoksia alkuperäiseen luuhun
• Täytä sairaushistorialomake ja tapahtumalle omistettu parodontaalitaulu sekä kliinikolle tarkoitettu kortti, joka perustuu J ClinPeriodontol 2012:ssa julkaistuun työhön; 39 (Suppl 12): 224-244
• Emolevyn tyypin raportointi (valinnainen kirurginen tekniikka)

Poissulkemiskriteerit:

• Potilaat, joilla on subintrant-systeemisiä sairauksia, jotka ovat vasta-aiheisia implanttien asettamiseen
• Potilaat ovat viimeisen kolmen kuukauden aikana ottaneet leikkauksen jälkeen antibiootteja tai noudattaneet mitä tahansa hoitoa akuuttien tapahtumien ratkaisemiseksi. Sama voi päteä tutkimukseen myöhemmin.
• Naiset, jotka ovat raskaana tai imettävät tai saavat hormonihoitoa