Microbiote autour des dents parodontales et des implants touchés par la maladie péri-implantaire.

Récolter via des pointes de papier stériles, à usage endodontique, le fluide sulculaire présent autour d'un élément dentaire atteint de parodontite, et, chez le même patient, le fluide présent à l'intérieur d'un sillon péri-implantaire d'un implant atteint de péri-implantite. Si plusieurs implants sont considérés comme affectés par la péri-implantite, le participant choisira le pire comme site d'échantillonnage. Le même principe sera suivi dans le cas de la dent atteinte d'une maladie parodontale. Les échantillons doivent être soumis à une méta-analyse génomique bactérienne pour l'identification précise des bactéries. Pour une meilleure comparaison de la flore, même une dent saine du même patient sera choisie comme site de test et un liquide gingival créviculaire sera prélevé dessus.

Les chercheurs pensent que la parfaite connaissance de l'espèce pathogène est le point de départ d'une stratégie thérapeutique correcte. Mais il est vraiment important de garder à l'esprit les caractéristiques individuelles de la microflore buccale.

Les données à noter au départ sont :

Signes et symptômes de la maladie parodontale, avec un cadrage précis dans la classification Armitage 1999, et de la maladie péri-implantaire. Dans le cadre de l'étude, la définition de la périimplantite concerne un implant avec une profondeur de sondage minimale de 4 mm avec saignement au sondage et ou suppuration (BOP et Supp) et perte osseuse radiographique (BL).

Preuve de BL enregistrée dans l'ordre de définition du groupe de travail 4 de la 8e Conférence européenne de consensus sur la parodontologie : BL > 2 mm du niveau osseux attendu en l'absence d'un rx préliminaire ; Rx 2-3 fois l'écart-type de l'enregistrement de mesure (1-1,5 mm) dans le cas où un rx préliminaire était présent.

1. Détections radiographiques diagnostiques et pré-intervention réalisées avec technique parallèle (CBCT en option).
2. Photographies pré, intra et post op (si présentes)
3. Suivi jusqu'à 6 mois / 1 an (facultatif) L'étude fournit un GCF récolté autour du sulcus parodontal et péri-implantaire chez les patients recrutés pour l'investigation microbiologique. Les analyses des échantillons sont réalisées "en aveugle". La sonde utilisée est une UNC15 et un seul clinicien étalonné effectue le sondage. La microflore pathogène sera comparée à une microflore dentaire saine prélevée autour d'une dent saine chez le même patient.

Le prétraitement des sites de prélèvement afin d'éviter la contamination des échantillons par la plaque bactérienne supragingivale se déroulera comme suit :

- 2 jours avant le prélèvement, le patient subit un nettoyage professionnel des ventouses et des brosses dans le seul but d'éliminer la plaque sous-gingivale. nous recevrons également des instructions d'hygiène bucco-dentaire appropriées avec un brossage deux fois par jour et l'utilisation des autres instruments si nécessaire.

Mode opératoire de prélèvement : La récolte sera réalisée au travers de papier stérile point l'étendue à pointe 30 et cône ISO 4 %. La technique d'échantillonnage sera celle indiquée sur la figure et marquée de la lettre c (méthode profonde intra-creviculaire) jusqu'à ce qu'une résistance minimale soit ressentie. Chaque point de papier restera en place pendant 5 secondes, puis il sera facilement stocké dans un récipient stérile spécial, stocké dans un environnement réfrigéré et livré dans les 60 minutes de l'Institut qui procédera à l'examen. Toute récolte présentant une contamination sanguine sera exclue de l'examen.

Protocole microbiologique

1. Prélèvement d'échantillons et isolement d'ADN Pour l'analyse métagénomique, des échantillons de papier bandelette/pointe papier par les patients inclus dans l'étude, ils seront élués une nuit dans du PBS (phosphate buffered saline) à 4°C. Par la suite, les échantillons seront centrifugés à 10 000 rpm pendant 15 min à 4°C. Après retrait de la pointe papier, le surnageant sera utilisé pour l'extraction de l'ADN à l'aide du kit QIAamp DNA Mini. L'ADN sera quantifié avec le fluorimètre Qubit® 2.0 (Thermo Fisher) en utilisant le kit QUBIT dsDNA HS ASSAY KIT (Life Technologies).
2. Analyse d'ARNr 16S - Métagénomique Les analyses métagénomiques seront réalisées sur la plateforme MiSeq Illumina. Les bibliothèques de gènes seront séquencées via les kits de réactifs MiSeq v3. Les régions hypervariables de l'ARNr 16S seront amplifiées à l'aide d'une concentration d'ADN de 5 ng/l avec les amorces V5-V7.

Les librairies seront purifiées par billes magnétiques (Agencourt Ampure XP, Beckman), et la concentration et la distribution des fragments des librairies seront évaluées sur puce à ADN 1000 dans le microanalyseur 2100 (Agilent Technologies). L'analyse des séquences (ensembles de données d'amplicons) et la détermination des OTU (OperationalTaxonomicUnits) seront effectuées par pipeline QIIME en utilisant comme base de données de gènes ARNr 16S Green genes.

Critère d'intégration:

• Actifs en service depuis au moins un an sans aucun GBR technique (donc exclus de l'étude également post-extraction)
• entré Travaille sur l'os natif
• Remplir un formulaire d'antécédents médicaux et une planche parodontale dédiés à l'événement, ainsi qu'une fiche pour le clinicien qui s'appuie sur les travaux publiés dans J ClinPeriodontol 2012 ; 39 (Suppl 12): 224-244
• Rapport dans le type de carte système (technique chirurgicale facultative)

Critère d'exclusion:

• Patients dans des conditions systémiques subintrantes qui contre-indiquent l'insertion d'implants
• Les patients au cours des trois derniers mois, après la chirurgie, ont pris des antibiotiques ou suivent un traitement pour la résolution des événements aigus. La même chose peut se qualifier pour l'étude plus tard.
• Femmes enceintes, qui allaitent ou qui suivent des traitements hormonaux