Mikrobiota omkring parodontale tænder og implantater påvirket af peri-implantat sygdom.

Høstet via sterile papirpunkter til endodontisk brug, den sulkulære væske, der er til stede omkring et tandelement, der er ramt af parodontitis, og, hos den samme patient, væsken, der findes inde i en periimplantat-sulcus af et implantat, der er påvirket af periimplantitis. Hvis flere implantater anses for at være påvirket af perimplantitis, vil deltageren vælge det værste som prøvested. Det samme princip vil blive fulgt i tilfælde af tanden, der er ramt af paradentose. Prøverne skal gennemgås bakteriel genomisk meta-analyse for præcis identifikation af bakteriel. For en bedre sammenligning af floraen vil selv en sund tand fra den samme patient blive valgt som teststed, og en tandkødsspaltevæske vil blive høstet på den.

Efterforskerne mener, at den perfekte viden om patogenarterne er udgangspunktet for en korrekt terapeutisk strategi. Men det er virkelig vigtigt at tage de individuelle karakteristika af oral mikroflora i tankerne.

De data, der skal bemærkes i starten er:

Tegn og symptomer på periodontal sygdom, med præcis indramning inden for Armitage 1999-klassifikationen, og peri-implantat sygdom. Til formålet med undersøgelsen vedrører definitionen af ​​perimplantitis et implantat med en minimal sonderingsdybde på 4 mm med blødning ved sondering og/eller suppuration (BOP og Supp) og radiografisk knogletab (BL).

Bevis for BL registreret i rækkefølge efter definition af 8. europæiske konsensuskonference for parodontologi arbejdsgruppe 4: BL > 2 mm fra det forventede knogleniveau, hvis en foreløbig rx var fraværende; Rx 2-3 gange SD af måleposten (1-1,5 mm) i tilfælde af en foreløbig rx var til stede.

1. Detektioner diagnostisk radiografisk og præ-intervention udført med parallel teknik (CBCT valgfri).
2. Fotografier før, intra og post op (hvis til stede)
3. Opfølgning i op til 6 måneder / 1 år (valgfrit) Undersøgelsen giver en GCF høstet omkring periodontal og peri-implantat sulcus hos patienter rekrutteret til mikrobiologisk undersøgelse. Analyserne af prøverne udføres "blindt". Den anvendte sonde er en UNC15, og kun én kalibreret kliniker udfører sonderingen. Patogenmikrofloraen vil blive sammenlignet med en sund tandmikroflora høstet omkring en sund tand hos samme patient.

Forbehandling af prøvestederne for at undgå kontaminering af prøverne med den supragingival bakterielle plak vil forløbe som følger:

- 2 dage før prøveudtagning gennemgår patienten professionelle rensekopper og børster med det ene formål at fjerne subgingival plak. Vi vil også få passende mundhygiejneinstruktioner med børstning to gange om dagen og brug af de andre instrumenter, hvor det er nødvendigt.

Prøveudtagningsprocedure: Det høstede vil blive udført gennem sterilt papirspids i udstrækningen til spids 30 og ISO tilspidsning 4%. Prøvetagningsteknikken vil være den, der er vist på figuren og markeret med bogstavet c (intrakrevikulær dyb metode), indtil der mærkes minimal modstand. Hvert papirpunkt forbliver på plads i 5 sek., derefter vil det nemt blive opbevaret i en speciel steril beholder, opbevaret på køl og leveret inden for 60 minutter Institutmiljø, der vil udføre undersøgelsen. Enhver høst, der viser blodforurening, vil blive udelukket fra eksamen.

Mikrobiologisk protokol

1. Prøveindsamling og DNA-isolering Til den metagenomiske analyse, prøver af papirstrimmel / papir spids af patienter inkluderet i undersøgelsen, vil de blive elueret natten over i PBS (phosphatbufret saltvand) ved 4 ° C. Efterfølgende vil prøverne blive centrifugeret ved 10.000 rpm i 15 minutter ved 4°C. Efter fjernelse af papirspidsen vil supernatanten blive brugt til ekstraktion af DNA ved hjælp af QIAamp DNA Mini kit. DNA'et vil blive kvantificeret med Qubit® 2.0 Fluorometer (Thermo Fisher) ved hjælp af QUBIT Kit dsDNA HS ASSAY KIT (Life Technologies).
2. Analyse af 16S rRNA - Metagenomics De metagenomiske analyser vil blive udført på MiSeq platformen Illumina. Genbibliotekerne vil blive sekventeret gennem MiSeq v3-reagenssættene. De 16S rRNA hypervariable regioner vil blive amplificeret ved hjælp af en DNA-koncentration på 5 ng/l med primerne V5-V7.

Bibliotekerne vil blive oprenset med magnetiske perler (AgencourtAmpure XP, Beckman), og koncentrationen og fordelingen af ​​fragmenterne af bibliotekerne vil blive evalueret på DNA Chip 1000 i mikroanalyzeren 2100 (Agilent Technologies). Analysen af ​​sekvenserne (amplicon-datasæt) og bestemmelsen af ​​OTU (OperationalTaxonomicUnits) vil blive udført af QIIME-pipeline ved at bruge som 16S rRNA-gendatabase grønne gener.

Inklusionskriterier:

• Aktiver i brug i mindst et år uden nogen teknisk GBR (derfor udelukket fra undersøgelsen også efter ekstraktion)
• indgik Værker om indfødt knogle
• Udfyld en sygehistorieformular og et parodontaltavle dedikeret til begivenheden, samt et kort til klinikeren, som bygger på arbejdet offentliggjort i J ClinPeriodontol 2012; 39 (Suppl 12): 224-244
• Rapportering i typen af ​​systemkort (valgfri kirurgisk teknik)

Ekskluderingskriterier:

• Patienter i subintrant systemiske tilstande, der kontraindicerer indsættelse af implantater
• Patienter i de sidste tre måneder efter operationen har taget antibiotika eller følger enhver behandling for at løse akutte hændelser. Det samme kan kvalificere sig til studiet senere.
• Kvinder, der er gravide eller ammer eller er i hormonbehandling