食品サプリメント摂取後の結石症患者群における尿中の尿酸の結晶化抑制能力に関する研究

背景 尿路結石は古代から知られている病態ですが、存在するさまざまな種類の結石の形成の原因は完全にはわかっていません。この結果、有効な治療法の開発が可能になったのは一部のケースのみです。 腎結石症は、調査対象の集団サンプルに応じて 4 ～ 15% の範囲で、広範囲の集団に影響を及ぼします。 症例の 10 ～ 15% が外科的治療を必要とし、20 ～ 30% が入院を必要とするため、この病状に関連する高い罹患率を強調することが重要です。 すべての結石の中で、尿路結石は全症例の 10 ～ 15% を占め、特に 50 歳以上の男性に影響を与えると推定されていますが、シュウ酸カルシウム一水和物と尿酸の混合結石は全症例の 2.5% に影響を与えます。 尿酸によって生成される結石症は、年に数回繰り返される非常に再発性の病状であり、糖尿病や肥満などの他の病状と関連しています。 これは、特に医療上の緊急事態で発生するため、年間数十億ユーロと見積もられる高いコストを意味します。 治療を受けていないか、栄養習慣を変えていない人々の 50 ～ 70% が、5 年未満の期間で新しい結石を発症することに注意する必要があります。 飼料の種類と特性が酸塩基代謝の機能と尿の特性を決定するという契約上の事実です。尿のpH、物質の濃度の高低、および一連の特性などです。尿酸など、それに含まれるさまざまな物質の結晶化能力を決定できます。 結石症の原因となる医学的問題は治療されるべきではないことは明らかであり、利用可能なさまざまな外科的技術によって同じものを取り除くだけでなく、その使用の原因となる変化を修正し、トレーニングを修正する必要があります. これらの変化が修正されない場合、新しい微積分の発生のリスクが持続します。 尿石症を治療するためにこれまでに使用されている薬理学的治療は、尿酸の結晶化と新しい腎臓結石の形成を避けるために、尿のpHを増加させる（クエン酸塩または重炭酸塩の使用による）尿の強力なアルカリ化に基づいています. これらの治療は長期的な問題を引き起こす可能性があり、その結果、尿酸結石の治療を順守する割合は低くなります。 これらの長期的な治療は、尿中のpHを6単位以上に上昇させ、腎臓の完全な石灰化の可能性を高めることにより、治療がはるかに困難な別のタイプの腎結石症を引き起こす可能性があります. したがって、この病状の食事療法を容易にする可能性のある食物源の物質において、新しい代替物を探さなければならないことは明らかです。

現在、尿をアルカリ化する有機体の代謝酸塩基の正常な機能に寄与する植物抽出物が市場に出回っているクエン酸ベースの栄養補助食品があります（たとえば、LitはpHアップを制御します）. しかし、Illes Balears 大学の腎結石研究所によって開発された、尿の結晶化能力を回避または減少させることに基づいた、結石の問題に対する他のアプローチもあります。 これらのアプローチは、天然起源の結晶化の阻害剤を探すことにある。結晶化阻害剤は、不溶性化合物の結晶化を防止、遅延、または妨げることができる物質に相当する。 このアプローチは、1965 年の Bliznakov の研究ですでに開始されており、特定の分子が、成長表面への吸着 (結合) の結果として、特定の物質の結晶性性質の成長速度を遅くすることができたこと、およびこれが引き起こした対応する変化が示されました。 この間、Vermeulen ら、Fleisch ら。 Howard と cols は、ピロリン酸を含む尿中に存在する一連の物質が、カルシウム塩の結晶化を防ぐことができることを示しました。 これらのアイデアも、後に結石症研究所腎によって開発され、カルシウム塩の結晶化の阻害能力は、すべての未精製種子（マメ科植物、穀物、ナッツなど）に存在する物質であるフィチン酸によっても作られました. . このプロセスは、カルシウム塩の結晶化ではなく、尿酸の結晶化を阻害する能力を示す天然物質の探索につながりました. テストで使用された多数の物質の中で、カカオの天然成分であるテオブロミンは、通常のチョコレート摂取後に生成されるものと同様の効果濃度を生成することが観察されました. ヨーロッパでは、チョコレートの摂取量は、1 人あたり年間約 6 ～ 12 kg です。 このため、サプリメントで定められた食品を摂取した後、体外試験によって尿中の尿酸の抑制能力を低下させることを目的としています。 IUNICS (バレアレス諸島大学) に割り当てられた結石症研究所は、特定の栄養補助食品の摂取前と摂取後、一時的に落ち着きました。

正当化 1998 年以来、腎結石研究所はその目的の 1 つとして、尿の特徴と既存のさまざまなタイプの結石との関係を研究することを行ってきました。 我々が示したように、発生率の高い結石症の1つは、尿酸またはシュウ酸カルシウム一水和物/尿酸の結石症です. 現在、特定の食物補体の摂取後に尿からの尿酸の結晶化を阻害する能力との関係.

尿は血液ろ過の産物であり、水と塩、ビタミン、ミネラルなどの低分子量分子を含むその組成を反映しています。したがって、チョコレート、ココア、またはその抽出物などの特定の食品の摂取が反映されます。尿酸の結晶化の阻害剤であるテオブロミンの尿中排泄の増加。

これにより、尿中の尿酸の結晶化能力の変化が明確に反映されるはずです。 当然のことながら、この主要な変数とは別に、尿は、尿の pH、テオブロミンの濃度、および結石の病理学における他のすべての重要な尿パラメータなどの一連の二次変数で決定する必要があります。

主な目的と副次的な目的 現在、特定の食品または栄養補助食品の摂取による尿による尿酸の結晶化を阻害する能力と、尿中のテオブロミン濃度および pH との関係。 したがって、主な目的は、尿石症またはシュウ酸カルシウム一水和物/尿酸と診断された患者の、カカオ抽出物を含む栄養補助食品の摂取後の尿による尿酸の結晶化の阻害能力を評価することです。 これは、尿による尿酸の結晶化の阻害能力を、食物の影響による尿石症またはシュウ酸カルシウム一水和物/酸性尿の予防の可能な指標として使用することを可能にする.

仮説 この研究の最初の仮説は、カカオまたはカカオ抽出物を含む食品を食べた被験者の尿による尿酸の結晶化を阻害する能力が増加する可能性に対応しています。 したがって、特定の補体の摂取と、栄養状態と尿による尿酸の結晶化を阻害する能力との関係が研究されます。 尿中の尿酸結晶化抑制能の増大は、尿酸結石や混合シュウ酸カルシウム一水和物・酸性尿結石の元となる尿酸の結晶化を防ぐのに役立つと考えられます。

作業設計と方法論 研究グループ 尿の尿酸結晶化の抑制能力は、クエン酸塩と植物抽出物に基づく栄養補助食品と、クエン酸ベースの栄養補助食品と植物抽出物を摂取するように提案される患者の 2 つのグループで研究されます。 14日間カカオエキスを配合。 これらのグループには、通常の食事と一緒に 14 日間摂取する必要がある栄養補助食品が提供されます。

食事介入 摂取する栄養補助食品は、カカオ抽出物を含むカプセルに対応する高麗人参乾燥抽出物なしのリット コントロール pH アップ (オタネニンジン、根) と、カカオ抽出物を含むカプセルに対応する乾燥カカオ抽出物 (テオブロマカカオ、果実) を含む同じリット コントロール pH アップです。 . 用量は、1 人あたり 750 mg のカプセル 2 錠で、朝食時に 1 錠、夕食時に 1 錠の割合で服用します。 各参加者には、栄養介入に必要な数の栄養カプセルが無料で提供されます。

栄養介入の栄養補助食品の組成（重量750mgのカプセル）

• リット コントロール pH アップ (乾燥ココア抽出物による): クエン酸カリウム、クエン酸マグネシウム、カカオの乾燥抽出物 (テオブロマカカオ、テオブロミン 60 mg)、マルトデキストリン (増量剤)、二酸化ケイ素 (固結防止)、ステアリン酸マグネシウム (流動化)、亜鉛グルコン酸、ビタミンA カバー範囲：ゼラチン、二酸化チタン（乳白剤）、さび黄鉄（染料）、インジゴチン-FD＆C Blue2（染料）。 CN: 172249.2. 重量カプセル 750 mg
• Lit コントロール pH アップ (乾燥ココア抽出物なし): クエン酸カリウム、クエン酸マグネシウム、マルトデキストリン (増量剤)、二酸化ケイ素 (固化防止)、ステアリン酸マグネシウム (流動化)、グルコン酸亜鉛、ビタミン A. 適用範囲: ゼラチン、二酸化チタン (乳白剤) 、さび黄鉄（染料）、インジゴチン-FD＆C Blue2（染料）。 重量 750 mg カプセル 栄養補助食品の副作用/二次的影響がない テオブロミンは、チョコレートに高濃度で含まれる植物成分アルカロイドに相当します。実際、50 g のチョコレート ブラックには 237 ～ 519 mg のテオブロミンが含まれており、多くの人が毎日消費しています食品ですので副作用はありません。 カカオの抽出物として摂取されるテオブロミンの 1 日量は、約 11 ～ 25 g のチョコレートの量にほぼ相当することが明らかであり、これはダイエット中の通常の消費量と見なすことができます. 200 mg のテオブロミンを 1 日 3 回経口摂取した Birkett ら (1985) の論文では、臨床症状や薬理学的活性は観察されませんでした。 また、スイート チョコレートとしてテオブロミンを 6 mg/kg · 日 (70 kg の人の場合、テオブロミンの 420 mg/日に相当) の用量で摂取しても、ヒト被験者での臨床試験で効果が生じます (Shively et al., 1985)。 テオブロミンの気分への影響を決定するさまざまな研究があり、Mitchell et al. で説明されているように、1 日あたり約 700 mg のテオブロミンを使用します。 （2011）。 最後に、用量 250 mg のテオブロミンの摂取をプラセボと比較した研究では、心拍数の増加に収縮期血圧と拡張期血圧のどちらにも有意差はありませんでした (Baggott et al., 2013)。WHO の報告 (1991 年) ) 50-100 g のカカオ (0.8-1.5 g のテオブロミン) からのチョコレートの人間の毎日の摂取量における高用量のテオブロミンの摂取は、場合によっては発汗、震え、および頭の痛みに関連している可能性があると説明しています.介入栄養学で使用される量の 8 倍です。

公開されたすべてのデータについて、食事介入で摂取するカカオ抽出物に存在するテオブロミンは、毒性の影響からほど遠いことは明らかです. この栄養投与量は、チョコレートの形でのテオブロミンの通常の摂取量に相当します。

主な目的 現在の観察研究プロジェクトは、尿酸結石症および/またはCOM / Acを伴う正常尿酸血症の結石患者における、乾燥ココア抽出物を含む別のLit Control pH Upと比較して、乾燥高麗人参抽出物を含まない栄養補助食品Lit Control pH Upの活性を評価することを目的としています。 14日間の介入期間中に尿酸を示しました。 研究の主な変数は、2時間の最初の朝の尿中の尿酸の結晶化の抑制能力です.

副次的な目的 栄養介入で募集された患者の血液および尿の生化学的パラメーターのプロファイルを知る。

研究デザイン 非無作為化観察試験を交差させ、シングルブラインドに開放。 研究集団の定義：選択基準

尿結石症または尿COM / Acと診断された被験者は、研究に含まれます。 高尿酸血症ではなく、自然排出、体外砕石術またはその他の外科的技術による計算の外部排除を伴う少なくとも 1 つのエピソードの前の存在、およびその後の分析と同一の同定、および次のデータ:

• 病歴、TAコントロールによる身体検査、および補完的な探索
• 単純腹部レントゲン（泌尿器系）
• 生化学および尿分析

包含基準:

その患者：

• 18歳以上75歳未満の方
• あなたは客観化可能な尿路結石の以前のエピソードを提示しました
• 正常尿酸血症を呈する
• 臨床検査（生化学および尿）の結果を保有
• 患者は研究に参加し、協力することに同意します

除外基準:

患者は以下を提示します：

• 活動性尿路感染症
• チョコレートまたはテオブロミンに対するアレルギー
• -血清クレアチニンが1.5 mg / dlを超える
• 妊娠・授乳期（女性）
• 腸閉塞
• 高尿酸血症
• 利尿薬による治療
• アロプリノールまたはフェブキソスタットによる治療。
• うっ血性心不全
• 高尿酸血症の予防のためのその他の薬理学的治療
• 慢性腎不全 介入の母集団サンプル 患者数は 60 人になります (セクション研究サンプルの患者数の正当化を参照してください)。 この介入は、利用可能な患者のサンプルであるため、尿路結石症または尿中 COM / 尿酸を有する患者のサンプルで実行されます。 これは予備調査に相当し、それを使用しても得られたデータを一般集団に直接外挿することはできません。 この利用可能なサンプルは、そのサンプルによって表される可能性のある母集団を慎重に外挿できるように十分に記述されます。 これらの集団サンプルを使用した研究は、同じサンプルで特定の研究を行い、この場合のように少数の被験者で実験的な研究を実施するために使用されるものです.

募集ルート 任意の患者のサンプルは、上記の除外基準ではなく、包含基準を満たす患者の中から、Hospital de Manacor の泌尿器科によって募集されます。

観察期間 治験責任医師は、募集に必要な時間を考慮して、36 か月間、観察形式および既存の病歴から収集されたデータを使用して、最低 60 人の患者を募集する必要があります。

栄養介入ステージ 1 の説明。 栄養暴露は、30 人の患者のグループに 14 日間、朝食時に 1 つ、夕食時に 1 つの割合で投与される、カカオ抽出物を含まないクエン酸塩と植物抽出物に基づく栄養補助食品の 1 カプセルの摂取で構成されます。

段階 2. 栄養暴露は、クエン酸塩と植物抽出物に基づく栄養補助食品の 1 カプセルの摂取で構成され、カカオ抽出物は、朝食時に 1 つ、夕食時に 1 つの割合で投与されます。 30人の患者。

各段階の後、1週間の漂白が行われ、最初に割り当てられた栄養介入が行われます. 各患者は、連続するものからステージ 1 またはステージ 2 にランダムに割り当てられます。

対照群の選択 この介入には対照群はなく、個人は栄養介入の前後に評価されます。

研究サンプル。 サンプルサイズの事前決定 それがパイロット研究であり、通常の臨床診療の条件下で実施され、補食の作用に関する情報がほとんどないという事実は、仮説の実現を複雑にします. 初期のサンプル サイズの計算が行われていないことについては、これは観察的なパイロット研究であるためです。 患者の尿特性の最初の市販後の変更 60人の被験者の選択は、研究者との合意で決定されます。

不寛容のために取り下げられた被験者は置き換えられず、データの分析に含まれます。 他の状況のた​​めに研究を離れた患者は、交換する必要があり、統計分析には含まれません。 各患者は彼自身のコントロールとして機能するため、包含および除外基準などの関連要因は影響しません。 変動性が減少するため、介入群と​​対照群の間の統計的差異を検出するために、より小さなサンプル サイズが必要になります。 クロススタディにより、治療に対する反応を短期間で評価することができ、最初の介入は第2段階の介入を妨げませんでした。 2 つの段階の間の漂白または「洗浄」（ウォッシュアウト）の期間により、第 1 段階と第 2 段階の介入の間の干渉の可能性を回避できます。

データ収集ノート 新薬の臨床試験に該当しない試料の特性を調べる研究事業ではCRFは必要ないので、本研究事業では使用しない（平成19年7月3日生物医学法第14号）リサーチ）。 この研究では、尿サンプルのみが使用され、個人データを使用しないことで匿名化されるため、個人化されたデータ ファイルは作成されません。

プロセス この研究では、各患者に対して、通常の臨床診療には含まれない次の操作が含まれます。 各食事介入の前に、指示に従って朝の 2 時間の採尿と 24 時間の採尿。 2 つの研究グループのそれぞれについて、食事介入の最終日の指示に従って、24 時間尿の 2 時間朝採尿を取得します。 患者は、マナコールの地域病院の泌尿器科で、通常の医師にサンプルを預けます。 募集された患者は、尿酸結晶化尿酸の阻害能力の試験、研究の主な変数、および高圧液体クロマトグラフィー技術によるテオブロミンの測定を実現するために、尿サンプルを UIB の腎結石研究所に自発的に譲渡します。紫外線検出器による年間検出。 その他の生化学的測定は、マナコールのコマルカル病院での通常の臨床診療で確立されたプロトコルに従って実施する必要があります。

研究変数 社会人口学的変数

• 年齢：歳（生まれた年）
• 性別男性女性

• 体重/身長および BMI 臨床変数 分析する変数は次のとおりです。

  • 血圧
  • 患者の内因性および外因性要因
  • 症状の発症日
  • 症状および付随する徴候
  • 個人の学歴
  • 以前の治療
  • 栄養介入に起因する有害作用: 有害作用は、病歴に現れた場合、または病歴にそのように定義できる臨床徴候および症状がある場合に記録されます。

生化学的変数 研究変数は、結石症患者の標準化された対照に対応する以下の血液生化学的パラメーターおよび便器になります。 24 時間尿

• クレアチニン
• リン酸塩
• 尿酸
• シュウ酸塩
• クエン酸塩
• カルシウム

• マグネシウム

  2時間尿

• クレアチニン
• pH
• 尿酸の結晶化を阻害する能力。 研究の主な変数 血漿
• クレアチニン
• リン酸塩
• カルシウム
• マグネシウム
• カリウム
• 尿酸 24 時間の血液と尿の分析がマナコール病院で行われます (通常の臨床診療の範囲内)。余剰分は、他の患者と同様に分析されたサンプル用に確立されたプロトコルに従って破棄されます。 尿に対して2時間実施された分析（これは、バレアレス諸島大学IUNICSの腎結石研究研究所で実施されるものです）、尿サンプルの余剰があることを予見することはできません. . 存在する場合は、腎結石研究所によって当該サンプルに対して確立されたプロトコルに従って破棄されます。

活動予定

• 計画された開始は、2017 年の第 2 四半期に相当します (条件付き最終承認 CEIC)。
• 完成予定は 2018 年の第 3 四半期に相当します。 統計分析 ボランティアのすべての人口統計および分析データの記述的分析。 連続量的変数は集中化の尺度として平均を決定し、変動性は典型的な偏差と変動係数によって定義されます。 変数の統計分析は、2 つのサンプル平均間の差を決定するため、および信頼区間を構築するために、対になったサンプルのスチューデント t 検定によって実行されます。 この検定では、通常の形状で分布する 2 つのサンプルの平均が同じかどうかをチェックします。