Studio della capacità di inibizione della cristallizzazione dell'acido urico nelle urine in un gruppo di pazienti litiasici dopo l'assunzione di un integratore alimentare

Premessa L'urolitiasi è una patologia nota fin dall'antichità anche se non si conoscono totalmente le cause della formazione di tutti i diversi tipi di calcoli esistenti. In conseguenza di ciò, solo in alcuni casi è stato possibile mettere a punto un trattamento efficace. La litiasi renale colpisce un'ampia fascia di popolazione, variabile dal 4 al 15% a seconda del campione di popolazione studiato. È importante evidenziare l'elevata morbilità associata a questa patologia, poiché tra il 10 e il 15% dei casi richiede un trattamento chirurgico e tra il 20 e il 30% richiede il ricovero. Tra tutte le litiasi, si stima che la litiasi urica rappresenti tra il 10 e il 15% di tutti i casi e colpisca soprattutto gli uomini di età superiore ai 50 anni, mentre la litiasi mista di ossalato di calcio monoidrato e acido urico colpisce il 2,5% di tutti i casi. Le litiasi generate dall'acido urico sono una patologia altamente ricorrente, anche ripetuta più volte durante l'anno, ed è correlata ad altre patologie come il diabete e l'obesità. Ciò implica un costo elevato stimato in miliardi di euro all'anno, soprattutto per la sua incidenza nelle emergenze mediche. Va notato che tra il 50 e il 70% delle persone che non ricevono cure o non cambiano le proprie abitudini alimentari sviluppano nuovi calcoli in un periodo di tempo inferiore a 5 anni. È un dato di fatto che il tipo e le caratteristiche dell'alimento determineranno il funzionamento del metabolismo acido-base e le caratteristiche dell'urina come può essere il suo pH, la maggiore o minore concentrazione di sostanze, nonché un insieme di caratteristiche in grado di determinare la capacità di cristallizzazione delle diverse sostanze in esso contenute come l'acido urico. È evidente che il problema medico che origina la litiasi non va trattato quindi solo eliminando lo stesso, mediante le diverse tecniche chirurgiche disponibili, ma vanno modificate anche le alterazioni responsabili del suo utilizzo e corretto addestramento. Se queste alterazioni non vengono modificate, persiste il rischio di genesi di nuovi calcoli. I trattamenti farmacologici finora utilizzati per curare la litiasi urica si basano sulla potente alcalinizzazione delle urine (mediante l'utilizzo di citrato o bicarbonato) aumentando il pH urinario per evitare la cristallizzazione dell'acido urico e la formazione di nuovi calcoli renali. Questi trattamenti possono presentare un problema a lungo termine e di conseguenza c'è una bassa percentuale di aderenza al trattamento dei calcoli di acido urico. Questi trattamenti a lungo termine possono aumentare il pH urinario oltre le 6 unità e finire per causare un diverso tipo di litiasi renale, la fosfatica, molto più difficile da trattare, aumentando la possibilità di calcificazione totale del rene che essa comporta. Pertanto, è evidente che dovrebbero essere ricercate nuove alternative in sostanze di origine alimentare che potrebbero facilitare i trattamenti dietetici di detta patologia.

Attualmente sono in commercio integratori alimentari a base di citrato estratti vegetali che contribuiscono al normale funzionamento del metabolismo acido-base dell'organismo alcalinizzando le urine (ad esempio Lit control pH up). Ma ci sono anche altri approcci al problema della litiasi basati sull'evitare o diminuire la capacità di cristallizzazione dell'urina sviluppati dal Renal Lithiasis Research Laboratory dell'Università delle Isole Baleari. Questi approcci consistono nella ricerca di inibitori della cristallizzazione di origine naturale. Un inibitore della cristallizzazione corrisponde a una sostanza in grado di prevenire, ritardare o ostacolare la cristallizzazione di composti insolubili. Questo approccio era già stato avviato con il lavoro di Bliznakov nel 1965, dimostrando che alcune molecole erano in grado di rallentare la velocità di crescita della natura cristallina di determinate sostanze a seguito del loro adsorbimento (legame) sulle superfici di crescita e delle corrispondenti alterazioni che ciò provocava. Durante questo periodo Vermeulen et al., Fleisch et al. e Howard e cols dimostrarono che una serie di sostanze presenti nelle urine, tra cui il pirofosfato, erano in grado di impedire la cristallizzazione dei sali di calcio. Anche queste idee sono state poi sviluppate dal Lithiasis Research Laboratory Renal osservando che detta capacità inibitoria della cristallizzazione dei sali di calcio era fatta anche dal fitato, sostanza presente in tutti i semi non raffinati (legumi, cereali, noci,...) . Questo processo ha portato alla ricerca di sostanze naturali che presentassero detta capacità di inibire, non sulla cristallizzazione dei sali di calcio ma sulla cristallizzazione dell'acido urico. Tra le numerose sostanze utilizzate nei test in vitro è stato osservato che la teobromina, componente naturale del cacao, produce tali effetti in concentrazioni simili a quelle prodotte dopo l'abituale assunzione di cioccolato. In Europa il consumo di cioccolato è approssimativamente compreso tra 6 e 12 kg per persona all'anno. Per questo motivo si intende ridurre la capacità di inibizione dell'acido urico dalle urine mediante un test in vitro dopo l'assunzione di un integratore alimentare determinato. Laboratorio di ricerca sulla litiasi assegnato all'IUNICS (Università delle Isole Baleari) prima e dopo l'assunzione di- 3 - un certo integratore alimentare per un periodo stabilizzato.

Motivazione Il Laboratorio di ricerca sulla litiasi renale dal 1998 ha tra i suoi scopi quello di studiare la relazione tra le caratteristiche delle urine ei diversi tipi di litiasi esistenti. Come abbiamo indicato una delle litiasi con una grande incidenza è la litiasi dell'acido urico o ossalato di calcio monoidrato/acido urico. Attualmente, la relazione tra la capacità di inibire la cristallizzazione dell'acido urico da un'urina dopo l'ingestione di alcuni integratori alimentari.

L'urina è un prodotto della filtrazione del sangue che riflette la sua composizione, comprendente acqua e molecole a basso peso molecolare come sali, vitamine, minerali, ecc. di conseguenza l'assunzione di determinati alimenti, come il cioccolato, il cacao o un loro estratto, si rifletterà in un aumento dell'escrezione urinaria di teobromina, un inibitore della cristallizzazione dell'acido urico.

A causa di ciò, la modifica della capacità di cristallizzazione dell'acido urico nelle urine dovrebbe essere chiaramente riflessa. Naturalmente, oltre a questa variabile principale, l'urina deve essere determinata in una serie di variabili secondarie come il pH urinario, la concentrazione di Teobromina e tutti gli altri parametri urinari importanti nella patologia litiasica.

Obiettivo principale e obiettivi secondari Attualmente, il rapporto tra la capacità di inibire la cristallizzazione dell'acido urico da parte delle urine a causa dell'assunzione di alcuni alimenti o integratori alimentari e la concentrazione di teobromina e pH urinario. Pertanto, l'obiettivo principale è valutare la capacità di inibizione della cristallizzazione dell'acido urico da parte delle urine in pazienti con diagnosi di litiasi urica o ossalato di calcio monoidrato/acido urico, dopo l'ingestione di un integratore alimentare con estratto di cacao. Ciò consentirebbe di utilizzare la capacità di inibizione della cristallizzazione dell'acido urico da parte delle urine, come possibile indicatore della prevenzione della litiasi urica o dell'ossalato di calcio monoidrato/acido urico per effetto dell'alimentazione.

Ipotesi L'ipotesi di partenza di questo studio corrisponde al possibile aumento della capacità di inibire la cristallizzazione dell'acido urico da parte delle urine di soggetti che hanno consumato cibi contenenti cacao o estratto di cacao. Verrà quindi studiata la relazione tra l'assunzione di uno specifico complemento, lo stato nutrizionale e la capacità di inibire la cristallizzazione dell'acido urico da parte delle urine. Un aumento della capacità di inibire la cristallizzazione dell'acido urico delle urine sarebbe utile per prevenire la cristallizzazione dell'acido urico, che è all'origine dei calcoli di acido urico o dei calcoli misti ossalato di calcio monoidrato/acido urico.

Disegno e metodologia del lavoro Gruppo di studio Verrà studiata la capacità inibitoria della cristallizzazione dell'acido urico delle urine in due gruppi di pazienti ai quali verrà proposta l'assunzione dell'integratore alimentare a base di citrato ed estratti vegetali e dell'integratore alimentare a base di citrato ed estratti vegetali con estratto di cacao per un periodo di 14 giorni. A questi gruppi verrà fornito l'integratore alimentare che dovrebbero consumare durante il periodo di 14 giorni insieme alla dieta abituale.

Intervento dietetico L'integratore alimentare da consumare sarà Lit Control pH Up senza estratto secco di ginseng (Panax ginseng, radice) e lo stesso Lit Control pH Up con estratto secco di cacao (Theobroma cacao, frutto) che corrispondono alle capsule con estratto di cacao . La dose sarà di 2 capsule da 750 mg per individuo, dosate in ragione di una durante la colazione e un'altra durante la cena. Ad ogni partecipante verrà fornito gratuitamente il numero necessario di capsule nutrizionali dell'intervento nutrizionale.

Composizione degli integratori alimentari dell'intervento nutrizionale (capsula da 750 mg di peso)

• Lit control pH up (con estratto secco di cacao): citrato di potassio, magnesio citrato, estratto secco di cacao (Theobroma cacao, 60 mg di teobromina), maltodestrina (agente di carica), biossido di silicio (antiagglomerante), stearato di magnesio (fluidificante), zinco gluconato, vitamina A. Copertura: gelatina, biossido di titanio (opacizzante), ferro giallo ruggine (colorante), indigotine-FD & C Blue2 (colorante). NC: 172249.2. Capsula di peso 750 mg
• Controllo illuminato pH up (senza estratto secco di cacao): citrato di potassio, magnesio citrato, maltodestrina (agente di carica), biossido di silicio (antiagglomerante), stearato di magnesio (fluidificante), gluconato di zinco, vitamina A. Copertura: gelatina, biossido di titanio (opacizzante) , ferro giallo ruggine (colorante), indigotine-FD & C Blue2 (colorante). Peso Capsula da 750 mg Assenza di effetti avversi/secondari dell'integratore alimentare La teobromina corrisponde ad un fitocomponente alcaloide presente in alte concentrazioni nel cioccolato, infatti un pezzo da 50 g di cioccolato nero contiene tra 237 e 519 mg di teobromina e giornalmente molte persone consumano più di questa quantità senza presentare effetti collaterali trattandosi di un alimento. È evidente che la quantità giornaliera di teobromina ingerita come estratto di cacao corrisponderebbe grosso modo a una quantità di cioccolato compresa tra circa 11-25 g, quantità di consumo che può essere considerata normale a dieta. In un articolo di Birkett et al (1985) in cui 200 mg di teobromina sono stati ingeriti per via orale tre volte al giorno, non sono stati osservati sintomi clinici o attività farmacologica. Né l'assunzione di teobromina come cioccolato dolce alla dose di 6 mg/kg·giorno (per una persona di 70 kg corrispondono a 420 mg/giorno di teobromina) provoca effetti Sperimentazioni cliniche in soggetti umani (Shively et al., 1985). Esistono diversi studi che determinano l'effetto della teobromina sull'umore e utilizzano quantità di teobromina localizzate intorno ai 700 mg/giorno come descritto in Mitchell et al. (2011). Infine, in uno studio che ha confrontato l'ingestione di teobromina a dosi di 250 mg rispetto al placebo, non sono state rilevate differenze significative nell'aumento della frequenza cardiaca né nella pressione arteriosa sistolica o diastolica (Baggott et al., 2013). Il rapporto dell'OMS (1991 ) descrive che l'ingestione di alte dosi di teobromina nelle assunzioni giornaliere umane di cioccolato da 50-100 g di cacao (0,8-1,5 g di teobromina) può essere associata in alcuni casi a sudorazione, tremori e mal di testa Questa è una dose di circa otto volte superiore a quello utilizzato nella dietetica di intervento.

Per tutti i dati esposti è evidente che la teobromina presente nell'estratto di cacao che ingeriranno nell'intervento dietetico è lontana da qualsiasi effetto tossico. Questo dosaggio nutrizionale corrisponde ad un normale apporto di Teobromina sotto forma di cioccolato.

Obiettivo principale Il presente progetto di ricerca osservazionale si propone di valutare l'attività di un integratore alimentare Lit Control pH Up senza estratto secco di ginseng rispetto ad un altro Lit Control pH Up con estratto secco di cacao in soggetti litiasici normouricemici con litiasi da acido urico e/o COM/Ac. dimostrato acido urico, durante un periodo di 14 giorni di intervento. La principale variabile di studio sarà la capacità di inibizione della cristallizzazione dell'acido urico nelle prime urine mattutine delle 2 h.

Obiettivo secondario Conoscere il profilo dei parametri biochimici ematici e urinari dei pazienti reclutati nell'intervento nutrizionale.

Disegno dello studio Trial osservazionale non randomizzato incrociato e aperto al singolo cieco. Definizione della popolazione in studio: criteri di selezione

Saranno inclusi nello studio soggetti con litiasi urica o diagnosi di COM/Ac urinario. non iperuricemico, si intende come tale l'esistenza di almeno un episodio pregresso con eliminazione esterna del calcolo mediante espulsione spontanea, litotripsia extracorporea o altre tecniche chirurgiche e successiva analisi ed identificazione dello stesso nonché l'assenza di iperuricemia dimostrabile dal dati di:

• Anamnesi, esame obiettivo con controllo TA ed esplorazioni complementari
• Radiografia addominale semplice (sistema urinario)
• Analisi biochimiche e urinarie

Criterio di inclusione:

Il paziente:

• Hai più di 18 anni e meno di 75 anni
• Lei ha presentato un precedente episodio di litiasi urica oggettivabile
• Presenta normouricemia
• Possiede i risultati degli esami di laboratorio (biochimica e urine)
• Il paziente accetta di partecipare e collaborare allo studio

Criteri di esclusione:

Il paziente presenta:

• Infezione urinaria attiva
• Allergia al cioccolato o alla teobromina
• Creatinina sierica superiore a 1,5 mg/dl
• Gravidanza, periodo di allattamento (donne)
• Ostruzione intestinale
• Iperuricemia
• Trattamento con diuretici
• Trattamento con allopurinolo o febuxostat.
• Insufficienza cardiaca congestizia
• Altri trattamenti farmacologici per la prevenzione dell'iperuricemia
• Insufficienza renale cronica Campione di popolazione dell'intervento Il numero di pazienti sarà 60 (vedere la giustificazione per il numero di pazienti nella sezione Campione di studio). Questo intervento sarà effettuato su un campione di pazienti con litiasi urica o COM urinario/acido urico, in quanto è un campione di pazienti disponibile. Ciò corrisponde a uno studio preliminare e il suo utilizzo non consente un'estrapolazione diretta dei dati ottenuti alla popolazione generale. Questo campione disponibile sarà descritto sufficientemente per poter effettuare una cauta estrapolazione alla popolazione che potrebbe essere rappresentata da quel campione. Gli studi con questi campioni di popolazione sono quelli che servono per fare studi specifici sugli stessi campioni e per effettuare studi sperimentali con pochi soggetti come in questo caso.

Percorso di reclutamento Il campione di pazienti volontari sarà reclutato dal Servizio di Urologia dell'Hospital de Manacor tra i suoi pazienti che soddisfano i criteri di inclusione e non i criteri di esclusione sopra descritti.

Periodo di osservazione Lo sperimentatore deve reclutare un minimo di 60 pazienti in forma osservativa e con i dati raccolti dalle storie cliniche esistenti, durante un periodo di 36 mesi, considerando il tempo necessario per il reclutamento.

Descrizione dell'intervento nutrizionale Fase 1. L'esposizione nutrizionale consisterà nell'assunzione di 1 capsula dell'integratore alimentare a base di citrato ed estratto vegetale senza estratto di cacao dosato in ragione di una durante la colazione e un'altra durante la cena, durante un periodo di 14 giorni a un gruppo di 30 pazienti.

Fase 2. L'esposizione nutrizionale consisterà nell'assunzione di 1 capsula dell'integratore alimentare a base di citrato ed estratto vegetale con estratto di cacao dosato in ragione di una durante la colazione e un'altra durante la cena, per un periodo di 14 giorni a un gruppo di 30 pazienti.

Dopo ogni tappa verrà effettuata una settimana di sbiancamento e l'intervento nutrizionale iniziale assegnato. Ogni paziente viene assegnato in modo casuale dal successivo allo Stadio 1 o allo Stadio 2.

Selezione del gruppo di controllo In questo intervento non esiste un gruppo di controllo, il proprio L'individuo sarà valutato prima e dopo l'intervento nutrizionale.

Campione di studio. Predeterminazione della dimensione del campione Il fatto che si tratti di uno studio pilota e condotto in condizioni di pratica clinica abituale e che disponga di poche informazioni sull'azione del cibo complementare complica la realizzazione dell'ipotesi. Per ciò che non è stato fatto calcolo iniziale della dimensione del campione, perché si tratta di uno studio pilota osservazionale Modifica iniziale post-marketing delle caratteristiche delle urine del paziente. La scelta dei 60 soggetti è decisa in accordo con i ricercatori.

I soggetti ritirati per intolleranza non saranno sostituiti e saranno inclusi nell'analisi dei dati. I pazienti che lasciano lo studio per qualsiasi altra circostanza, devono essere sostituiti e non saranno inclusi nell'analisi statistica. Nessun fattore rilevante influenza come i criteri di inclusione ed esclusione, poiché ogni paziente funge da controllo di se stesso. La variabilità è ridotta, motivo per cui è necessaria una dimensione del campione più piccola, al fine di rilevare la differenza statistica tra il gruppo di intervento e il gruppo di controllo. Lo studio incrociato consente di valutare la risposta al trattamento in un breve lasso di tempo e il primo intervento non ha interferito con quello del secondo stadio. Il periodo di sbiancamento o "lavaggio" (wash-out) tra i due stadi consente di evitare possibili interferenze tra gli interventi del primo stadio e del secondo.

Quaderno di raccolta dati Nei progetti di ricerca in cui si studiano le caratteristiche dei campioni e che non corrispondono a sperimentazioni cliniche di nuovi farmaci non è necessario il CRF quindi non viene utilizzato in questo progetto di ricerca (Legge 14/2007, del 3 luglio, del Biomedico Ricerca). Questo studio non crea file di dati personalizzati poiché solo il campione di urina utilizzato sarà reso anonimo non utilizzando dati personali.

Processo Lo studio comporterà per ciascun paziente le seguenti operazioni non incluse nella normale pratica clinica. Ottenere l'urina del mattino per 2 ore e raccogliere l'urina per 24 ore secondo le istruzioni prima di ogni intervento dietetico. Ottenere la raccolta delle urine delle 2 ore mattutine delle urine delle 24 ore secondo le indicazioni dell'ultimo giorno dell'intervento dietetico per ciascuno dei due gruppi di studio. I Pazienti depositeranno i loro campioni nel Dipartimento di Urologia dell'Ospedale Regionale di Manacor al tuo medico abituale. I pazienti reclutati cederanno volontariamente al Laboratorio di Ricerca sulla Litiasi Renale dell'UIB i propri campioni di urina per la realizzazione del test della capacità di inibizione della cristallizzazione acida dell'acido urico, principale variabile di studio e per la determinazione della teobromina mediante tecnica di cromatografia liquida ad alta pressione e rilevamento annualizzato attraverso un rilevatore di ultravioletti. Le altre determinazioni biochimiche dovranno essere effettuate secondo i protocolli stabiliti nella pratica clinica abituale presso l'Ospedale Comarcal di Manacor.

Variabili di studio Variabili sociodemografiche

• Età: anni (anno di nascita)
• Sesso Maschio Femmina

• Peso/altezza e BMI Variabili cliniche Le variabili da analizzare saranno

  • Pressione sanguigna
  • Fattori intrinseci ed estrinseci del paziente
  • Data di insorgenza dei sintomi
  • Sintomi e segni associati
  • Storia personale
  • Trattamenti precedenti
  • Effetti avversi attribuibili all'intervento nutrizionale: Gli effetti avversi saranno registrati quando compaiono nella storia clinica o quando nella storia clinica sono presenti segni e sintomi clinici che consentono di definirli come tali.

Variabili biochimiche Le variabili dello studio saranno i seguenti parametri biochimici del sangue e gli orinatoi che corrispondono ai controlli standardizzati dei pazienti litiasici: urina delle 24 ore

• Creatinina
• Fosfato
• Acido urico
• Ossalato
• Citrato
• Calcio

• Magnesio

  urina di 2 ore

• Creatinina
• pH
• Capacità di inibire la cristallizzazione dell'acido urico. Principale variabile di studio Plasma sanguigno
• Creatinina
• Fosfato
• Calcio
• Magnesio
• Potassio
• Acido urico L'analisi del sangue e delle urine delle 24 ore verrà eseguita presso l'Hospital de Manacor (nell'ambito della normale pratica clinica), l'eccedenza verrà distrutta secondo i protocolli stabiliti per i campioni analizzati come in qualsiasi altro paziente. L'analisi effettuata sulle urine per 2 ore (che è quella che verrà effettuata nel Laboratorio di ricerca sulla litiasi renale dell'Università delle Isole Baleari IUNICS), non so prevede che ci siano eccedenze di campioni di urina . Nel caso in cui esista, verrà distrutto secondo i protocolli stabiliti per tali campioni dal Laboratorio di ricerca sulla litiasi renale.

Calendario delle attività

• L'inizio previsto corrisponde al secondo trimestre 2017 (autorizzazione finale condizionata CEIC).
• Il completamento previsto corrisponde al terzo trimestre del 2018. Analisi statistica Un'analisi descrittiva di tutti i dati demografici e analitici dei volontari. Le variabili quantitative continue determineranno la media come misura di centralizzazione mentre la variabilità sarà definita dallo scostamento tipico e dal coefficiente di variazione. L'analisi statistica delle variabili sarà effettuata mediante il test t di Student per campioni appaiati per la determinazione delle differenze tra le due medie campionarie e per la costruzione dell'intervallo di fiducia. Il test verifica se le medie di due campioni distribuiti in una forma normale sono le stesse.