一组结石患者服用保健品后尿液中尿酸结晶抑制能力的研究

背景技术尿石症是一种自古以来就已知的病理学，尽管还不完全了解所有不同类型结石形成的原因，因此，只有在某些情况下才有可能开发出有效的治疗方法。 肾结石影响广泛的人群，根据所研究的人群样本，从 4% 到 15% 不等。 重要的是要强调与这种病理相关的高发病率，因为 10% 到 15% 的病例需要手术治疗，20% 到 30% 的病例需要住院治疗。 在所有结石中，估计尿结石占所有病例的10%至15%，尤其多见于50岁以上的男性，而一水草酸钙和尿酸的混合结石占所有病例的2.5%。 尿酸结石是一种复发性很强的病理，一年内甚至会反复数次，并与糖尿病、肥胖等其他病理有关。 这意味着每年估计有数十亿欧元的高成本，尤其是在医疗紧急情况下。 应该注意的是，在未接受治疗或未改变营养习惯的人群中，有 50% 至 70% 的人在不到 5 年的时间内患上了新的牙结石。 一个约定俗成的事实是，饲料的类型和特性将决定酸碱代谢的功能和尿液的特性，因为它可以是 pH 值、物质浓度的高低以及一组特性可以确定其中所含不同物质（例如尿酸）的结晶能力。 很明显，结石病起源的医学问题不应该被治疗，因此只能通过可用的不同手术技术消除相同的问题，而且必须修改和纠正培训导致其使用的变化。 如果不修改这些更改，则产生新微积分的风险仍然存在。 迄今为止用于治疗尿石症的药物治疗是基于尿液的强力碱化（通过使用柠檬酸盐或碳酸氢盐）增加尿液 pH 值以避免尿酸结晶和新肾结石的形成。 这些治疗可能会带来长期问题，因此只有 2% 的人坚持治疗尿酸结石。 这些长期治疗可以将尿液 pH 值提高到 6 个单位以上，并最终导致不同类型的肾结石，即磷酸盐，通过增加肾脏完全钙化的可能性，治疗起来要困难得多。 因此，很明显，应该在食物来源的物质中寻找新的替代品，以促进所述病理的饮食治疗。

目前市场上有基于柠檬酸盐的食品补充剂植物提取物有助于碱化尿液的有机体酸碱代谢的正常运作（例如 Lit 控制 pH 值）。 但也有其他解决结石问题的方法，这些方法基于避免或降低由 Illes Balears 大学的肾结石研究实验室开发的尿液结晶能力。 这些方法在于寻找天然来源的结晶抑制剂。结晶抑制剂对应于能够防止、延迟或阻碍不溶性化合物结晶的物质。 Bliznakov 在 1965 年的工作已经开始采用这种方法，表明某些分子能够减缓某些物质的生长速率结晶性质，这是由于它们在生长表面上的吸附（结合）以及由此引起的相应改变。 在此期间，Vermeulen 等人、Fleisch 等人。 Howard 和 cols 表明，尿液中存在的一系列物质（包括焦磷酸盐）能够防止钙盐结晶。 这些想法后来也由肾结石研究实验室发展，观察到钙盐结晶的抑制能力它也是由植酸盐制成的，植酸盐是一种存在于所有未精制种子（豆类、谷物、坚果等）中的物质。 . 这个过程导致寻找具有所述抑制能力的天然物质，不是抑制钙盐的结晶，而是抑制尿酸的结晶。 在体外试验中使用的众多物质中，观察到可可碱（可可的天然成分）产生的所述效果浓度与通常摄入巧克力后产生的效果浓度相似。 在欧洲，每人每年的巧克力摄入量约为 6 至 12 公斤。 出于这个原因，它旨在通过摄入补充确定的食物后的体外测试来降低尿液中尿酸的抑制能力。为此，将使用来自患者的尿液样本，这些志愿者将提供给肾脏分配给IUNICS（巴利阿里群岛大学）的结石病研究实验室在摄入- 3 - 某种辅食的前后一段时间内安定下来。

理由 肾结石研究实验室自 1998 年以来，其目的之一就是研究尿液特征与现有结石的不同类型之间的关系。 正如我们所指出的，一种发病率较高的结石症是尿酸结石症或草酸钙一水合物/尿酸结石症。 目前，摄入某些食物后抑制尿酸从尿液中结晶的能力与补体之间的关系。

尿液是血液过滤的产物，反映其成分，包括水和低分子量分子，如盐类、维生素、矿物质等，因此会反映某些食物的摄入量，如巧克力、可可或其提取物增加可可碱的尿排泄，可可碱是尿酸结晶的抑制剂。

因此，应该清楚地反映出尿液中尿酸结晶能力的改变。 自然地，除了这个主要变量之外，尿液必须通过一系列次要变量来确定，例如尿液 pH 值、可可碱浓度和病理结石中的所有其他重要尿液参数。

主要目标和次要目标 目前，由于摄入某些食物或食品补充剂而抑制尿酸结晶的能力与可可碱浓度和尿液 pH 之间的关系。 因此，主要目的是评估诊断为尿石症或草酸钙一水合物/尿酸的患者在摄入含可可提取物的食品补充剂后对尿液中尿酸结晶的抑制能力。 这将允许使用抑制尿液中尿酸结晶的能力，作为预防由于食物的作用引起的尿石症或草酸钙一水合物/酸性尿症的可能指标。

假设 本研究的起始假设对应于食用含有可可或可可提取物的食物的受试者的尿液抑制尿酸结晶的能力可能增加。 因此，将研究特定补体的摄入量与营养状况和抑制尿液中尿酸结晶的能力之间的关系。 抑制尿液中尿酸结晶的能力的增加将有助于防止尿酸结晶，这是尿酸结石或混合草酸钙一水合物/酸性尿结石的起源。

工作设计和方法 研究组 将在两组患者中研究尿液中尿酸结晶的抑制能力，这些患者将被提议服用基于柠檬酸盐和植物提取物的食品补充剂以及基于柠檬酸盐和植物提取物的食品补充剂在 14 天内使用可可提取物。 将向这些群体提供他们在 14 天期间应与您的日常饮食一起食用的食品补充剂。

饮食干预 食用的食品补充剂是不含人参（人参、根）干提取物的 Lit Control pH Up 和含有干可可提取物（Theobroma cacao、fruit）的 Lit Control pH Up，这与含可可提取物的胶囊相对应. 剂量为每人 2 粒 750 毫克胶囊，早餐时服用一粒，晚餐时服用另一粒。 每位参与者将免费获得营养干预所需数量的营养胶囊。

营养干预的营养补充剂的组成（750毫克重量的胶囊）

• Lit control pH up (with dry cocoa extract)：柠檬酸钾，柠檬酸镁，可可干提取物（Theobroma cacao，60 毫克可可碱），麦芽糖糊精（膨胀剂），二氧化硅（抗结块），硬脂酸镁（流化），锌葡萄糖酸盐、维生素 A。覆盖范围：明胶、二氧化钛（遮光剂）、锈黄铁（染料）、靛蓝-FD & C Blue2（染料）。 中国：172249.2。 重量胶囊 750 毫克
• Lit control pH up（无干可可提取物）：柠檬酸钾、柠檬酸镁、麦芽糖糊精（膨胀剂）、二氧化硅（抗结块）、硬脂酸镁（流化）、葡萄糖酸锌、维生素 A。覆盖范围：明胶、二氧化钛（遮光剂） , 铁锈黄（染料），靛蓝-FD & C Blue2（染料）。 重量 750 毫克胶囊 食品补充剂可可碱没有不良/副作用，相当于巧克力中高浓度的植物成分生物碱，事实上，一块 50 克黑巧克力含有 237 至 519 毫克可可碱，许多人每天食用超过这个量而不会出现副作用，因为它是一种食物。 很明显，作为可可提取物摄入的可可碱的每日量大致对应于大约 11-25 克巧克力的量，可以认为是饮食中的正常摄入量。 在 Birkett 等人 (1985) 的一篇论文中，每天三次口服摄入 200 毫克可可碱，但没有观察到任何临床症状或药理活性。 以 6 mg / kg·天的剂量摄入可可碱作为甜巧克力（对于 70 kg 的人相当于 420 mg / 天的可可碱）也不会对人类受试者的临床试验产生影响（Shively 等人，1985 年）。 有不同的研究确定可可碱对情绪的影响，可可碱的使用量位于 700 毫克/天左右，如 Mitchell 等人所述。 (2011)。 最后，在一项比较摄入 250 毫克可可碱与安慰剂的研究中，心率增加在收缩压或舒张压方面均无显着差异（Baggott 等人，2013 年）。WHO 报告（1991 年） ) 描述了人类每天摄入 50-100 克可可巧克力中的高剂量可可碱（0.8-1.5 克可可碱）在某​​些情况下可能与出汗、颤抖和头部疼痛有关比干预营养学中使用的高八倍。

对于所有暴露的数据，很明显，他们将在饮食干预中摄取的可可提取物中存在的可可碱远没有任何毒性作用。 该营养剂量对应于巧克力形式的可可碱的正常摄入量。

主要目标 本观察性研究项目旨在评估不含干人参提取物的 Lit Control pH Up 食品补充剂与另一种含干可可提取物的 Lit Control pH Up 食品补充剂在尿酸结石和/或 COM / Ac 正常尿酸血症的结石受试者中的活性。在 14 天的干预期间表现出尿酸。 研究的主要变量是在 2 小时的第一次晨尿中抑制尿酸结晶的能力。

次要目标了解营养干预中招募的患者的血液和尿液生化参数概况。

研究设计 非随机观察试验交叉并向单盲开放。 研究人群的定义：选择标准

诊断为尿石症或尿 COM/Ac 的受试者将被纳入研究。 不是高尿酸血症，可以理解为至少有一次发作之前通过自发排出、体外碎石术或其他手术技术从外部消除了计算，随后对其进行分析和鉴定，并且没有明显的高尿酸血症数据：

• 临床病史、体格检查与 TA 控制和探索相辅相成
• 简单的腹部 X 光检查（泌尿系统）
• 生化和尿液分析

纳入标准：

患者：

• 您已年满 18 岁且未满 75 岁
• 您之前曾出现过可客观化的尿路结石病
• 出现正常尿酸血症
• 拥有化验结果（生化和尿液）
• 患者同意参与和合作研究

排除标准：

患者表现：

• 活动性尿路感染
• 对巧克力或可可碱过敏
• 血清肌酐大于 1.5 mg / dl
• 怀孕、哺乳期（女性）
• 肠梗阻
• 高尿酸血症
• 利尿剂治疗
• 用别嘌醇或非布司他治疗。
• 充血性心力衰竭
• 其他预防高尿酸血症的药物治疗
• 慢性肾功能衰竭 干预人群样本 患者人数为 60（请参阅“研究样本”部分中患者人数的理由）。 这种干预将在患有尿石症或尿 COM / Ac 尿酸的患者样本中进行，因为它是可用的患者样本。 这对应于一项初步研究，其使用不允许将获得的数据直接外推到一般人群。 将对该可用样本进行充分描述，以便能够对该样本可能代表的人群进行谨慎的推断。 对这些人口样本的研究是用于对相同样本进行特定研究，并像本例一样对少数受试者进行实验性研究。

招募途径 自愿患者样本将由 Hospital de Manacor 的泌尿科服务在其符合纳入标准而非上述排除标准的患者中招募。

观察期 考虑到招募所需的时间，研究者必须在 36 个月的时间内从观察形式招募至少 60 名患者，并使用从现有临床病史收集的数据。

营养干预阶段 1 的描述。 营养暴露包括摄入 1 粒基于柠檬酸盐和植物提取物的食品补充剂，不含可可提取物，早餐时服用一粒，晚餐时服用另一粒，为期 14 天，共 30 名患者。

阶段 2. 营养暴露包括摄入 1 粒基于柠檬酸盐和植物提取物和可可提取物的食品补充剂胶囊，早餐时服用一粒，晚餐时服用另一粒，为期 14 天，一组30 名患者。

在每个阶段之后，将进行一周的漂白和初始分配的营养干预。 每个患者被随机分配到第 1 阶段或第 2 阶段。

对照组的选择 在这种干预中没有对照组，将在营养干预前后对自己的个体进行评估。

研究样本。 样本量的预先确定事实上这是一项试点研究，是在通常的临床实践条件下进行的，并且几乎没有关于补充食品作用的信息，这使得假设的实现变得复杂。 对于尚未进行初始样本量计算的内容，因为它是一项观察性试点研究，对患者的尿液特征进行初始上市后修改。 60 名受试者的选择由研究人员协商决定。

由于不耐受而退出的受试者将不会被替换，并将包括在数据分析中。 因其他原因退出研究的患者，必须更换，不纳入统计分析。 没有相关因素影响，例如纳入和排除标准，因为每个患者都是他自己的对照。 变异性降低，这就是为什么您需要更小的样本量，以便检测干预组和对照组之间的统计差异。 交叉研究允许在短时间内评估对治疗的反应，并且第一次干预不会干扰第二阶段的干预。 两个阶段之间的漂白或“清洗”（洗脱）期允许避免第一阶段和第二阶段的干预之间可能的干扰。

数据收集笔记本 在研究样本特征且与新药临床试验不对应的研究项目中不需要 CRF，因此在该研究项目中不使用它（生物医学 7 月 3 日第 14/2007 号法律研究）。 本研究不创建个性化数据文件，因为仅使用尿液样本，将通过不使用任何个人数据来匿名化。

过程 该研究将涉及每位患者的以下操作，这些操作不包括在通常的临床实践中。 每次饮食干预前按说明书取晨尿2小时，收集尿液24小时。 根据饮食干预最后一天的说明，为两个研究组中的每一个获取 24 小时尿液的 2 小时晨尿收集。 患者将把他们的样本存放在马纳科尔地区医院的泌尿科，交给您常去的医生。 招募的患者自愿将其尿液样本交给UIB肾结石研究实验室，用于实现尿酸结晶抑制能力的检测，研究的主要变量和高压液相色谱技术测定可可碱并通过紫外检测器进行年化检测。 其他生化测定应根据马纳科尔医院 Comarcal 的常规临床实践中制定的方案进行。

研究变量 社会人口变量

• 年龄：岁（出生年份）
• 性别：男/女

• 体重/身高和 BMI 临床变量 要分析的变量将是

  • 血压
  • 患者的内在和外在因素
  • 出现症状的日期
  • 症状和伴随体征
  • 个人历史
  • 既往治疗
  • 归因于营养干预的不良反应：当不良反应出现在临床病史中或当临床病史中存在临床体征和症状时可以将其定义为不良反应。

生化变量 研究变量将是以下血液生化参数和与结石患者标准化对照相对应的小便池： 24 小时尿液

• 肌酐
• 磷酸盐
• 尿酸
• 草酸盐
• 柠檬酸盐
• 钙

• 镁

  2小时尿

• 肌酐
• 酸碱度
• 具有抑制尿酸结晶的能力。 研究的主要变量 血浆
• 肌酐
• 磷酸盐
• 钙
• 镁
• 钾
• 尿酸 将在 Hospital de Manacor 进行 24 小时的血液和尿液分析（在通常的临床实践中），剩余部分将根据为任何其他患者分析的样本制定的协议销毁。 对尿液进行了 2 小时的分析（这是将在巴利阿里群岛 IUNICS 肾结石研究实验室进行的分析），我不知道是否预见到尿液样本会过剩. 如果它存在，它将根据肾结石研究实验室为所述样本制定的协议销毁。

活动日程

• 计划启动对应于 2017 年第二季度（有条件的最终授权 CEIC）。
• 计划完成对应于 2018 年第三季度。 统计分析 对志愿者的所有人口统计和分析数据的描述性分析。 连续定量变量将确定平均值作为集中度的度量，而变异性将由典型偏差和变异系数定义。 变量的统计分析将通过配对样本的Student t检验来进行，以确定两个样本均值之间的差异并构建信任区间。 该检验检查按正态分布的两个样本的均值是否相同。