デジタル PCR による胎児トリソミー 21 の非侵襲的スクリーニング (dPNI-T21)

フランスでは、世界の多くの国と同様に、21 トリソミーまたはダウン症候群 (DS) は、母体血中の生化学的マーカーのアッセイを含むリスク計算 (R) に基づく出生前スクリーニングの対象となっています。胎児の超音波パラメータ (項の半透明度)。 高リスク（R> 1/250）であると言われている妊婦の集団では、侵襲的サンプリング（トロホブラスト生検または羊水穿刺）によってDSの診断の確認が行われ、胎児の核型の確立が可能になります。 感度が限られていることに加えて (技術によっては 80 ～ 85%)、このスクリーニングは不安要因 (8% の偽陽性) であり、1% の症例で正倍数性胎児 (正常な核型) の流産 (処置は侵襲的) です。

妊婦の血漿には、母体由来の遊離 DNA (90%) と胎児由来の遊離 DNA (無細胞胎児 DNA の cffDNA) (約 10%) の混合物が含まれていますが、この割合は胎児トリソミー 21 の場合に増加します。 cffDNA の割合は、一対の染色体の特定の遺伝子マーカーを定性的および定量的に研究するのに十分です。 したがって、参照染色体マーカーに対する対象のマーカー染色体の量を評価し、正倍数体妊娠中のすべての常染色体 (染色体 1 ～ 22) について理論的に同一である対象のマーカー/マーカー比を計算することが可能です。 胎児の異数性 (例えば、21 トリソミー) の場合、この比率は、関与する染色体ペアに対して不均衡です。

ハイスループット マス シーケンス (MPS) やデジタル PCR (dPCR) などの技術の進歩により、cffDNA の研究を通じて胎児母体 DS の診断を検討できるようになりました。 母体血漿からの遊離 DNA に直接適用するか、または cffDNA 分離ステップの後に、MPS 技術を使用して、いくつかのチームがこの主題について既に発表しています。 これには、サンプルに存在する DNA 断片の配列を決定し、それらを元の染色体に戻すことが含まれます。 21 トリソミーの胎児の場合、21 番染色体の配列が過剰であることを証明しようとします。 これらの手法には、高価な機器 (シーケンサー、バイオインフォマティクス プラットフォーム、サーバー) と技術的な時間と重要な分析 (多くの場合、1 回の実行に数日) が必要です。 デジタル PCR (dPCR) による異数性の研究に関しては、最近まで十分に強力な機器がなかったため、今日の出版物はほとんどありません。 DPCR は安価です。