高リスク患者におけるキシリトール、プロバイオティクス、クロルヘキシジン洗口剤の虫歯予防効果 (AEXPC)

調査の必要性:

世界保健機関は、齲蝕を、硬い歯組織の軟化および空洞の形成への進行を含む極端な起源の局所的で萌出後の病理学的プロセスと定義しています。 このプロセスには、歯の表面に蓄積されたプラークにおける細菌の相互作用が含まれます。 プラーク中のストレプトコッカス・ミュータンスは、他のすべてのう蝕原物質の中で最も一般的に分離される生物です。 スクロースを発酵させ、結果として生じる酸が歯のエナメル質の脱灰を引き起こします。

プラークコントロールの機械的方法は適切な口腔衛生を維持することができますが、そのような方法は集団によって適切に利用されていません. これは、抗歯垢洗口剤の形で、機械的な歯垢制御方法に補助剤を使用することを必要とします。 クロルヘキシジン洗口剤は、ストレプトコッカス・ミュータンスを阻害するのに最も効果的な薬剤と考えられてきました. ゴールドスタンダードと考えられていますが、歯の着色、口腔乾燥症、味覚の変化、口/喉の刺激、抗菌剤耐性などの長期使用による悪影響は、最近の文献で広く研究されている代替品の必要性を示しています.

食品の人工甘味料として使用されるキシリトールは、虫歯の原因とならない砂糖代替品です。 このポリアルコールは口腔細菌によって代謝されないため、虫歯を予防します。 クロルヘキシジンと比較したキシリトールによる悪影響の大きさは不明確です。 虫歯に対するキシリトールチューインガムの効果を評価した研究はありますが、マウスリンスとしての有効性を研究した研究はほとんどありません.

プロバイオティクスは生きた微生物であり、適切な量を投与すると、宿主に健康上の利益をもたらします。 プロバイオティクス製品は、有益なバクテリアに有害なバクテリアから歯や歯茎を守るよう促すことにより、個人の口腔の健康に影響を与えるようです. クロルヘキシジン洗口剤と比較した場合のプロバイオティクスの利点は、共生細菌叢のみを含み、消費による中毒やアレルギーの証拠がないため、抗生物質耐性の問題がないことです.

プロバイオティクスとキシリトール洗口液の抗菌効果は、これまで比較されていません。 若年層と高齢層への影響は比較されていません。 したがって、本研究の目的は、子供と高齢者集団におけるプロバイオティクスとキシリトールの洗口液の抗菌効果をゴールド スタンダード (クロルヘキシジン) と比較することです。

研究の目的:

虫歯のリスクが高い子供と高齢者集団において、プロバイオティクスとキシリトール洗口液の抗菌効果をクロルヘキシジン (ゴールド スタンダード) と比較すること。

研究の目的:

1. 小児および高齢者集団におけるベースライン時および介入から 14 日後の Streptococcus mutans レベルを評価すること。
2. 子供と高齢者のミュータンス連鎖球菌のレベルを下げる 3 つのマウス リンスの有効性を比較します。

材料および方法：

データのソース: 虫歯のリスクが高い 5 ～ 12 歳の寄宿学校の子供たち。 う蝕のリスクが高い老人ホームに住む 60 歳以上の高齢者集団。

研究デザイン：二重盲検無作為対照試験。

サンプルサイズ: 1 グループあたり 12 人の参加者が選ばれます。 2 つの母集団グループ (子供と高齢者) のそれぞれに 3 つの製品が含まれているため、サンプル サイズは 36 人の子供の参加者と 36 人の高齢者の参加者になります。

参加者の同意: 寄宿学校および老人ホームで研究を実施する許可は、関係当局から取得されます。 研究に関する詳細は、研究情報シートの形で参加者に提示されるか、英語と現地語の両方で口頭で伝えられます。 書面による同意を提供する適格な参加者のみが研究に含まれます。 小児の場合は、保護者の書面による同意を得るものとします。

う蝕リスク評価：う蝕リスクの高い個人は、カスタマイズされたう蝕リスク評価ツールを使用して特定されます。 う蝕リスク評価ツールは、社会経済的状況、口腔衛生習慣、フッ化物曝露、家族のう蝕経験、口渇の症状、甘い食べ物の摂取量と頻度、過去と現在のう蝕経験に関する情報で構成されます。 各項目を 0 または 1 で採点し、すべての項目の点数を合計して合計点を求めます。 合計スコアが 5 を超える参加者は、う蝕のリスクが高いと見なされます。

方法：

1. 洗口液の調製 2. ベースライン データの収集と微生物分析 3. 無作為化とグループの割り当て 4. 介入 5. 介入後のデータ収集と微生物分析

1. 洗口剤の調製：

   10％濃度のキシリトール洗口剤を使用します。 プロバイオティクス洗口剤は、市販のプロバイオティクス製品（スポロラック プラス パウダー - 15 億個以上のラクトバチルス アシドフィルス、ラクトバチルス ラムノサス、ビフィドバクテリウム ロンガム、バチルス コアグランス、サッカロマイセス ブラウディ）を含む 1gm の小袋を使用して調製されます。 1包を計量カップで15mlの水に溶かし、洗口液としてお使いいただけます。 １０ｍｌ当たり０．２パーセントのグルコン酸クロルヘキシジンを含有する市販のクロルヘキシジン洗口剤（ヘキシジン－グルコン酸クロルヘキシジン０．２パーセント）を使用する。

2. ベースライン データ収集と微生物分析:

プラークサンプルは、虫歯のない永久上顎第一大臼歯の頬面から採取されます。 プラークの収集は、日光の下でオートクレーブされたスケーラーを使用して行われます。 収集されたプラークは、事前に計量された滅菌エッペンドルフチューブに保存されます。 プラーク採取後、チューブを再度秤量する。 収集されたプラークの重量（グラム単位）は、収集されたプラークを含むチューブの重量から空のエッペンドルフチューブの重量を差し引くことによって決定されます。 サンプルは摂氏-4度で保存され、輸送培地の使用を避けるために1時間以内に培養ラボに輸送されます。

1mlの生理食塩水をエッペンドルフチューブに加え、ボルテックスしてプラークを均一に分布させます。 この混合物は、連続希釈の原液として使用されます。 原液から 100µl を 900µl の生理食塩水を含む滅菌試験管に移し、ボルテックスして 1:10 希釈にします。 同様の希釈液を調製して、1/10、1/100、および 1/1000 希釈液を取得します。 希釈液のそれぞれから50μlを、スプレッドプレート法により選択培地MSB（Mitis Salivarius Bacitracin Agar）にプレーティングする。 播種後、ＭＳＢ（ミティス・サリバリウス・バシトラシン寒天）寒天プレートを嫌気ジャーに入れ、摂氏３７度で７２時間インキュベートする。

Streptococcus mutans のコロニーは、次の形態学的特徴に基づいて識別されます。a) 0.5 mm の隆起した凸状の起伏のあるコロニー b) 縁が粗い水色 c) 粒状のすりガラスの外観。 コロニーは、カタラーゼ試験（陰性カタラーゼ反応）およびグラム染色（グラム陽性球菌）によって確認されます。 細菌コロニーは手動でカウントされます。 コロニー形成単位 (CFU) を決定するための標準的な式は、CFU/g= [コロニー数 X 希釈係数] / [プレート容量 (ml) X プラーク量 (g)] になります。

3. 無作為化とグループ割り当て: ベースラインでのデータ収集後、研究参加者は、単純な無作為抽出 (抽選法) によって、グループ A、B、および C の 3 つのグループに割り当てられます。 グループ A には、クロルヘキシジン洗口剤を投与します。グループ B にはキシリトール洗口液、グループ C にはプロバイオティクス洗口液を与えます。 参加者と研究者は、割り当てシーケンスから盲目になります。

4.介入：参加者は、15mlの洗口剤を使用して、1日1回（夜）2分間口をすすぐように求められます。 介入は14日間行われます。 研究期間中のうがいは、アシスタントによって監督されます。 洗口剤の定期的な使用を文書化し、介入期間中に発生した悪影響を記録するために、記録が維持されます。

5. 介入後のデータ収集: 14 日間洗口液を使用した後、同じ手順を繰り返し、ベースラインと比較します。

統計分析計画: データは、SPSS (社会科学バージョン 22.0 の統計パッケージ; SPSS Incorporated、イリノイ州シカゴ) を使用して分析されます。 対応のある t 検定を使用して、介入前後の比較を行います。 クロルヘキシジン、プロバイオティックおよびキシリトール群間の比較は、ＡＮＯＶＡ（分散分析）およびＴｕｋｅｙの事後検定を使用して行う。 子供と高齢者の間の洗口剤の抗菌効果の比較は、独立したサンプル t 検定を使用して行われます。 統計的有意性は、p ≤ 0.05 に固定されます。