Antikaries effekt av xylitol, probiotika og klorheksidin munnskylling blant individer med høy risiko (AEXPC)

Behov for studiet:

Verdens helseorganisasjon definerer tannkaries som en lokalisert, posteruptiv patologisk prosess av ekstrem opprinnelse som involverer mykgjøring av det harde tannvevet og fortsetter til dannelsen av hulrom. Prosessen involverer bakterielle interaksjoner i plakk akkumulert på overflaten av tennene. Streptococcus mutans i plakk er den mest isolerte organismen blant alle andre kariogener. Det fermenterer sukrose og den resulterende syren forårsaker demineralisering av tannemaljen.

Selv om mekaniske metoder for plakkkontroll kan opprettholde tilstrekkelig munnhygiene, blir slike metoder ikke brukt riktig av befolkningen. Dette nødvendiggjør bruk av tillegg til mekaniske plakkkontrollmetoder i form av munnskylling mot plakk. Klorheksidin munnskylling har blitt ansett som det mest effektive middelet for å hemme Streptococcus mutans. Selv om det betraktes som gullstandarden, indikerer dens uheldige effekter på grunn av langvarig bruk som farging av tenner, xerostomi, endret smaksfølelse, munn-/halsirritasjon, antimikrobiell resistens, etc. behovet for alternativer som har blitt grundig studert i det siste i litteraturen.

Xylitol brukt som et kunstig søtningsmiddel i matvarer, er en ikke-kariogen sukkererstatning. Denne polyalkoholen kan ikke metaboliseres av orale bakterier og forhindrer dermed karies. Omfanget av uønskede effekter forårsaket av xylitol sammenlignet med klorheksidin er utydelig. Selv om studier har vurdert effekten av xylitol tyggegummi på karies, har svært få studert effekten som munnskylling.

Probiotika er levende mikroorganismer som, når de administreres i tilstrekkelige mengder, gir en helsegevinst for verten. Probiotiske produkter ser ut til å ha en effekt på munnhelsen til enkeltpersoner ved å få nyttige bakterier til å forsvare tenner og tannkjøtt mot skadelige. Fordelene med probiotika sammenlignet med klorheksidin munnskylling er at det ikke er noen problemer med antibiotikaresistens, da det bare inneholder kommensal flora og det har ikke vært bevis for beruselse eller allergi ved forbruk.

Antimikrobiell effekt av probiotika og xylitol munnskylling har ikke blitt sammenlignet til dags dato. Effektene deres på den unge og eldre befolkningen har ikke blitt sammenlignet. Derfor er formålet med denne studien å sammenligne den antimikrobielle effekten av probiotiske og xylitol munnskyllinger med gullstandarden (klorheksidin) hos barn og eldre.

Målet med studien:

For å sammenligne den antimikrobielle effekten av probiotiske og xylitol munnskyllinger med klorheksidin (gullstandard) blant barn og eldre med høy risiko for tannkaries.

Mål med studien:

1. For å vurdere Streptococcus mutans-nivåer ved baseline og 14 dager etter intervensjon hos barn og eldre.
2. For å sammenligne effektiviteten til de 3 munnskyllene for å redusere nivåene av Streptococcus mutans hos barn og eldre.

Materialer og metoder:

Datakilde: Skolebarn i alderen 5-12 år med høy risiko for karies. Eldre befolkning over 60 år som bor i aldershjem med høy risiko for karies.

Studiedesign: Dobbeltblind randomisert kontrollert prøveversjon.

Prøvestørrelse: Tolv deltakere vil bli valgt ut per gruppe. Med 3 produkter involvert i hver av de 2 befolkningsgruppene (barn og eldre) vil utvalgsstørrelsen være 36 barndeltakere og 36 eldre deltakere.

Samtykke fra deltakerne: Tillatelse til å gjennomføre studien i boligskolen og aldershjemmet vil bli innhentet fra berørte myndigheter. Detaljer om studien vil bli presentert for deltakerne i form av et studieinformasjonsark eller kommunisert muntlig på både engelsk og det lokale språket. Kun de kvalifiserte deltakerne som gir skriftlig samtykke vil bli inkludert i studien. Ved barn vil det innhentes skriftlig samtykke fra foresatte.

Kariesrisikovurdering: Personer med høy kariesrisiko vil bli identifisert ved hjelp av et tilpasset kariesrisikovurderingsverktøy. Kariesrisikovurderingsverktøyet vil bestå av informasjon om sosioøkonomisk status, munnhygienepraksis, fluoreksponering, karieserfaring blant familiemedlemmer, symptomer på munntørrhet, mengde og hyppighet av inntak av søtet mat og karieserfaring i fortid og nåtid. Hvert element vil bli scoret som 0 eller 1, og den totale poengsummen vil bli oppnådd ved å summere poengsummene til alle elementene. Enhver deltaker med totalscore høyere enn 5 vil anses å ha høy risiko for karies.

Metode:

1. Klargjøring av munnskylling 2. Grunnlinjedatainnsamling og mikrobiell analyse 3. Randomisering og gruppefordeling 4. Intervensjon 5. Innsamling av data etter intervensjon og mikrobiell analyse

1. Klargjøring av munnskylling:

   Xylitol munnskylling med 10 prosent konsentrasjon vil bli brukt. Probiotisk munnskylling vil bli tilberedt ved å bruke et kommersielt tilgjengelig probiotisk produkt (Sporolac Plus pulver- 1g pose som inneholder ikke mindre enn 1,5 milliarder celler av Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus rhamnosus, Bifidobacterium longum, Bacillus coagulans og Saccharomyces boulardiici). Hver pose vil bli oppløst i 15 ml vann i et målebeger og brukes som munnskylling. En kommersielt tilgjengelig klorheksidin munnskylling (heksidin-0,2 prosent klorheksidinglukonat) som inneholder 0,2 prosent klorheksidinglukonat per 10 ml vil bli brukt.

2. Grunnlinjedatainnsamling og mikrobiell analyse:

Plakkprøver vil bli samlet fra den bukkale overflaten av en ikke-karies permanent maxillær første molar. Plakkinnsamling vil gjøres ved hjelp av en autoklavert scaler under dagslys. Den oppsamlede plaketten vil bli lagret i et forhåndsveid sterilt Eppendorf-rør. Rørene vil bli veid igjen etter plakksamling. Vekten av det oppsamlede plakket (i gram) vil bli bestemt ved å trekke fra vekten av det tomme eppendorfrøret fra vekten av røret med det innsamlede plakket. Prøvene vil bli lagret ved -4 grader Celsius og transportert til et kulturlaboratorium innen en time for å unngå bruk av transportmedier.

1 ml saltvann vil bli tilsatt til eppendorf-røret og vortexet for jevn fordeling av plakk. Denne blandingen vil bli brukt som stamløsning for seriefortynninger. Fra stamløsningen vil 100 µl overføres til et sterilt reagensrør som inneholder 900 µl saltvann og virvles for å oppnå en fortynning på 1:10. Lignende fortynninger vil bli tilberedt for å oppnå 1/10, 1/100 og 1/1000 fortynninger. 50 µl fra hver av fortynningene vil bli sådd ut på det selektive mediet MSB (Mitis Salivarius Bacitracin Agar) ved spredeplatemetoden. Etter plating vil MSB (Mitis Salivarius Bacitracin Agar) agarplatene plasseres i den anaerobe krukken og inkuberes ved 37 grader Celsius i 72 timer.

Kolonier av Streptococcus mutans vil bli identifisert basert på følgende morfologiske egenskaper, a) 0,5 mm opphøyde, konvekse bølgende kolonier b) lyseblå farge med grove marginer c) utseende av granulært frostet glass. Koloniene vil bli bekreftet med en katalasetest (negativ katalasereaksjon) og gramfarging (grampositive kokker). Bakteriekolonier vil telles manuelt. Standardformelen for å bestemme kolonidannende enheter (CFU) vil være CFU/g= [Antall kolonier X Fortynningsfaktor] / [Volum belagt (i ml) X Mengde plakk (in g)]

3. Randomisering og gruppetildeling: Etter datainnsamling ved baseline vil studiedeltakerne bli allokert til tre grupper, gruppe A, B og C, ved enkel stikkprøve (lotterimetode). Gruppe A vil bli gitt klorheksidin munnskylling; Gruppe B vil få Xylitol munnskylling og gruppe C probiotisk munnskylling. Deltakerne og etterforskeren vil bli blindet fra tildelingssekvensen.

4. Intervensjon: Deltakerne vil bli bedt om å skylle munnen en gang daglig (om natten) i 2 minutter, med 15 ml munnskylling. Inngrepet gjennomføres i en periode på 14 dager. Munnskylling vil i løpet av studietiden bli overvåket av assistent. En journal vil bli opprettholdt for å dokumentere regelmessig bruk av munnskylling og også for å registrere eventuelle bivirkninger som oppstår under intervensjonsperioden.

5. Innsamling av data etter intervensjon: Etter 14 dager med bruk av munnskylling, vil de samme prosedyrene bli gjentatt og sammenlignet med baseline.

Statistisk analyseplan: Data vil bli analysert ved hjelp av SPSS (Statistical Package for the Social Sciences Version 22.0; SPSS Incorporated, Chicago, Illinois). Sammenligninger før og etter intervensjoner vil bli gjort ved hjelp av Paired t Test. Sammenligninger mellom klorheksidin-, probiotika- og xylitolgrupper vil bli gjort ved å bruke ANOVA (Analysis of Variance) og Tukeys Post Hoc-tester. Sammenligning av antimikrobiell effekt av munnskylling mellom barn og eldre vil bli gjort ved hjelp av uavhengig prøve t-test. Statistisk signifikans vil bli fastsatt til p ≤ 0,05.