Anticaries Effetto di xilitolo, probiotici e risciacqui della bocca clorexidina tra gli individui ad alto rischio (AEXPC)

Necessità dello studio:

L'Organizzazione Mondiale della Sanità definisce la carie dentale come un processo patologico post eruttivo localizzato di origine estrema che comporta il rammollimento del tessuto del dente duro e procede alla formazione della cavità. Il processo prevede interazioni batteriche nella placca accumulata sulla superficie dei denti. Streptococcus mutans nella placca è l'organismo più comunemente isolato tra tutti gli altri cariogeni. Fermenta il saccarosio e l'acido risultante provoca la demineralizzazione dello smalto dei denti.

Sebbene i metodi meccanici di controllo della placca possano mantenere un'adeguata igiene orale, tali metodi non vengono utilizzati in modo appropriato dalla popolazione. Ciò richiede l'uso di aggiunte ai metodi meccanici di controllo della placca sotto forma di collutori antiplacca. Il collutorio alla clorexidina è stato considerato l'agente più efficace nell'inibire lo Streptococcus mutans. Sebbene considerato il gold standard, i suoi effetti avversi dovuti all'uso prolungato come colorazione dei denti, xerostomia, sensazione di gusto alterato, irritazione bocca/gola, resistenza antimicrobica, ecc. indicano la necessità di alternative che sono state ampiamente studiate negli ultimi tempi in letteratura.

Lo xilitolo utilizzato come dolcificante artificiale negli alimenti, è un sostituto dello zucchero non cariogeno. Questo polialcol non può essere metabolizzato dai batteri orali prevenendo così la carie. L'entità degli effetti avversi causati dallo xilitolo rispetto a quella della clorexidina è indistinta. Sebbene gli studi abbiano valutato gli effetti della gomma da masticare allo xilitolo sulla carie, pochissimi hanno studiato la sua efficacia come collutorio.

I probiotici sono microrganismi vivi che, se somministrati in quantità adeguate, conferiscono un beneficio alla salute dell'ospite. I prodotti probiotici sembrano avere un effetto sulla salute orale delle persone spingendo i batteri benefici a difendere denti e gengive da quelli dannosi. I vantaggi dei probiotici rispetto a quelli del collutorio alla clorexidina sono che non ci sono problemi di resistenza agli antibiotici in quanto contiene solo flora commensale e non ci sono prove di intossicazione o allergie al consumo.

L'efficacia antimicrobica dei probiotici e dei collutori allo xilitolo non è stata confrontata fino ad oggi. I loro effetti sulla popolazione giovane e anziana non sono stati confrontati. Quindi lo scopo del presente studio è confrontare l'efficacia antimicrobica dei collutori probiotici e xilitolo con il gold standard (clorexidina) nei bambini e nella popolazione anziana.

Scopo dello studio:

Confrontare l'efficacia antimicrobica di collutori probiotici e xilitolo con clorexidina (gold standard) tra bambini e popolazione anziana ad alto rischio di carie dentale.

Obiettivi dello studio:

1. Per valutare i livelli di Streptococcus mutans al basale e 14 giorni dopo l'intervento nei bambini e nella popolazione anziana.
2. Confrontare l'efficacia dei 3 collutori nel ridurre i livelli di Streptococcus mutans nei bambini e negli anziani.

Materiali e metodi:

Fonte dei dati: bambini delle scuole residenziali di età compresa tra 5 e 12 anni ad alto rischio di carie. Popolazione anziana sopra i 60 anni residente in case di riposo ad alto rischio di carie.

Disegno dello studio: studio controllato randomizzato in doppio cieco.

Dimensione del campione: saranno scelti dodici partecipanti per gruppo. Con 3 prodotti coinvolti in ciascuno dei 2 gruppi di popolazione (bambini e anziani) la dimensione del campione sarà di 36 partecipanti bambini e 36 partecipanti anziani.

Consenso dei partecipanti: Il permesso di condurre lo studio nella scuola residenziale e nella casa di riposo sarà ottenuto dalle autorità interessate. I dettagli sullo studio saranno presentati ai partecipanti sotto forma di un foglio informativo sullo studio o comunicati verbalmente sia in inglese che nella lingua locale. Solo i partecipanti idonei che forniscono il consenso scritto saranno inclusi nello studio. In caso di bambini, il consenso scritto sarà ottenuto dai tutori.

Valutazione del rischio di carie: gli individui ad alto rischio di carie saranno identificati utilizzando uno strumento di valutazione del rischio di carie personalizzato. Lo strumento di valutazione del rischio di carie comprenderà informazioni sullo stato socio-economico, pratiche di igiene orale, esposizione al fluoro, esperienza di carie tra i membri della famiglia, sintomi di secchezza delle fauci, quantità e frequenza di assunzione di alimenti zuccherati ed esperienza di carie nel passato e nel presente. Ad ogni item verrà attribuito un punteggio di 0 o 1 e il punteggio totale sarà ottenuto sommando i punteggi di tutti gli item. Qualsiasi partecipante con punteggio totale superiore a 5 sarà considerato ad alto rischio di carie.

Metodo:

1. Preparazione di collutori 2. Raccolta dati di base e analisi microbica 3. Randomizzazione e assegnazione di gruppo 4. Intervento 5. Raccolta dati post intervento e analisi microbica

1. Preparazione di collutori:

   Verrà utilizzato il collutorio con xilitolo alla concentrazione del 10%. Il collutorio probiotico sarà preparato utilizzando un prodotto probiotico disponibile in commercio (Polvere Sporolac Plus - bustina da 1 g contenente non meno di 1,5 miliardi di cellule di Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus rhamnosus, Bifidobacterium longum, Bacillus coagulans e Saccharomyces boulardii). Ogni bustina verrà sciolta in 15 ml di acqua in un misurino e verrà utilizzata come collutorio. Verrà utilizzato un collutorio alla clorexidina disponibile in commercio (Hexidine- 0,2% di clorexidina gluconato) contenente lo 0,2% di clorexidina gluconato per 10 ml.

2. Raccolta dei dati di base e analisi microbica:

I campioni di placca saranno prelevati dalla superficie vestibolare di un primo molare mascellare permanente non cariato. La raccolta della placca verrà effettuata utilizzando un ablatore autoclavato alla luce del giorno. La placca raccolta verrà conservata in una provetta eppendorf sterile pre-pesata. Le provette verranno nuovamente pesate dopo la raccolta della placca. Il peso della placca raccolta (in grammi) sarà determinato sottraendo il peso della provetta eppendorf vuota dal peso della provetta con la placca raccolta. I campioni saranno conservati a -4 gradi Celsius e trasportati in un laboratorio di coltura entro un'ora per evitare l'uso di mezzi di trasporto.

1 ml di soluzione salina verrà aggiunto alla provetta eppendorf e vortexato per una distribuzione uniforme della placca. Questa miscela verrà utilizzata come soluzione madre per diluizioni seriali. Dalla soluzione madre, 100µl saranno trasferiti in una provetta sterile contenente 900µl di soluzione salina e vortexati per arrivare alla diluizione 1:10. Analoghe diluizioni saranno preparate per ottenere diluizioni 1/10, 1/100 e 1/1000. 50µl di ciascuna delle diluizioni saranno seminati sul terreno selettivo MSB (Mitis Salivarius Bacitracin Agar) mediante il metodo della piastra di diffusione. Dopo la piastratura, le piastre di agar MSB (Mitis Salivarius Bacitracin Agar) saranno poste nel vaso anaerobico e incubate a 37 gradi Celsius per 72 ore.

Le colonie di Streptococcus mutans saranno identificate in base alle seguenti caratteristiche morfologiche, a) colonie ondulate convesse rialzate di 0,5 mm b) colore azzurro con margini ruvidi c) aspetto vetroso granulare smerigliato. Le colonie saranno confermate da un test della catalasi (reazione catalasi negativa) e colorazione di Gram (cocchi gram positivi). Le colonie batteriche saranno contate manualmente. La formula standard per la determinazione delle unità formanti colonia (CFU) sarà CFU/g= [Numero di colonie X Fattore di diluizione] / [Volume placcato (in ml) X Quantità di placca (in g)]

3. Randomizzazione e assegnazione di gruppo: dopo la raccolta dei dati al basale, i partecipanti allo studio saranno assegnati a tre gruppi, Gruppo A, B e C, mediante campionamento casuale semplice (metodo della lotteria). Il gruppo A riceverà il collutorio alla clorexidina; Il gruppo B riceverà il risciacquo della bocca con xilitolo e il risciacquo della bocca probiotico del gruppo C. I partecipanti e l'investigatore saranno accecati dalla sequenza di assegnazione.

4. Intervento: ai partecipanti verrà chiesto di sciacquarsi la bocca una volta al giorno (di notte) per 2 minuti, utilizzando 15 ml di collutorio. L'intervento sarà effettuato per un periodo di 14 giorni. Il risciacquo della bocca sarà supervisionato durante il periodo di studio da un assistente. Verrà mantenuto un registro per documentare l'uso regolare del collutorio e anche per registrare eventuali effetti avversi che si verificano durante il periodo di intervento.

5. Raccolta dei dati post-intervento: dopo 14 giorni di utilizzo del collutorio, le stesse procedure verranno ripetute e confrontate con il basale.

Piano di analisi statistica: i dati saranno analizzati utilizzando SPSS (Statistical Package for the Social Sciences Version 22.0; SPSS Incorporated, Chicago, Illinois). I confronti prima e dopo gli interventi saranno effettuati utilizzando il test t accoppiato. I confronti tra clorexidina, gruppi probiotici e xilitolo saranno effettuati utilizzando ANOVA (Analysis of Variance) e Tukey's Post Hoc Tests. Il confronto dell'efficacia antimicrobica dei collutori tra bambini e anziani sarà effettuato utilizzando il test t del campione indipendente. La significatività statistica sarà fissata a p ≤ 0,05.