Przeciwpróchniczy wpływ płynów do płukania ust z ksylitolem, probiotykami i chlorheksydyną wśród osób z grupy wysokiego ryzyka (AEXPC)

Potrzeba do badania:

Światowa Organizacja Zdrowia definiuje próchnicę jako miejscowy, pozaerupcyjny proces patologiczny o skrajnym pochodzeniu, polegający na rozmiękaniu twardych tkanek zęba i przejściu do powstania ubytku. Proces polega na interakcji bakterii w płytce nazębnej nagromadzonej na powierzchni zębów. Streptococcus mutans w płytce nazębnej jest najczęściej izolowanym organizmem spośród wszystkich innych próchnicotwórczych. Fermentuje sacharozę, a powstały kwas powoduje demineralizację szkliwa zębów.

Chociaż mechaniczne metody kontroli płytki nazębnej mogą zapewnić odpowiednią higienę jamy ustnej, metody te nie są odpowiednio stosowane przez populację. Powoduje to konieczność stosowania środków wspomagających mechaniczne metody zwalczania płytki nazębnej w postaci płukanek do ust przeciwdziałających powstawaniu płytki nazębnej. Płukanka do ust z chlorheksydyną została uznana za najskuteczniejszy środek hamujący Streptococcus mutans. Chociaż uważa się go za złoty standard, jego działania niepożądane spowodowane długotrwałym stosowaniem, takie jak przebarwienie zębów, kserostomia, zmiana odczuwania smaku, podrażnienie jamy ustnej/gardła, oporność na środki przeciwdrobnoustrojowe itp. wskazują na potrzebę alternatywnych rozwiązań, które były szeroko badane w późnej literaturze.

Ksylitol stosowany jako sztuczny słodzik w żywności, jest niepróchnicotwórczym zamiennikiem cukru. Ten polialkohol nie może być metabolizowany przez bakterie jamy ustnej, zapobiegając w ten sposób próchnicy. Skala działań niepożądanych powodowanych przez ksylitol w porównaniu z chlorheksydyną jest niewyraźna. Chociaż w badaniach oceniano wpływ gumy do żucia z ksylitolem na próchnicę, bardzo niewiele osób badało jej skuteczność jako płynu do płukania jamy ustnej.

Probiotyki to żywe mikroorganizmy, które podane w odpowiednich ilościach przynoszą korzyści zdrowotne gospodarzowi. Wydaje się, że produkty probiotyczne mają wpływ na zdrowie jamy ustnej osób, pobudzając pożyteczne bakterie do obrony zębów i dziąseł przed szkodliwymi. Zaletą probiotyków w porównaniu z płynami do płukania jamy ustnej z chlorheksydyną jest to, że nie ma problemów z opornością na antybiotyki, ponieważ zawiera tylko florę komensalną i nie ma dowodów na zatrucie lub alergie po spożyciu.

Skuteczność przeciwdrobnoustrojowa probiotyków i płynów do płukania jamy ustnej z ksylitolem nie była do tej pory porównywana. Nie porównano ich wpływu na populację młodą i starszą. Stąd celem niniejszego badania jest porównanie skuteczności przeciwbakteryjnej płukanek do ust zawierających probiotyk i ksylitol ze złotym standardem (chlorheksydyną) u dzieci i osób starszych.

Cel badania:

Porównanie skuteczności przeciwbakteryjnej probiotycznych i ksylitolowych płynów do płukania jamy ustnej z chlorheksydyną (złoty standard) wśród dzieci i osób starszych z grupy wysokiego ryzyka próchnicy.

Cele badania:

1. Ocena poziomu Streptococcus mutans na początku badania i 14 dni po interwencji u dzieci i osób w podeszłym wieku.
2. Porównanie skuteczności 3 płukanek do ust w zmniejszaniu poziomu Streptococcus mutans u dzieci i osób starszych.

Materiały i metody:

Źródło danych: Dzieci ze szkół stacjonarnych w wieku 5-12 lat z grupy wysokiego ryzyka próchnicy. Osoby w podeszłym wieku powyżej 60 roku życia przebywające w domach spokojnej starości o wysokim ryzyku próchnicy.

Projekt badania: podwójnie ślepa, randomizowana, kontrolowana próba.

Wielkość próby: Z każdej grupy zostanie wybranych dwunastu uczestników. Przy użyciu 3 produktów w każdej z 2 grup populacji (dzieci i osoby starsze) wielkość próby wyniesie 36 dzieci i 36 osób starszych.

Zgoda uczestników: Zgoda na przeprowadzenie badania w szkole z internatem i domu spokojnej starości zostanie uzyskana od właściwych władz. Szczegóły dotyczące badania zostaną przedstawione uczestnikom w formie arkusza informacyjnego badania lub przekazane ustnie zarówno w języku angielskim, jak iw języku lokalnym. Tylko kwalifikujący się uczestnicy, którzy wyrażą pisemną zgodę, zostaną włączeni do badania. W przypadku dzieci wymagana jest pisemna zgoda opiekunów.

Ocena ryzyka próchnicy: Osoby o wysokim ryzyku próchnicy zostaną zidentyfikowane za pomocą dostosowanego narzędzia do oceny ryzyka próchnicy. Narzędzie do oceny ryzyka próchnicy będzie zawierało informacje na temat statusu społeczno-ekonomicznego, praktyk higieny jamy ustnej, narażenia na fluor, doświadczenia próchnicy wśród członków rodziny, objawów suchości w jamie ustnej, ilości i częstotliwości spożywania słodzonych pokarmów oraz doświadczenia próchnicy w przeszłości i obecnie. Każda pozycja zostanie oceniona jako 0 lub 1, a całkowity wynik zostanie uzyskany poprzez zsumowanie wyników wszystkich pozycji. Każdy uczestnik z łączną punktacją większą niż 5 zostanie uznany za osobę o wysokim ryzyku wystąpienia próchnicy.

Metoda:

1. Przygotowanie płynów do płukania jamy ustnej 2. Zbieranie danych wyjściowych i analiza mikrobiologiczna 3. Randomizacja i przydział do grup 4. Interwencja 5. Zbieranie danych po interwencji i analiza mikrobiologiczna

1. Przygotowanie płukanek do ust:

   Stosowany będzie płyn do płukania jamy ustnej z ksylitolem w stężeniu 10%. Probiotyczny płyn do płukania jamy ustnej zostanie przygotowany z wykorzystaniem dostępnego na rynku produktu probiotycznego (proszek Sporolac Plus - saszetka 1g zawierająca nie mniej niż 1,5 miliarda komórek Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus rhamnosus, Bifidobacterium longum, Bacillus coagulans i Saccharomyces boulardii). Każda saszetka zostanie rozpuszczona w 15 ml wody w miarce i będzie używana jako płukanka do ust. Stosowany będzie dostępny w handlu płyn do płukania ust z chlorheksydyną (heksydyna - 0,2% glukonianu chlorheksydyny) zawierający 0,2% glukonianu chlorheksydyny na 10 ml.

2. Zbieranie danych wyjściowych i analiza mikrobiologiczna:

Próbki płytki nazębnej zostaną pobrane z policzkowej powierzchni niepróchnicowego stałego pierwszego trzonowca szczęki. Pobranie płytki nazębnej zostanie wykonane przy użyciu autoklawowanego skalera w świetle dziennym. Zebrana łysinka będzie przechowywana w uprzednio zważonej sterylnej probówce Eppendorfa. Probówki zostaną ponownie zważone po pobraniu płytki nazębnej. Masa pobranej płytki (w gramach) zostanie określona przez odjęcie masy pustej probówki Eppendorfa od masy probówki z pobraną płytką. Próbki będą przechowywane w temperaturze -4 stopni Celsjusza i przetransportowane do laboratorium hodowlanego w ciągu godziny, aby uniknąć użycia pożywek transportowych.

Do probówki Eppendorfa zostanie dodany 1 ml soli fizjologicznej i worteksowany w celu równomiernego rozprowadzenia płytki nazębnej. Ta mieszanina będzie używana jako roztwór podstawowy do rozcieńczeń seryjnych. Z roztworu podstawowego 100 µl zostanie przeniesione do sterylnej probówki zawierającej 900 µl soli fizjologicznej i worteksowane do uzyskania rozcieńczenia 1:10. Podobne rozcieńczenia zostaną przygotowane w celu uzyskania rozcieńczeń 1/10, 1/100 i 1/1000. 50 µl z każdego rozcieńczenia zostanie wysiane na selektywną pożywkę MSB (Mitis Salivarius Bacitracin Agar) metodą posiewu na płytce. Po wysianiu płytki z agarem MSB (Mitis Salivarius Bacitracin Agar) zostaną umieszczone w naczyniu beztlenowym i inkubowane w temperaturze 37 stopni Celsjusza przez 72 godziny.

Kolonie Streptococcus mutans będą identyfikowane na podstawie następujących cech morfologicznych: a) wypukłe, faliste kolonie o wysokości 0,5 mm b) jasnoniebieski kolor z nierównymi brzegami c) wygląd ziarnistego matowego szkła. Kolonie zostaną potwierdzone testem katalazy (ujemna reakcja katalazy) i barwieniem metodą Grama (ziarniaki Gram-dodatnie). Kolonie bakteryjne będą liczone ręcznie. Standardowa formuła do oznaczania jednostek tworzących kolonie (CFU) to CFU/g= [Liczba kolonii X Współczynnik rozcieńczenia] / [Objętość posiewu (w ml) X Ilość płytki nazębnej (w g)]

3. Randomizacja i przydział do grup: Po zebraniu danych na początku badania uczestnicy badania zostaną przydzieleni do trzech grup, grupy A, B i C, poprzez proste losowanie (metoda loterii). Grupa A otrzyma płukankę do ust z chlorheksydyną; Grupa B otrzyma płyn do płukania ust z ksylitolem i płyn do płukania ust z grupy C z probiotykiem. Uczestnicy i badacz zostaną zaślepieni z sekwencji alokacji.

4. Interwencja: Uczestnicy będą proszeni o płukanie ust raz dziennie (na noc) przez 2 minuty, używając 15 ml płynu do płukania ust. Interwencja będzie prowadzona przez okres 14 dni. Płukanie ust będzie nadzorowane w okresie nauki przez asystenta. Prowadzony będzie rejestr w celu udokumentowania regularnego stosowania płukanki do ust, a także odnotowania wszelkich działań niepożądanych występujących w okresie interwencji.

5. Zbieranie danych po interwencji: Po 14 dniach stosowania płukanek te same procedury zostaną powtórzone i porównane z wartościami wyjściowymi.

Plan analizy statystycznej: Dane zostaną przeanalizowane przy użyciu SPSS (Pakiet Statystyczny dla Nauk Społecznych, wersja 22.0; SPSS Incorporated, Chicago, Illinois). Porównania przed i po interwencjach zostaną przeprowadzone za pomocą testu t dla par. Porównania między grupami chlorheksydyny, probiotyku i ksylitolu zostaną wykonane przy użyciu ANOVA (Analiza wariancji) i testów post hoc Tukeya. Porównanie skuteczności przeciwdrobnoustrojowej płynów do płukania jamy ustnej u dzieci i osób starszych zostanie przeprowadzone przy użyciu testu niezależnej próbki t. Istotność statystyczna zostanie ustalona na poziomie p ≤ 0,05.