Efeito anticárie de enxaguatórios bucais com xilitol, probiótico e clorexidina entre indivíduos de alto risco (AEXPC)

Necessidade para o estudo:

A Organização Mundial de Saúde define a cárie dentária como um processo patológico localizado, pós-eruptivo, de origem extrema, envolvendo o amolecimento do tecido duro do dente e prosseguindo para a formação de cárie. O processo envolve interações bacterianas na placa acumulada na superfície dos dentes. Streptococcus mutans na placa é o organismo mais comumente isolado entre todos os outros cariogênicos. Ele fermenta a sacarose e o ácido resultante causa a desmineralização do esmalte dentário.

Embora os métodos mecânicos de controle de placa possam manter uma higiene bucal adequada, esses métodos não estão sendo utilizados adequadamente pela população. Isso requer o uso de adjuvantes para métodos mecânicos de controle de placa na forma de enxaguatórios bucais antiplaca. O enxaguante bucal com clorexidina tem sido considerado o agente mais eficaz na inibição de Streptococcus mutans. Embora considerado o padrão-ouro, seus efeitos adversos devido ao uso prolongado, como manchas nos dentes, xerostomia, sensação de paladar alterado, irritação na boca/garganta, resistência antimicrobiana, etc. indicam a necessidade de alternativas que têm sido extensivamente estudadas ultimamente na literatura.

O xilitol, usado como adoçante artificial em alimentos, é um substituto não cariogênico do açúcar. Este poliálcool não pode ser metabolizado pelas bactérias orais, evitando assim a cárie. A magnitude dos efeitos adversos causados ​​pelo xilitol em comparação com a clorexidina é indistinta. Embora os estudos tenham avaliado os efeitos da goma de mascar com xilitol na cárie, muito poucos estudaram sua eficácia como enxaguante bucal.

Os probióticos são microrganismos vivos que, quando administrados em quantidades adequadas, conferem benefício à saúde do hospedeiro. Os produtos probióticos parecem ter um efeito na saúde bucal dos indivíduos, estimulando as bactérias benéficas a defender os dentes e as gengivas contra as nocivas. As vantagens dos probióticos em relação ao enxaguante bucal com clorexidina são que não há problemas de resistência a antibióticos, pois contém apenas flora comensal e não há comprovação de intoxicação ou alergia no consumo.

A eficácia antimicrobiana de probióticos e enxaguatórios bucais com xilitol não foi comparada até o momento. Seus efeitos na população jovem e idosa não foram comparados. Portanto, o objetivo do presente estudo é comparar a eficácia antimicrobiana de enxaguatórios bucais probióticos e xilitol com o padrão-ouro (clorexidina) em crianças e população idosa.

Objetivo do estudo:

Comparar a eficácia antimicrobiana de enxaguatórios bucais probióticos e xilitol com clorexidina (padrão ouro) entre crianças e idosos com alto risco para cárie dentária.

Objetivos do estudo:

1. Avaliar os níveis de Streptococcus mutans no início e 14 dias após a intervenção em crianças e idosos.
2. Comparar a eficácia dos 3 enxaguatórios bucais na redução dos níveis de Streptococcus mutans em crianças e idosos.

Materiais e métodos:

Fonte dos dados: Crianças em idade escolar de 5 a 12 anos com alto risco de cárie. População idosa acima de 60 anos residente em asilos com alto risco para cárie.

Desenho do Estudo: Ensaio Duplo-Cego Randomizado Controlado.

Tamanho da amostra: Serão escolhidos doze participantes por grupo. Com 3 produtos envolvidos em cada um dos 2 grupos populacionais (crianças e idosos) o tamanho da amostra será de 36 participantes crianças e 36 participantes idosos.

Consentimento dos participantes: A permissão para conduzir o estudo na escola residencial e no lar de idosos será obtida das autoridades competentes. Os detalhes sobre o estudo serão apresentados aos participantes na forma de uma folha de informações do estudo ou comunicados verbalmente em inglês e no idioma local. Somente os participantes elegíveis que fornecerem consentimento por escrito serão incluídos no estudo. No caso de crianças, será obtido o consentimento por escrito dos responsáveis.

Avaliação de risco de cárie: Os indivíduos com alto risco de cárie serão identificados usando uma ferramenta personalizada de avaliação de risco de cárie. A ferramenta de avaliação de risco de cárie incluirá informações sobre status socioeconômico, práticas de higiene bucal, exposição ao flúor, experiência de cárie entre os membros da família, sintomas de boca seca, quantidade e frequência de ingestão de alimentos açucarados e experiência de cárie no passado e no presente. Cada item será pontuado como 0 ou 1 e a pontuação total será obtida pela soma das pontuações de todos os itens. Qualquer participante com pontuação total maior que 5 será considerado de alto risco para cárie.

Método:

1. Preparação de enxaguatórios bucais 2. Coleta de dados de linha de base e análise microbiana 3. Randomização e alocação de grupos 4. Intervenção 5. Coleta de dados pós-intervenção e análise microbiana

1. Preparação de enxaguatórios bucais:

   Será utilizado enxaguatório bucal com xilitol na concentração de 10%. O enxaguante bucal probiótico será preparado usando um produto probiótico disponível comercialmente (Sporolac Plus em pó - sachê de 1g contendo não menos que 1,5 bilhão de células de Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus rhamnosus, Bifidobacterium longum, Bacillus coagulans e Saccharomyces boulardii). Cada sachê será dissolvido em 15 ml de água em um copo medidor e será utilizado como enxaguante bucal. Será usado um enxaguatório bucal de clorexidina disponível comercialmente (hexidina-0,2 por cento de gluconato de clorexidina) contendo 0,2 por cento de gluconato de clorexidina por 10 ml.

2. Coleta de dados de linha de base e análise microbiana:

Amostras de placa serão coletadas da superfície vestibular de um primeiro molar superior permanente não cariado. A coleta de placa será feita usando um desincrustante autoclavado à luz do dia. A placa coletada será armazenada em um tubo eppendorf estéril pré-pesado. Os tubos serão pesados ​​novamente após a coleta da placa. O peso da placa coletada (em gramas) será determinado subtraindo o peso do tubo eppendorf vazio do peso do tubo com a placa coletada. As amostras serão armazenadas a -4 graus Celsius e transportadas para um laboratório de cultura dentro de uma hora para evitar o uso de meios de transporte.

1 ml de solução salina será adicionado ao tubo eppendorf e agitado no vórtex para distribuição uniforme da placa. Esta mistura será utilizada como solução estoque para diluições seriadas. Da solução estoque, 100µl serão transferidos para um tubo de ensaio estéril contendo 900µl de soro fisiológico e agitados no vórtex para chegar à diluição 1:10. Diluições semelhantes serão preparadas para obter diluições 1/10, 1/100 e 1/1000. 50µl de cada uma das diluições serão semeados no meio seletivo MSB (Mitis Salivarius Bacitracin Agar) pelo método de propagação em placas. Após o plaqueamento, as placas de ágar MSB (Mitis Salivarius Bacitracin Agar) serão colocadas no frasco anaeróbico e incubadas a 37 graus Celsius por 72 horas.

As colônias de Streptococcus mutans serão identificadas com base nas seguintes características morfológicas: a) colônias onduladas convexas elevadas de 0,5 mm b) cor azul clara com margens ásperas c) aparência granular de vidro fosco. As colônias serão confirmadas pelo teste da catalase (reação da catalase negativa) e coloração de Gram (cocos gram positivos). As colônias bacterianas serão contadas manualmente. A fórmula padrão para determinar as Unidades Formadoras de Colônias (UFC) será UFC/g= [Número de colônias X Fator de diluição] / [Volume plaqueado (em ml) X Quantidade de placa (em g)]

3. Randomização e alocação dos grupos: Após a coleta de dados na linha de base, os participantes do estudo serão alocados em três grupos, Grupo A, B e C, por amostragem aleatória simples (método de sorteio). O grupo A receberá enxaguante bucal com clorexidina; O grupo B receberá enxaguante bucal com xilitol e o grupo C com enxaguante bucal probiótico. Os participantes e o investigador serão cegos quanto à sequência de alocação.

4. Intervenção: Será solicitado aos participantes que enxaguem a boca uma vez ao dia (à noite) por 2 minutos, utilizando 15 ml de enxaguante bucal. A intervenção será realizada por um período de 14 dias. O enxágue bucal será supervisionado durante o período de estudo por um assistente. Um registro será mantido para documentar o uso regular do enxaguatório bucal e também para registrar quaisquer efeitos adversos ocorridos durante o período de intervenção.

5. Coleta de dados pós-intervenção: Após 14 dias de uso dos enxaguatórios bucais, os mesmos procedimentos serão repetidos e comparados com a linha de base.

Plano de Análise Estatística: Os dados serão analisados ​​usando SPSS (Pacote Estatístico para Ciências Sociais Versão 22.0; SPSS Incorporated, Chicago, Illinois). As comparações antes e depois das intervenções serão feitas usando o teste t pareado. As comparações entre os grupos Clorexidina, probiótico e xilitol serão feitas por meio de ANOVA (Análise de Variância) e Testes Post Hoc de Tukey. A comparação da eficácia antimicrobiana dos enxaguatórios bucais entre crianças e idosos será feita por meio do Teste t de amostras independentes. A significância estatística será fixada em p ≤ 0,05.