Ksylitolin, probiootin ja klooriheksidiinin suuhuuhtelujen kariesvaikutus suuren riskin keskuudessa (AEXPC)

Tutkimuksen tarve:

Maailman terveysjärjestö WHO määrittelee hammaskarieksen paikalliseksi, eruption jälkeiseksi äärimmäisen alkuperältään patologiseksi prosessiksi, johon liittyy kovan hammaskudoksen pehmeneminen ja ontelon muodostuminen. Prosessi sisältää bakteerien vuorovaikutusta hampaiden pinnalle kertyneessä plakissa. Plakin Streptococcus mutans on yleisimmin eristetty organismi kaikkien muiden kariogeenien joukossa. Se fermentoi sakkaroosia ja tuloksena oleva happo aiheuttaa hammaskiilteen demineralisaatiota.

Vaikka mekaanisilla plakintorjuntamenetelmillä voidaan ylläpitää riittävää suuhygieniaa, väestö ei käytä tällaisia ​​menetelmiä asianmukaisesti. Tämä edellyttää mekaanisten plakintorjuntamenetelmien lisäaineiden käyttöä plakinvastaisten suuhuuhteluaineiden muodossa. Klooriheksidiini-suuvettä on pidetty tehokkaimpana aineena Streptococcus mutansin estämisessä. Vaikka sitä pidetäänkin kultaisena standardina, sen pitkäaikaisesta käytöstä johtuvat haitalliset vaikutukset, kuten hampaiden värjäytyminen, kserostomia, muuttunut makuaisti, suun/kurkun ärsytys, mikrobilääkeresistenssi jne., osoittavat, että tarvitaan vaihtoehtoja, joita on tutkittu laajasti viime aikoina kirjallisuudessa.

Ksylitoli, jota käytetään elintarvikkeissa keinotekoisena makeutusaineena, on ei-kariogeeninen sokerinkorvike. Suun bakteerit eivät pysty metaboloimaan tätä polyalkoholia, mikä estää kariesta. Ksylitolin aiheuttamien haittavaikutusten suuruus verrattuna klooriheksidiiniin on epäselvä. Vaikka tutkimuksissa on arvioitu ksylitolipurukumin vaikutuksia kariekseen, vain harvat ovat tutkineet sen tehoa suuhuuhteluaineena.

Probiootit ovat eläviä mikro-organismeja, jotka riittävinä määrinä antavat terveydellistä hyötyä isännälle. Probioottiset tuotteet näyttävät vaikuttavan yksilöiden suun terveyteen kannustamalla hyödyllisiä bakteereja suojaamaan hampaita ja ikeniä haitallisilta. Probioottien edut verrattuna klooriheksidiinisuuveteen ovat se, että antibioottiresistenssiin ei liity ongelmia, sillä se sisältää vain kommensaalista kasvistoa, eikä päihtymästä tai allergioista ole näyttöä kulutuksen yhteydessä.

Probioottien ja ksylitolisuuhuuhteluaineiden antimikrobista tehoa ei ole verrattu tähän mennessä. Niiden vaikutuksia nuoriin ja vanhuksiin ei ole verrattu. Tästä syystä tämän tutkimuksen tarkoituksena on verrata probioottisten ja ksylitolisuuhuuhteluaineiden antimikrobista tehokkuutta kultastandardiin (klooriheksidiini) lapsilla ja vanhuksilla.

Tutkimuksen tavoite:

Vertaa probioottisten ja ksylitolisuuhuuhteiden antimikrobista tehoa klooriheksidiiniin (kultastandardi) lapsilla ja vanhuksilla, joilla on suuri hammaskarieksen riski.

Tutkimuksen tavoitteet:

1. Streptococcus mutans -tasojen arvioiminen lähtötilanteessa ja 14 päivää toimenpiteen jälkeen lapsilla ja vanhuksilla.
2. Vertaamaan kolmen suuhuuhtelun tehokkuutta Streptococcus mutans -tasojen vähentämisessä lapsilla ja vanhuksilla.

Materiaalit ja menetelmät:

Tietojen lähde: 5-12-vuotiaat asuinkoululaiset, joilla on suuri kariesriski. Yli 60-vuotias iäkäs väestö, joka asuu vanhainkodissa, jossa on suuri kariesriski.

Tutkimussuunnitelma: Double Blind Randomized Controlled Trial.

Näytteen koko: Ryhmään valitaan 12 osallistujaa. Kun kussakin kahdessa väestöryhmässä (lapset ja vanhukset) on mukana 3 tuotetta, otoskoko on 36 lapsiosallistujaa ja 36 iäkkäämpää osallistujaa.

Osallistujien suostumus: Lupa tutkimuksen suorittamiseen asuinkoulussa ja vanhainkodissa hankitaan asianomaisilta viranomaisilta. Tiedot tutkimuksesta esitetään osallistujille tutkimustietolomakkeen muodossa tai välitetään suullisesti sekä englanniksi että paikallisella kielellä. Vain kelvolliset osallistujat, jotka antavat kirjallisen suostumuksen, otetaan mukaan tutkimukseen. Jos kyseessä on lapsi, kirjallinen suostumus hankitaan huoltajilta.

Kariesriskin arviointi: Henkilöt, joilla on korkea kariesriski, tunnistetaan räätälöidyn kariesriskin arviointityökalun avulla. Kariesriskin arviointityökalu sisältää tietoa sosioekonomisesta asemasta, suuhygieniakäytännöistä, fluoridille altistumisesta, perheenjäsenten karieskokemuksista, suun kuivumisen oireista, makeutetun ruoan määrästä ja käyttötiheydestä sekä karieskokemuksista menneisyydessä ja nykyisyydessä. Jokainen kohde pisteytetään 0 tai 1 ja kokonaispistemäärä saadaan laskemalla yhteen kaikkien kohteiden pisteet. Jokaisen osallistujan, jonka kokonaispistemäärä on yli 5, katsotaan olevan korkea kariesriski.

Menetelmä:

1. Suuhuuhteluaineiden valmistelu 2. Perustietojen kerääminen ja mikrobianalyysi 3. Satunnaistaminen ja ryhmien jakaminen 4. Interventio 5. Interventiotietojen kerääminen ja mikrobianalyysi

1. Suuhuuhteluaineiden valmistus:

   Ksylitolisuuhuuhtelua käytetään 10 prosentin pitoisuudella. Probioottinen suuvesi valmistetaan käyttämällä kaupallisesti saatavaa probioottista tuotetta (Sporolac Plus -jauhe - 1 gramman pussi, joka sisältää vähintään 1,5 miljardia Lactobacillus acidophilus-, Lactobacillus rhamnosus-, Bifidobacterium longum-, Bacillus coagulans- ja Saccharomyces boulardii -solua). Jokainen pussi liuotetaan 15 ml:aan vettä mittakupissa ja sitä käytetään suuhuuhteluaineena. Käytetään kaupallisesti saatavaa klooriheksidiini-suuvettä (heksidiini-0,2 % klooriheksidiiniglukonaattia), joka sisältää 0,2 % klooriheksidiiniglukonaattia 10 ml:ssa.

2. Perustietojen kerääminen ja mikrobianalyysi:

Plakkinäytteet otetaan ei-karioosisen pysyvän yläleuan ensimmäisen poskihampaan poskipinnalta. Plakin keräys tehdään autoklavoidulla skaalalla päivänvalossa. Kerätty plakki säilytetään esipunnittuun steriiliin eppendorf-putkeen. Putket punnitaan uudelleen plakin keräämisen jälkeen. Kerätyn plakin paino (grammoina) määritetään vähentämällä tyhjän eppendorf-putken paino kerätyn plakin sisältävän putken painosta. Näytteet säilytetään -4 celsiusasteessa ja kuljetetaan viljelylaboratorioon tunnin sisällä kuljetusväliaineen käytön välttämiseksi.

1 ml suolaliuosta lisätään eppendorf-putkeen ja vorteksoidaan plakin tasaiseksi jakautumiseksi. Tätä seosta käytetään perusliuoksena sarjalaimennoksissa. Varastoliuoksesta 100 µl siirretään steriiliin koeputkeen, joka sisältää 900 µl suolaliuosta, ja vorteksoidaan 1:10 laimennukseen. Samanlaiset laimennokset valmistetaan 1/10-, 1/100- ja 1/1000-laimennosten saamiseksi. 50 µl kustakin laimennoksesta maljataan selektiiviselle alustalle MSB (Mitis Salivarius Bacitracin Agar) levityslevymenetelmällä. Maljauksen jälkeen MSB-agarmaljat (Mitis Salivarius Bacitracin Agar) asetetaan anaerobiseen astiaan ja niitä inkuboidaan 37 celsiusasteessa 72 tuntia.

Streptococcus mutansin pesäkkeet tunnistetaan seuraavien morfologisten ominaisuuksien perusteella: a) 0,5 mm kohonneet kuperat aaltoilevat pesäkkeet b) vaaleansininen väri karkeilla reunoilla c) rakeinen himmeä lasi. Pesäkkeet varmistetaan katalaasitestillä (negatiivinen katalaasireaktio) ja gramvärjäyksellä (grampositiiviset kokit). Bakteeripesäkkeet lasketaan manuaalisesti. Vakiokaava pesäkkeitä muodostavien yksiköiden (CFU) määrittämiseksi on CFU/g = [pesäkkeiden lukumäärä X laimennuskerroin] / [maljattu tilavuus (ml) X plakin määrä (g)]

3. Satunnaistaminen ja ryhmien jakaminen: Lähtötilanteen tiedonkeruun jälkeen tutkimuksen osallistujat jaetaan kolmeen ryhmään, ryhmään A, B ja C, yksinkertaisella satunnaisotannalla (arpajaismenetelmä). Ryhmälle A annetaan klooriheksidiini-suuvettä; Ryhmälle B annetaan ksylitoli-suuvettä ja ryhmä C probioottista suuhuuhtelua. Osallistujat ja tutkija suljetaan allokointijaksosta.

4. Interventio: Osallistujia pyydetään huuhtelemaan suunsa kerran päivässä (yöllä) 2 minuutin ajan käyttäen 15 ml suuvettä. Interventio suoritetaan 14 päivän ajan. Suun huuhtelua valvoo opintojakson aikana assistentti. Kirjaa ylläpidetään suuhuuhteen säännöllisen käytön dokumentoimiseksi ja myös interventiojakson aikana ilmenevien haittavaikutusten kirjaamiseksi.

5. Toimenpiteen jälkeisten tietojen kerääminen: 14 päivän suuhuuhteluaineiden käytön jälkeen samat toimenpiteet toistetaan ja niitä verrataan lähtötasoon.

Tilastollinen analyysisuunnitelma: Tiedot analysoidaan käyttämällä SPSS:ää (Statistical Package for the Social Sciences Version 22.0; SPSS Incorporated, Chicago, Illinois). Vertailut ennen ja jälkeen interventioita tehdään Paired t -testillä. Klooriheksidiini-, probiootti- ja ksylitoliryhmien vertailut tehdään käyttämällä ANOVAa (varianssianalyysi) ja Tukeyn Post Hoc -testejä. Lasten ja vanhusten suunhuuhteluaineiden antimikrobisen tehon vertailu tehdään itsenäisen näyte-t-testin avulla. Tilastollinen merkitsevyys asetetaan arvoon p ≤ 0,05.