前糖尿病患者の血糖値とインスリンレベルに対する海藻（Ecklonia Cava Extract）の効果

方法:

研究デザイン:

2021 年 3 月 1 日から 2021 年 7 月 20 日までサウジアラビアで実施される二重盲検ランダム化比較試験。 倫理的承認の申請は、キング サウド大学 (KSU) の治験審査委員会 (IRB) に申請されます。 書面による同意書は、研究の実施前にすべての参加者から取得され、理由を問わずいつでも研究を取り下げることができます。

参加者：

参加者は、18 歳から 65 歳までの前糖尿病患者で、American Diabetic による設定基準として 100 から 125 mg dL-1 の空腹時血漿グルコース (FPG) と診断された場合、この研究に参加する資格があります。関連付け (16)、および正常範囲内の血圧 (収縮期血圧 ≤ 140 mmHg、拡張期血圧 ≤ 90 mmHg WHO によって設定され、他の健康上の合併症はありません。 参加者は、インスリンまたは抗糖尿病薬、または血糖値またはポリフェノール吸収に影響を与えることが知られているその他の自然健康製品（例： 魚油）。 また、喫煙者、妊娠中または授乳中、または肝臓、甲状腺、または重大な胃腸障害がある場合は除外されます. 参加者は、サウジアラビア王国のリヤド市にあるキング ハーリド大学病院 (KKUH) で、チラシ、スノーボール、個人的なアプローチを使用して研究チームによって募集および審査されます。

検出力の計算とサンプル サイズの決定は、同様の研究 (12、14) で報告されたデータに基づいて行われました。これは、各グループに 12 人の参加者が必要であることを示しています。 個人の数は、BG で 38 単位、血漿インスリンで 2500 単位の差を検出するために必要です (研究の検出力 80% で有意水準 0.05 の曲線下の増分 (iAUC))。 10%の参加者が脱退できるようにするため、募集の目標数は30人です。

テスト製品:

この研究で使用された介入製品は、製造会社 (4215 95th St SW Lakewood, WA 98499 USA) が述べているように、1 カプセルあたり 13% のホロラタン酸ポリフェノールを含む「Seanol」と呼ばれる栄養補助食品です。 その他の成分は、デキストリン、ステアリン酸マグネシウム、シリカ (無視されたパーセンテージ) です。 介入サプリメントは、500 Ecklonia cava 抽出物 (Seanol) を含む植物性セルロースにカプセル化されています。 この用量は、参加者に害や深刻な悪影響を示さない以前の研究と同様になるように選択されました (12, 14)。 プラセボは、製薬会社「MEDISCA」（https://www.medisca.co.uk/）に発注したデキストリン（BETA CYCLODEXTRIN, NF）となります。 デキストリンは、介入サプリメントの同様の複雑な炭水化物含有量を説明するために選択されました. プラセボは、介入カプセルとサイズと色が同じ植物セルロースカプセルに封入されます。 空のカプセルは MEDISCA から注文され、SPIMACO ADDWAIEH (SFDA 登録製薬会社) (http://www.spimaco.com.sa/) によってカプセル化されます。

無作為化と盲検化:

研究の無作為化は、参加者を数字でエンコードし、サプリメント (介入とプラセボ) を文字 (A、B) でエンコードすることによって管理されます。 研究サプリメント（介入およびプラセボ）は、同一のカプセルにカプセル化され、各試験の機会にどのサプリメントが参加者に与えられるかを隠すために、AおよびBの文字でラベル付けされます. 適格な被験者から参加者を無作為に選択するために、コンピュータによる無作為化が使用されます。 次に、参加者がいずれかの研究試験介入としてサプリメントを受け取る順序 (E. cava) またはプラセボは、同じ手順を使用して決定されます。 サプリメントの正体は、データの収集と分析に関与しない研究者のみが知ることができます. 募集、データ収集、データ分析を実施する参加者と研究者は、データ分析が完了するまで、どのサプリメントが毎回消費されるかを知ることができません.

手順：

研究の募集は、最初に関心のある参加者に電話インタビューを使用して管理されます。 -選択基準を満たす参加者は、KKUHのダイエットクリニック/臨床栄養部門でスクリーニングされ、空腹時血糖が100〜125 mg dL-1の範囲にあり、血圧が正常範囲内（収縮期血圧≤140 mmHg）であることを確認します、拡張期血圧 ≤ 90 mmHg)。 また、除外基準に記載されている健康上の問題を抱えている参加者は除外されます。 次に、募集された参加者がランダムに選択され、プラセボまたは E.cava グループのいずれかにランダムに割り当てられます。 その後、特定の日時のテストに招待されます (参加者ごとに 1 回のみのテストで、3 時間続きます)。

両方のグループのすべての参加者は、予想される交絡因子を排除するために、試験室に来る前に、可能な限り最小限の運動で 10 時間 (水を除く) 絶食するように通知されます。 食事はテストの前日には提供されませんが、参加者は午後 7 時から 9 時の間に標準化された夕食をとるように通知されます。体重、身長、BMI、年齢、血圧、運動レベルなどの人口統計データは、直接質問調査を使用して、テスト時間中に参加者から収集されます。 また、24 時間の食事リコールは、食事分析のためのテスト時に収集されます。

テストの機会に、空腹時 (>10 時間) の 2 つの血液サンプルを -45 分と -35 分に採取して、平均 FBG とインスリンレベルを決定します。 ～30分の時点で、いずれかの学習テスト（E. 大静脈抽出物）またはプラセボカプセルが、無作為化の順序に基づいて参加者に投与されます。 次に、時間 0 で、参加者は約 75 g の炭水化物を含む 110 個の白パンを消費します。 血液サンプルは、標準的な経口耐糖能試験プロトコル（18）に従って、次の2時間、血糖については30、60、90、120の間隔で、インスリンレベルについては30、60、90、120の間隔で収集されます.

参加者には、施設と調査員の空き状況に基づいて異なる日程で試験が実施されることが通知され、参加者は自分に最も適した時間を選択できます。 それにもかかわらず、すべてのテスト機会は、すべての異なる日に同時に開始されます。 同様に、すべての参加者のすべてのテストの機会に、同じ研究プロトコルに従います。

検査の際には、所定の間隔（30、60、90、120）で指刺し血液サンプルを使用して、食後のグルコース濃度を直ちに測定します。 その後、グルコース濃度の結果は、各参加者の事前に設計されたシートに記録されます。 KKUH研究所で分析されるインスリンレベル測定のために、参加者から2〜3mlの血液サンプルが採取されます。 プラセボグループの標準ケアは、米国糖尿病協会（ADA）のガイドラインに基づいて、KKUHの臨床栄養部門で前糖尿病患者に使用される標準ケアと同じです。前糖尿病患者は、ライフスタイルの変更に焦点を当てた栄養士の相談を受けます個別の目標に基づいて;適度な減量を促進するか、少なくとも体重増加を防ぎ、頻繁な高血糖のリスクを減らす健康的な食品の選択を促進し、血糖コントロールを改善するために身体活動を奨励します.

研究介入の副作用を評価するために、参加者は、副作用がないか、軽度か、中等度か、重度かをそれぞれ 0、1、2、3 のスコアで示すよう求められます。 副作用アンケートは、介入またはプラセボ摂取後 24 時間以内に完了する必要があります。 副作用には、頭痛、エネルギーレベル、食欲、胃腸症状、異常な痛みや感覚、動悸、バランス障害、不安などがあります。 副作用の測定は、Paradis et al (12) によって使用されたものと同様の任意のスケールを使用して取得されます。これにより、参加者は、各副作用が存在しないかどうか (0)、軽度の強度 (1) を示すことにより、不耐性の症状を評価できます。 ）、中程度の強度（2）、または重度の強度（3）。

成果測定:

血漿グルコース濃度は、HemoCue Glucose 201 RT System (Radiometer Pacific Pty Ltd, Mount Waverley, VIC, Australia) を使用した標準的な手順に従って、血液の指刺しサンプルによって直ちに決定されます。 一方、血漿インスリンは、酵素免疫測定法（ELISA）を使用して、KKUH の検査部門で測定されます。

統計分析: まず、Shapiro-Wilk 検定を使用してデータの正規性を評価します。 したがって、正規性検定に基づいて、パラメトリック検定とノンパラメトリック検定が使用されます。 平均 (標準偏差) は正規分布したデータについて報告され、中央値 (四分位範囲) は正規分布していないデータについて報告されます。 データの正規性に基づいて、独立した t 検定または Mann-Whitney 検定のいずれかを使用して、PPBG と PIL の両方の 2 つのグループ間の差を p < 0.05 の有意なレベルで決定します。 マンホイットニー検定を使用して、グループ間の不耐性の症状の違いを判断します。 曲線下の増分面積（iAUC）、ピークまでの時間、およびピーク血中濃度の評価を使用して、血漿グルコースおよびインスリンレベルの食後反応を評価します。 統計分析は、社会科学用統計パッケージ (SPSS) バージョン 20 (SPSS Inc.、シカゴ、イリノイ州、米国) を使用して実行されます。 BMI は、体重 (kg) / 身長 (m) の式を使用して計算されます。 データは、データ分析の結果に基づいて解釈されます。 サンプルサイズは、同様の研究 (24) に基づいて計算されました。

安全性：

研究は KKUH 病院で募集されるため、余分な生物学的サンプルは病院の規則に従って廃棄されますが、陽イオンが取られ、PI は生物学的サンプルの廃棄の各段階で確認します。 同様に、危険なケースは病院の規則に従って処理され、そのようなケースが発生した場合は緊急事態が呼び出されます。

危険なケース:

参加者が研究中に高血糖または低血糖を経験した場合に使用される手順は次のとおりです。

応答: 低血糖に関しては:

患者は、震え、不安、発汗、青白い肌の速い、または不規則な心拍、めまいを含む低血糖の兆候と症状について教育を受けます。

研究中、血糖値の間隔チェックがあります。 ただし、患者がこれらの症状のいずれかを報告した場合は、低血糖が発生したかどうかを確認するために、直ちにランダムな血液検査を行いました.

低血糖が存在する場合 (血糖 < 70 mg/dl) 患者の参加は終了し、「15-15 ルールに従います。 15-15 ルール (ADA ガイドラインに基づく) (1)。 それは次のとおりです: 患者は血糖を上げるために 15 グラムの炭水化物 (大さじ 1 杯の蜂蜜) を摂取し、15 分後に血糖値をチェックします。 それでも 70 mg/dL 未満の場合は、さらに 15 g の炭水化物を消費する必要があり、血糖値が 70 mg/dl を超えるまで繰り返します。 その後、患者は朝食をとるように指示されます。

15-15 ルールを 4 回繰り返した後も低血糖が続く場合は、KKUH で救急車が呼び出されます。

高血糖に関しては、同様の手順に従います。

患者は、多尿、多飲、頭痛、集中力低下、かすみ目、疲労感などの高血糖の徴候および症状について教育を受けます。 患者がこれらの症状のいずれかを報告した場合、高血糖が発生したかどうかを確認するためにランダムな血液検査が行われます。

低血糖が存在する場合 (血糖 > 240 mg/dl) 患者の参加は中止され、糖尿病性ケトアシドーシス (DKA) の潜在的なリスクのために緊急治療が呼び出されます。

潜在的な制約:

募集は、特にサプリメントを使用する臨床試験では困難な場合があります. そのため、急性効果を測定する 1 回限りの研究が選択されました。 また、1 か月でより多くの適格な被験者を募集するために、別の募集手順が使用されます。