海藻（腔昆布提取物）对糖尿病前期患者血糖和胰岛素水平的影响

方法：

学习规划：

将于 2021 年 3 月 1 日至 2021 年 7 月 20 日在沙特阿拉伯进行的双盲、随机对照试验。 道德批准的申请将提交给沙特国王大学 (KSU) 的机构审查委员会 (IRB)。 在进行研究之前，将从所有参与者那里获得书面同意书，他们将能够以任何理由随时退出研究。

参加者：

如果参与者在其病史中被诊断为糖尿病前期患者，年龄在 18 至 65 岁之间，且空腹血糖 (FPG) 在 100 至 125 mg dL-1 之间作为美国糖尿病协会设定的标准，则他们将有资格参与本研究Association (16)，血压在WHO规定的正常范围内（收缩压≤140mmHg，舒张压≤90mmHg，无其他健康并发症。 如果参与者正在接受胰岛素或抗糖尿病药物或任何其他已知会影响血糖或多酚吸收的天然保健品（例如， 鱼油）。 此外，如果他们吸烟、怀孕或哺乳或患有肝脏、甲状腺或严重的胃肠道疾病，他们将被排除在外。 研究团队将在沙特阿拉伯王国利雅得市的哈立德国王大学医院 (KKUH) 使用传单、滚雪球和个人方法招募和筛选参与者。

根据类似研究 (12, 14) 中报告的数据进行功效计算和样本量确定，这表明每组需要 12 名参与者。 需要个体数量来检测 38 个单位的 BG 和 2500 个单位的血浆胰岛素（曲线下增量 (iAUC)，显着性水平为 0.05，研究功效为 80%。 以允许10%参与者退出为目的，目标招募人数为30人。

测试产品：

本研究中使用的干预产品是一种名为“Seanol”的膳食补充剂，如制造公司（Seanol inside, 4215 95th St SW Lakewood, WA 98499 USA）所述，每粒胶囊含有 13% 的 pholoratannic 多酚。 其他成分是糊精、硬脂酸镁和二氧化硅（百分比被忽略）。 干预补充剂封装在含有 500 腔昆布提取物 (Seanol) 的植物纤维素中。 选择该剂量与之前的研究相似，这些研究表明对参与者没有伤害或严重的不利影响 (12, 14)。 安慰剂是从制药公司“MEDISCA”(https://www.medisca.co.uk/) 订购的糊精 (BETA CYCLODEXTRIN, NF)。 选择糊精是为了解释干预补充剂中相似的复杂碳水化合物含量。 安慰剂将被封装在与干预胶囊大小和颜色相同的植物纤维素胶囊中。 空胶囊将从 MEDISCA 订购，并由 SPIMACO ADDWAIEH（SFDA 注册制药公司）(http://www.spimaco.com.sa/) 封装。

随机化和盲法：

研究随机化将通过用数字编码参与者和用字母（A，B）补充（干预和安慰剂）来管理。 研究补充剂（干预和安慰剂）将封装在相同的胶囊中，并标有字母 A 和 B，以隐藏每次测试时给予参与者的补充剂。 计算机生成的随机化将用于从符合条件的受试者中随机选择参与者。 然后，参与者接受补充剂的顺序作为研究测试干预（E. cava) 或安慰剂将使用相同的程序来确定。 只有不参与数据收集和分析的调查人员才知道补充剂的身份。 将进行招募、数据收集和数据分析的参与者和调查人员将不知道每次食用哪种补充剂，直到数据分析完成。

程序：

研究招募将首先对感兴趣的参与者进行电话采访。 符合纳入标准的参与者将在 KKUH 的饮食诊所/临床营养部门进行筛查，以确保空腹血糖在 100 至 125 mg dL-1 之间，以及血压在正常范围内（收缩压≤140 mmHg , 舒张压≤ 90 mmHg)。 此外，排除标准中列出的任何健康问题的参与者将被排除在外。 然后，将随机选择招募的参与者，然后将他们随机分配到安慰剂组或 E.cava 组。 然后，他们将被邀请参加特定日期和时间的测试活动（每位参与者仅限一次测试活动，持续3小时）。

两组中的所有参与者都将被告知在进入测试室之前尽可能少地禁食 10 小时（水除外），以消除任何预期的混杂因素。 测试前一天不会提供食物，但会通知参与者在晚上 7 点至 9 点之间享用标准晚餐。人口统计数据，包括体重、身高、BMI、年龄、血压、运动水平，将在测试期间使用定向问题调查从参与者那里收集。 此外，将在测试期间收集 24 小时饮食回忆以进行饮食分析。

在测试时，将在 -45 分钟和 -35 分钟采集两次空腹（>10 小时）血样，以确定平均 FBG 和胰岛素水平。 在-30 分钟的时间，要么学习测试（E. cava 提取物）或安慰剂胶囊将根据随机顺序给予参与者。 然后，在时间 0，参与者将食用 110 个白面包，其中含有大约 75 克碳水化合物。 将根据标准口服葡萄糖耐量试验方案 (18) 在接下来的 2 小时内以 30、60、90、120 的间隔采集血液样本用于血糖，并以 30、60、90、120 的间隔采集胰岛素水平.

参与者将被告知，测试时间将根据设施和调查人员的可用性在不同的日期进行，他们可以选择最适合他们的时间。 尽管如此，所有测试活动都将在不同日期的同一时间开始。 此外，所有参与者的所有测试场合都将遵循相同的研究协议。

在测试的时候，餐后血糖浓度将在预定的时间间隔（30、60、90、120）使用手指采血样本立即测量。 然后，葡萄糖浓度的结果将记录在先前为每个参与者设计的表格中。 将从参与者身上抽取 2-3 毫升的血液样本用于胰岛素水平测量，这些样本将在 KKUH 实验室进行分析。 安慰剂组的标准护理将与 KKUH 临床营养部门根据美国糖尿病协会 (ADA) 指南对糖尿病前期患者使用的标准护理相同：糖尿病前期患者将接受营养师咨询，重点是改变生活方式，包括但不限于，基于个性化目标；促进适度的体重减轻或至少防止体重增加，促进健康食品的选择，以降低频繁高血糖的风险，以及鼓励身体活动以改善血糖控制。

为了评估研究干预的副作用，将要求参与者通过分别给出分数 0、1、2、3 来表明副作用是否存在、轻微、中度或严重。 副作用调查问卷需要在干预或安慰剂摄入后 24 小时内完成。 副作用将包括头痛、能量水平、食欲、胃肠道症状、异常疼痛或感觉、心悸、平衡障碍和焦虑。 副作用的测量将通过使用类似于 Paradis 等人 (12) 使用的任意量表来获得，该量表允许参与者通过指示每种副作用是否不存在 (0)、轻微强度 (1) 来评估不耐受症状)、中等强度 (2) 或重度 (3)。

结果衡量：

将使用 HemoCue Glucose 201 RT 系统（Radiometer Pacific Pty Ltd, Mount Waverley, VIC, Australia）按照标准程序通过手指采血样本立即测定血浆葡萄糖浓度。 然而，血浆胰岛素将在 KKUH 的实验室部门使用酶联免疫吸附测定法 (ELISA) 进行测量。

统计分析：首先，将使用Shapiro-Wilk检验评估数据的正态性。 因此，在正态性检验的基础上，将使用参数检验和非参数检验。 对于正态分布的数据，将报告均值（标准差），而对于非正态分布的数据，将报告中位数（四分位数间距）。 基于数据正态性的独立 t 检验或 Mann-Whitney 检验将用于确定两组之间 PPBG 和 PIL 的差异，显着水平为 p < 0.05。 Mann-Whitney 测试将用于确定组间不耐受症状的差异。 增量曲线下面积 (iAUC)、达峰时间和峰值血浓度评估将用于评估餐后血浆葡萄糖和胰岛素水平的反应。 将使用社会科学统计软件包 (SPSS) 第 20 版（SPSS 公司，美国伊利诺伊州芝加哥市）进行统计分析。 BMI 将使用以公斤为单位的体重/以米为单位的身高等式计算。 数据将根据数据分析的结果进行解释。 样本量是根据类似研究 (24) 计算得出的。

安全：

由于该研究将在 KKUH 医院招募，额外的生物样本将按照医院的规定处理，但将采取阳离子，PI 将确保生物样本处理的每一步。 同样，有风险的病例将按照医院的规定进行处理，如果发生此类病例，将呼叫急救人员。

风险案例：

如果参与者在研究期间出现高血糖或低血糖，将使用以下程序：

回应：在低血糖方面：

将对患者进行有关低血糖症状和体征的教育，包括：颤抖、焦虑、出汗、皮肤苍白快速或心律不齐、头晕。

在研究期间，将定期检查血糖。 但是，如果患者报告任何这些症状，请立即进行随机血液检查，以确保是否发生低血糖。

如果存在低血糖（血糖 < 70 mg /dl），患者参与将被终止，并遵循“15-15 规则”。 15-15 规则（基于 ADA 指南）(1)。 如下：病人吃15克碳水化合物（1汤匙蜂蜜）来升高血糖，15分钟后测血糖。 如果仍低于70 mg/dL，则需要再摄入15克碳水化合物，如此重复，直至血糖升至70 mg/dL以上。 然后将指示患者吃早餐。

如果在 15-15 规则的 4 次后低血糖仍然存在，KKUH 将要求紧急护理。

在高血糖方面：将遵循类似的步骤：

患者将被告知高血糖的体征和症状，包括：多尿、烦渴、头痛、注意力不集中、视力模糊、感觉疲劳 在研究期间，将定期检查血糖。 如果患者报告任何这些症状，则进行随机血液检查以确保是否发生高血糖症。

如果存在低血糖（血糖 > 240 mg /dl），由于糖尿病酮症酸中毒 (DKA) 的潜在风险，患者参与将被终止，并且将被要求进行紧急护理。

潜在的限制：

招募可能具有挑战性，尤其是在使用补充剂的临床试验中。 出于这个原因，选择了测量急性效应的一次性研究。 此外，将采用不同的招募程序，以便在一个月内招募尽可能多的符合条件的受试者。