分泌された胚由来のトリプシンが子宮上皮細胞で Ca2+ シグナルをどのように開始、維持、終了するか (Ca2+)
2024年7月16日 更新者：Barbara Lawrenz、ART Fertility Clinics LLC
分泌された胚由来のトリプシンが子宮上皮細胞で Ca2+ (細胞内カルシウム) シグナルをどのように開始、維持、終了するかを調査するには
基礎研究を通じて子宮内膜と胚のクロストークについて理解を深め、治療標的を明らかにし、生殖成績を改善する。
調査の概要
詳細な説明
妊娠は、孵化した胚盤胞の脱落膜化しつつある子宮内膜への移植を伴う、複雑かつ高度に調整された生理学的プロセスです。 移植の主な目的は、胚盤胞を脱落膜実質にしっかりと固定することであり、これにより胎盤形成が可能になり、さらなる発育が可能になります。 マウスモデルでは、胚と子宮のクロストークに関与する多数の細胞事象や分子経路が同定されているが、ヒトの胚と子宮の相互作用についてはまだ包括的な理解が得られていない。 私たちの研究は、ヒト胚によって放出されるセリンプロテアーゼに応答した子宮内膜上皮の Ca2+ シグナル伝達が、着床時の母体の認識と受胎産物の選択に重要な役割を果たしているということを示しています。 以前の研究では、栄養膜スフェロイドが機械感受性 Ca2+ 透過性チャネルを介して Ca2+ 流入を活性化し、上皮接着性を誘導することにより、ヒト子宮上皮細胞株 (石川) の [Ca2+]i を上昇させることができることが実証されています。 しかし、ヒト子宮上皮におけるプロテアーゼ誘発性の [Ca2+]i トランジェントを媒介する機構は、現在まで研究されていません。 研究者らは、トリプシンで活性化された ENaC を介して絨毛内空間に Na+ が侵入すると、細胞膜が脱分極し、[Na+]v が十分に増加してナトリウム/カルシウム交換体を逆転させ、絨毛内空間への Ca2+ 侵入の手段となるのではないかと仮説を立てています。 微絨毛からバルク細胞質への Ca2+ 拡散は [Ca2+]i を増加させ、SOCE と並行して ER の再充填源として機能します。 [Ca2+]i の増加は BK チャネルも活性化し、NCX を介した Ca2+ 流入の再分極と停止につながります。
着床前遺伝子検査を受ける胚の使用済み培地を使用することにより、上記のメカニズムが胚の倍数性状態によって影響を受けるかどうかを判断することが可能になります。
研究の種類
観察的
入学 (実際)
81
連絡先と場所
このセクションには、調査を実施する担当者の連絡先の詳細と、この調査が実施されている場所に関する情報が記載されています。
研究場所
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Abu Dhabi、アラブ首長国連邦、60202
- ART Fertility Clinics LLC
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参加基準
研究者は、適格基準と呼ばれる特定の説明に適合する人を探します。これらの基準のいくつかの例は、人の一般的な健康状態または以前の治療です。
適格基準
就学可能な年齢
18年～36年 (大人)
健康ボランティアの受け入れ
はい
サンプリング方法
非確率サンプル
調査対象母集団
アラブ人で原発性/続発性不妊症があり、異数性の着床前遺伝子検査によるICSI治療を受けている。
説明
包含基準:
- PGT-AによるICSI治療を受ける予定の原発性/続発性不妊症のカップル
- 各パートナーの年齢が 18 歳以上
除外基準:
- 血族関係にある夫婦（1親等または2親等のいとこ同士の夫婦）
- 女性パートナーに以下の病歴があるカップル:
- 卵巣予備能に影響を与える化学療法または放射線療法
- 卵巣・付属器領域の手術
- 子宮内膜症
- 男性パートナーに以下の病歴があるカップル。
- 精液の結果に影響を与える化学療法/放射線
- 睾丸の手術
- 精管切除術
- 精管切除術を元に戻す手術
- 細針吸引 (FNA) または精巣精子抽出 (TESE) によって採取された精液
研究計画
このセクションでは、研究がどのように設計され、研究が何を測定しているかなど、研究計画の詳細を提供します。
研究はどのように設計されていますか？
デザインの詳細
コホートと介入
グループ/コホート |
介入・治療 |
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DEG n1: 正倍数性媒体
正倍数体胚由来の培地
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培地への曝露
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DEG n2: 異数性培地
異数体胚由来の培地
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培地への曝露
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DEG n3: 中程度の停止胚
停止胚由来の培地
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培地への曝露
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DEG n4: 対照培地
胚と接触しない純粋培養培地
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培地への曝露
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この研究は何を測定していますか？
主要な結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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タンパク質のマーカーの変化
時間枠：1日
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ウェスタンブロッティングを使用したタンパク質マーカー（PAR2、(p)、SGK1、NFkB、ORAI1-3、STIM1-2、COX2）の変化
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1日
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細胞内カルシウムのピークおよびスロープレベルの変化
時間枠：1日
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細胞内カルシウムのピークおよびスロープレベルの変化
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1日
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胚培地とのインキュベーション後の細胞の形態の変化
時間枠：1日
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胚培地とのインキュベーション後の細胞の形態の変化
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1日
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二次結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
|---|---|---|
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ICSIのパフォーマンス
時間枠：1日
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0日目に、注入された卵母細胞の数/ICSIグループに割り当てられたCOCの数として定義されます。
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1日
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3日目の胚の品質
時間枠：1日
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割球の数とその分割パターン、断片化、圧縮の存在、空胞、顆粒、核によって定義されます。
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1日
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5日目の胚の品質 (Gardner and Schoolcraft、1999)
時間枠：1日
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Gardner および Schoolcraft、1999) によって次のように定義されます。
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1日
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協力者と研究者
ここでは、この調査に関係する人々や組織を見つけることができます。
捜査官
- 主任研究者：Barbara Lawrenz, PhD、ART Fertility Clinics LLC
出版物と役立つリンク
研究に関する情報を入力する責任者は、自発的にこれらの出版物を提供します。これらは、研究に関連するあらゆるものに関するものである可能性があります。
一般刊行物
- Heijnen EM, Eijkemans MJ, De Klerk C, Polinder S, Beckers NG, Klinkert ER, Broekmans FJ, Passchier J, Te Velde ER, Macklon NS, Fauser BC. A mild treatment strategy for in-vitro fertilisation: a randomised non-inferiority trial. Lancet. 2007 Mar 3;369(9563):743-749. doi: 10.1016/S0140-6736(07)60360-2.
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- Kaneko Y, Day ML, Murphy CR. Integrin beta3 in rat blastocysts and epithelial cells is essential for implantation in vitro: studies with Ishikawa cells and small interfering RNA transfection. Hum Reprod. 2011 Jul;26(7):1665-74. doi: 10.1093/humrep/der128. Epub 2011 Apr 30.
- Mertzanidou A, Wilton L, Cheng J, Spits C, Vanneste E, Moreau Y, Vermeesch JR, Sermon K. Microarray analysis reveals abnormal chromosomal complements in over 70% of 14 normally developing human embryos. Hum Reprod. 2013 Jan;28(1):256-64. doi: 10.1093/humrep/des362. Epub 2012 Oct 9.
- Teklenburg G, Salker M, Heijnen C, Macklon NS, Brosens JJ. The molecular basis of recurrent pregnancy loss: impaired natural embryo selection. Mol Hum Reprod. 2010 Dec;16(12):886-95. doi: 10.1093/molehr/gaq079. Epub 2010 Sep 16.
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- Singh Y, Shi X, Zhang S, Umbach AT, Chen H, Salker MS, Lang F. Prolyl hydroxylase 3 (PHD3) expression augments the development of regulatory T cells. Mol Immunol. 2016 Aug;76:7-12. doi: 10.1016/j.molimm.2016.06.003. Epub 2016 Jun 19.
- Brosens JJ, Salker MS, Teklenburg G, Nautiyal J, Salter S, Lucas ES, Steel JH, Christian M, Chan YW, Boomsma CM, Moore JD, Hartshorne GM, Sucurovic S, Mulac-Jericevic B, Heijnen CJ, Quenby S, Koerkamp MJ, Holstege FC, Shmygol A, Macklon NS. Uterine selection of human embryos at implantation. Sci Rep. 2014 Feb 6;4:3894. doi: 10.1038/srep03894.
- Turco MY, Gardner L, Hughes J, Cindrova-Davies T, Gomez MJ, Farrell L, Hollinshead M, Marsh SGE, Brosens JJ, Critchley HO, Simons BD, Hemberger M, Koo BK, Moffett A, Burton GJ. Long-term, hormone-responsive organoid cultures of human endometrium in a chemically defined medium. Nat Cell Biol. 2017 May;19(5):568-577. doi: 10.1038/ncb3516. Epub 2017 Apr 10.
研究記録日
これらの日付は、ClinicalTrials.gov への研究記録と要約結果の提出の進捗状況を追跡します。研究記録と報告された結果は、国立医学図書館 (NLM) によって審査され、公開 Web サイトに掲載される前に、特定の品質管理基準を満たしていることが確認されます。
主要日程の研究
研究開始 (実際)
2021年11月4日
一次修了 (実際)
2023年4月16日
研究の完了 (実際)
2023年5月15日
試験登録日
最初に提出
2021年4月26日
QC基準を満たした最初の提出物
2021年4月26日
最初の投稿 (実際)
2021年4月29日
学習記録の更新
投稿された最後の更新 (実際)
2024年7月17日
QC基準を満たした最後の更新が送信されました
2024年7月16日
最終確認日
2024年7月1日
詳しくは
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