Hoe trypsine uit secretie-embryo's initieert, onderhoudt en beëindigt Ca2+-signalen in epitheelcellen van de baarmoeder (Ca2+)
Onderzoeken hoe trypsine uit secretie-embryo's initieert, onderhoudt en beëindigt Ca2+ (intracellulaire calcium)-signalen in epitheelcellen van de baarmoeder
Studie Overzicht
Toestand
Interventie / Behandeling
Gedetailleerde beschrijving
Zwangerschap is een complex en zeer gecoördineerd fysiologisch proces waarbij een uitgekomen blastocyst wordt geïmplanteerd in een decidualiserend endometrium. Het belangrijkste doel van implantatie is ervoor te zorgen dat de blastocyst stevig verankert in het deciduale stroma, wat verdere ontwikkeling mogelijk maakt door placentatie mogelijk te maken. Hoewel een groot aantal cellulaire gebeurtenissen en moleculaire routes die betrokken zijn bij embryo-uteriene overspraak zijn geïdentificeerd in muismodellen, ontbreekt nog steeds een alomvattend begrip van de menselijke embryo-uteriene interactie. Ons werk geeft aan dat endometriumepitheel Ca2+-signalering als reactie op serineproteasen die door menselijke embryo's worden vrijgegeven een belangrijke rol speelt bij de herkenning en selectie van de conceptus door de moeder bij implantatie. Eerdere studies hebben aangetoond dat trofoblast-sferoïden [Ca2+]i in menselijke baarmoederepitheelcellijn (Ishikawa) kunnen verhogen door Ca2+-invoer te activeren via mechanisch-gevoelige Ca2+-permeabele kanalen die leiden tot de inductie van epitheliale hechting. Het (de) mechanisme(n) die de protease-geïnduceerde [Ca2+]i-transiënten in menselijk baarmoederepitheel mediëren, zijn tot op heden echter niet bestudeerd. Onderzoekers veronderstellen dat het binnendringen van Na+ in de intravilleuze ruimte via trypsine-geactiveerde ENaC het celmembraan zal depolariseren en [Na+]v voldoende hoog zal verhogen om de natrium/calciumwisselaar om te keren die middelen verschaft voor het binnendringen van Ca2+ in de intravilleuze ruimte. Ca2+-diffusie van de microvilli naar het bulkcytoplasma zal [Ca2+]i verhogen en, parallel met SOCE, fungeren als een bron voor het opnieuw vullen van het ER. Verhoogde [Ca2+]i activeert ook de BK-kanalen, wat leidt tot repolarisatie en beëindiging van Ca2+-invoer via de NCX.
Door gebruikt medium van embryo's te gebruiken, die pre-implantatie genetisch getest zullen worden, zal het mogelijk worden om te bepalen of de bovengenoemde mechanismen worden beïnvloed door de ploïdiestatus van het embryo.
Studietype
Inschrijving (Werkelijk)
Contacten en locaties
Studie Locaties
-
-
-
Abu Dhabi, Verenigde Arabische Emiraten, 60202
- ART Fertility Clinics LLC
-
-
Deelname Criteria
Geschiktheidscriteria
Leeftijden die in aanmerking komen voor studie
Accepteert gezonde vrijwilligers
Bemonsteringsmethode
Studie Bevolking
Beschrijving
Inclusiecriteria:
- Paren met primaire/secundaire onvruchtbaarheid die een ICSI-behandeling met PGT-A gepland hebben
- Leeftijd van elke partner boven de 18 jaar
Uitsluitingscriteria:
- Stellen met bloedverwantschap (echtpaar dat neven en nichten in de 1e of 2e graad is)
- Paren waarbij de vrouwelijke partner een voorgeschiedenis heeft van:
- Chemotherapie of bestraling die de ovariële reserve beïnvloedt
- Chirurgie aan de eierstokken / adnex regio
- Endometriose
- Paren waarbij de mannelijke partner een voorgeschiedenis heeft van:
- Chemotherapie / bestraling die het spermaresultaat beïnvloedt
- Chirurgie aan de testikels
- vasectomie
- Chirurgie voor het ongedaan maken van vasectomie
- Sperma verkregen door fijne naaldaspiratie (FNA) of zaadbalextractie (TESE)
Studie plan
Hoe is de studie opgezet?
Ontwerpdetails
Cohorten en interventies
Groep / Cohort |
Interventie / Behandeling |
|---|---|
|
DEG n1: euploïde medium
kweekmedia afgeleid van euploïde embryo's
|
Blootstelling aan kweekmedia
|
|
DEG n2: aneuploïde medium
kweekmedia afgeleid van aneuploïde embryo's
|
Blootstelling aan kweekmedia
|
|
DEG n3: medium gearresteerde embryo's
kweekmedia afkomstig van gearresteerde embryo's
|
Blootstelling aan kweekmedia
|
|
DEG n4: controle kweekmedium
pure kweekmedia zonder contact met embryo's
|
Blootstelling aan kweekmedia
|
Wat meet het onderzoek?
Primaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
Verandering in markers van eiwit
Tijdsspanne: 1 dag
|
Verandering in markers van eiwit (PAR2, (p) en SGK1, NFkB, ORAI1-3 en STIM1-2 en COX2) met behulp van Western-blotting
|
1 dag
|
|
Verandering in piek- en hellingniveaus van intracellulair calcium
Tijdsspanne: 1 dag
|
Verandering in piek- en hellingniveaus van intracellulair calcium
|
1 dag
|
|
Verandering in morfologie van cellen na incubatie met embryomedia
Tijdsspanne: 1 dag
|
Verandering in morfologie van cellen na incubatie met embryomedia
|
1 dag
|
Secundaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
Prestaties van ICSI
Tijdsspanne: 1 dag
|
Gedefinieerd op dag 0 als het aantal geïnjecteerde oöcyten/aantal COC's toegewezen aan de ICSI-groep
|
1 dag
|
|
Embryokwaliteit op dag 3
Tijdsspanne: 1 dag
|
Gedefinieerd door het aantal blastomeren en hun delingspatroon, fragmentatie, aanwezigheid van verdichting, vacuolen, granulatie en kernen
|
1 dag
|
|
Embryokwaliteit op dag 5 (Gardner en Schoolcraft, 1999)
Tijdsspanne: 1 dag
|
Gardner en Schoolcraft, 1999) gedefinieerd door:
|
1 dag
|
Medewerkers en onderzoekers
Sponsor
Medewerkers
Onderzoekers
- Hoofdonderzoeker: Barbara Lawrenz, PhD, ART Fertility Clinics LLC
Publicaties en nuttige links
Algemene publicaties
- Heijnen EM, Eijkemans MJ, De Klerk C, Polinder S, Beckers NG, Klinkert ER, Broekmans FJ, Passchier J, Te Velde ER, Macklon NS, Fauser BC. A mild treatment strategy for in-vitro fertilisation: a randomised non-inferiority trial. Lancet. 2007 Mar 3;369(9563):743-749. doi: 10.1016/S0140-6736(07)60360-2.
- Wang H, Dey SK. Roadmap to embryo implantation: clues from mouse models. Nat Rev Genet. 2006 Mar;7(3):185-99. doi: 10.1038/nrg1808.
- Kaneko Y, Day ML, Murphy CR. Integrin beta3 in rat blastocysts and epithelial cells is essential for implantation in vitro: studies with Ishikawa cells and small interfering RNA transfection. Hum Reprod. 2011 Jul;26(7):1665-74. doi: 10.1093/humrep/der128. Epub 2011 Apr 30.
- Mertzanidou A, Wilton L, Cheng J, Spits C, Vanneste E, Moreau Y, Vermeesch JR, Sermon K. Microarray analysis reveals abnormal chromosomal complements in over 70% of 14 normally developing human embryos. Hum Reprod. 2013 Jan;28(1):256-64. doi: 10.1093/humrep/des362. Epub 2012 Oct 9.
- Teklenburg G, Salker M, Heijnen C, Macklon NS, Brosens JJ. The molecular basis of recurrent pregnancy loss: impaired natural embryo selection. Mol Hum Reprod. 2010 Dec;16(12):886-95. doi: 10.1093/molehr/gaq079. Epub 2010 Sep 16.
- Quenby S, Vince G, Farquharson R, Aplin J. Recurrent miscarriage: a defect in nature's quality control? Hum Reprod. 2002 Aug;17(8):1959-63. doi: 10.1093/humrep/17.8.1959.
- Aplin JD. Embryo implantation: the molecular mechanism remains elusive. Reprod Biomed Online. 2006 Dec;13(6):833-9. doi: 10.1016/s1472-6483(10)61032-2.
- Zhang S, Lin H, Kong S, Wang S, Wang H, Wang H, Armant DR. Physiological and molecular determinants of embryo implantation. Mol Aspects Med. 2013 Oct;34(5):939-80. doi: 10.1016/j.mam.2012.12.011. Epub 2013 Jan 2.
- Ruan YC, Guo JH, Liu X, Zhang R, Tsang LL, Dong JD, Chen H, Yu MK, Jiang X, Zhang XH, Fok KL, Chung YW, Huang H, Zhou WL, Chan HC. Activation of the epithelial Na+ channel triggers prostaglandin E(2) release and production required for embryo implantation. Nat Med. 2012 Jul;18(7):1112-7. doi: 10.1038/nm.2771.
- Rossier BC, Stutts MJ. Activation of the epithelial sodium channel (ENaC) by serine proteases. Annu Rev Physiol. 2009;71:361-79. doi: 10.1146/annurev.physiol.010908.163108.
- Marunaka Y, Niisato N. Effects of Ca(2+) channel blockers on amiloride-sensitive Na(+) permeable channels and Na(+) transport in fetal rat alveolar type II epithelium. Biochem Pharmacol. 2002 Apr 15;63(8):1547-52. doi: 10.1016/s0006-2952(02)00880-8.
- Salker MS, Hosseinzadeh Z, Alowayed N, Zeng N, Umbach AT, Webster Z, Singh Y, Brosens JJ, Lang F. LEFTYA Activates the Epithelial Na+ Channel (ENaC) in Endometrial Cells via Serum and Glucocorticoid Inducible Kinase SGK1. Cell Physiol Biochem. 2016;39(4):1295-306. doi: 10.1159/000447834. Epub 2016 Sep 8.
- Singh Y, Shi X, Zhang S, Umbach AT, Chen H, Salker MS, Lang F. Prolyl hydroxylase 3 (PHD3) expression augments the development of regulatory T cells. Mol Immunol. 2016 Aug;76:7-12. doi: 10.1016/j.molimm.2016.06.003. Epub 2016 Jun 19.
- Brosens JJ, Salker MS, Teklenburg G, Nautiyal J, Salter S, Lucas ES, Steel JH, Christian M, Chan YW, Boomsma CM, Moore JD, Hartshorne GM, Sucurovic S, Mulac-Jericevic B, Heijnen CJ, Quenby S, Koerkamp MJ, Holstege FC, Shmygol A, Macklon NS. Uterine selection of human embryos at implantation. Sci Rep. 2014 Feb 6;4:3894. doi: 10.1038/srep03894.
- Turco MY, Gardner L, Hughes J, Cindrova-Davies T, Gomez MJ, Farrell L, Hollinshead M, Marsh SGE, Brosens JJ, Critchley HO, Simons BD, Hemberger M, Koo BK, Moffett A, Burton GJ. Long-term, hormone-responsive organoid cultures of human endometrium in a chemically defined medium. Nat Cell Biol. 2017 May;19(5):568-577. doi: 10.1038/ncb3516. Epub 2017 Apr 10.
Studie record data
Bestudeer belangrijke data
Studie start (Werkelijk)
Primaire voltooiing (Werkelijk)
Studie voltooiing (Geschat)
Studieregistratiedata
Eerst ingediend
Eerst ingediend dat voldeed aan de QC-criteria
Eerst geplaatst (Werkelijk)
Updates van studierecords
Laatste update geplaatst (Werkelijk)
Laatste update ingediend die voldeed aan QC-criteria
Laatst geverifieerd
Meer informatie
Termen gerelateerd aan deze studie
Aanvullende relevante MeSH-voorwaarden
Andere studie-ID-nummers
- 2012-ABU-014-BL
Plan Individuele Deelnemersgegevens (IPD)
Bent u van plan om gegevens van individuele deelnemers (IPD) te delen?
Informatie over medicijnen en apparaten, studiedocumenten
Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd geneesmiddel
Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd apparaatproduct
Deze informatie is zonder wijzigingen rechtstreeks van de website clinicaltrials.gov gehaald. Als u verzoeken heeft om uw onderzoeksgegevens te wijzigen, te verwijderen of bij te werken, neem dan contact op met register@clinicaltrials.gov. Zodra er een wijziging wordt doorgevoerd op clinicaltrials.gov, wordt deze ook automatisch bijgewerkt op onze website .