Как трипсин секретируемого эмбриона инициирует, поддерживает и терминирует сигналы Ca2+ в эпителиальных клетках матки (Ca2+)
16 июля 2024 г. обновлено: Barbara Lawrenz, ART Fertility Clinics LLC
Исследовать, как трипсин, секретируемый из эмбрионов, инициирует, поддерживает и прекращает сигналы Ca2+ (внутриклеточный кальций) в эпителиальных клетках матки.
Для более глубокого понимания перекрестных помех между эндометрием и эмбрионом с помощью фундаментальных исследований, выявления терапевтических целей и улучшения репродуктивных результатов.
Обзор исследования
Статус
Завершенный
Условия
Вмешательство/лечение
Подробное описание
Беременность представляет собой сложный и четко скоординированный физиологический процесс, который включает имплантацию вылупившейся бластоцисты в децидуализирующийся эндометрий. Основная цель имплантации - обеспечить прочное закрепление бластоцисты в децидуальной строме, что обеспечивает дальнейшее развитие путем обеспечения плацентации. Хотя множество клеточных событий и молекулярных путей, вовлеченных в эмбрионально-маточные перекрестные помехи, были идентифицированы на моделях мышей, всестороннего понимания человеческого эмбрионально-маточного взаимодействия все еще нет. Наша работа показывает, что передача сигналов Ca2+ эпителия эндометрия в ответ на сериновые протеазы, высвобождаемые человеческими эмбрионами, играет важную роль в материнском распознавании и выборе зачатия при имплантации. Предыдущие исследования показали, что сфероиды трофобласта могут повышать [Ca2+]i в линии эпителиальных клеток матки человека (Ishikawa) путем активации входа Ca2+ через механочувствительные проницаемые для Ca2+ каналы, что приводит к индукции адгезивности эпителия. Однако механизм(ы), опосредующий индуцированные протеазами переходы [Ca2+]i в эпителии матки человека, до настоящего времени не изучен. Исследователи предполагают, что попадание Na+ во внутриворсинчатое пространство посредством активированного трипсином ENaC деполяризует клеточную мембрану и увеличивает [Na+]v достаточно высоко, чтобы обратить вспять натрий/кальциевый обменник, обеспечивающий вход Ca2+ во внутриворсинчатое пространство. Диффузия Ca2+ из микроворсинок в объемную цитоплазму будет увеличивать [Ca2+]i и, параллельно с SOCE, действовать как источник повторного наполнения ER. Повышение [Ca2+]i также активирует BK-каналы, что приводит к реполяризации и прекращению входа Ca2+ через NCX.
Используя отработанную среду из эмбрионов, которые будут подвергаться предимплантационному генетическому тестированию, можно будет определить, влияет ли на вышеперечисленные механизмы плоидный статус эмбриона.
Тип исследования
Наблюдательный
Регистрация (Действительный)
81
Контакты и местонахождение
В этом разделе приведены контактные данные лиц, проводящих исследование, и информация о том, где проводится это исследование.
Места учебы
-
-
-
Abu Dhabi, Объединенные Арабские Эмираты, 60202
- ART Fertility Clinics LLC
-
-
Критерии участия
Исследователи ищут людей, которые соответствуют определенному описанию, называемому критериям приемлемости. Некоторыми примерами этих критериев являются общее состояние здоровья человека или предшествующее лечение.
Критерии приемлемости
Возраст, подходящий для обучения
От 18 лет до 36 лет (Взрослый)
Принимает здоровых добровольцев
Да
Метод выборки
Невероятностная выборка
Исследуемая популяция
Арабской национальности, с первичным/вторичным бесплодием, которые проходят лечение ИКСИ с преимплантационным генетическим тестированием на анеуплоидии.
Описание
Критерии включения:
- Пары с первичным/вторичным бесплодием, которым планируется лечение ИКСИ с PGT-A
- Возраст каждого партнера старше 18 лет
Критерий исключения:
- Пары с кровным родством (пара, являющаяся кузенами 1-й или 2-й степени родства)
- Пары, в которых женщина-партнер имеет в анамнезе:
- Химиотерапия или облучение, которые влияют на овариальный резерв
- Операции на яичниках/придатках
- Эндометриоз
- Пары, в которых партнер-мужчина имеет в анамнезе:
- Химиотерапия / облучение, которые влияют на результат спермы
- Операция на яичках
- Вазэктомия
- Операция по обращению вазэктомии
- Сперма, полученная с помощью тонкоигольной аспирации (FNA) или экстракции сперматозоидов из яичек (TESE).
Учебный план
В этом разделе представлена подробная информация о плане исследования, в том числе о том, как планируется исследование и что оно измеряет.
Как устроено исследование?
Детали дизайна
Когорты и вмешательства
Группа / когорта |
Вмешательство/лечение |
|---|---|
|
DEG n1: эуплоидная среда
питательные среды, полученные из эуплоидных эмбрионов
|
Воздействие культурных сред
|
|
DEG n2: анеуплоидная среда
питательные среды, полученные из анеуплоидных эмбрионов
|
Воздействие культурных сред
|
|
DEG n3: эмбрионы с задержанным средним размером
питательные среды, полученные из задержанных эмбрионов
|
Воздействие культурных сред
|
|
DEG n4: контрольная культуральная среда
чистые питательные среды без контакта с эмбрионами
|
Воздействие культурных сред
|
Что измеряет исследование?
Первичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Изменение маркеров белка
Временное ограничение: 1 день
|
Изменение маркеров белка (PAR2, (p) и SGK1, NFkB, ORAI1-3 и STIM1-2 и COX2) с помощью вестерн-блоттинга
|
1 день
|
|
Изменение пиковых и наклонных уровней внутриклеточного кальция
Временное ограничение: 1 день
|
Изменение пиковых и наклонных уровней внутриклеточного кальция
|
1 день
|
|
Изменение морфологии клеток после инкубации с эмбриональными средами
Временное ограничение: 1 день
|
Изменение морфологии клеток после инкубации с эмбриональными средами
|
1 день
|
Вторичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Выполнение ИКСИ
Временное ограничение: 1 день
|
Определяется в день 0 как количество инъецированных ооцитов/количество КОК, отнесенных к группе ИКСИ
|
1 день
|
|
Качество эмбриона на 3-й день
Временное ограничение: 1 день
|
Определяется количеством бластомеров и характером их деления, фрагментацией, наличием уплотнения, вакуолей, грануляций и ядер
|
1 день
|
|
Качество эмбриона на 5-й день (Gardner and Schoolcraft, 1999).
Временное ограничение: 1 день
|
Гарднер и Скулкрафт, 1999 г.), определяемые:
|
1 день
|
Соавторы и исследователи
Здесь вы найдете людей и организации, участвующие в этом исследовании.
Спонсор
Соавторы
Следователи
- Главный следователь: Barbara Lawrenz, PhD, ART Fertility Clinics LLC
Публикации и полезные ссылки
Лицо, ответственное за внесение сведений об исследовании, добровольно предоставляет эти публикации. Это может быть что угодно, связанное с исследованием.
Общие публикации
- Heijnen EM, Eijkemans MJ, De Klerk C, Polinder S, Beckers NG, Klinkert ER, Broekmans FJ, Passchier J, Te Velde ER, Macklon NS, Fauser BC. A mild treatment strategy for in-vitro fertilisation: a randomised non-inferiority trial. Lancet. 2007 Mar 3;369(9563):743-749. doi: 10.1016/S0140-6736(07)60360-2.
- Wang H, Dey SK. Roadmap to embryo implantation: clues from mouse models. Nat Rev Genet. 2006 Mar;7(3):185-99. doi: 10.1038/nrg1808.
- Kaneko Y, Day ML, Murphy CR. Integrin beta3 in rat blastocysts and epithelial cells is essential for implantation in vitro: studies with Ishikawa cells and small interfering RNA transfection. Hum Reprod. 2011 Jul;26(7):1665-74. doi: 10.1093/humrep/der128. Epub 2011 Apr 30.
- Mertzanidou A, Wilton L, Cheng J, Spits C, Vanneste E, Moreau Y, Vermeesch JR, Sermon K. Microarray analysis reveals abnormal chromosomal complements in over 70% of 14 normally developing human embryos. Hum Reprod. 2013 Jan;28(1):256-64. doi: 10.1093/humrep/des362. Epub 2012 Oct 9.
- Teklenburg G, Salker M, Heijnen C, Macklon NS, Brosens JJ. The molecular basis of recurrent pregnancy loss: impaired natural embryo selection. Mol Hum Reprod. 2010 Dec;16(12):886-95. doi: 10.1093/molehr/gaq079. Epub 2010 Sep 16.
- Quenby S, Vince G, Farquharson R, Aplin J. Recurrent miscarriage: a defect in nature's quality control? Hum Reprod. 2002 Aug;17(8):1959-63. doi: 10.1093/humrep/17.8.1959.
- Aplin JD. Embryo implantation: the molecular mechanism remains elusive. Reprod Biomed Online. 2006 Dec;13(6):833-9. doi: 10.1016/s1472-6483(10)61032-2.
- Zhang S, Lin H, Kong S, Wang S, Wang H, Wang H, Armant DR. Physiological and molecular determinants of embryo implantation. Mol Aspects Med. 2013 Oct;34(5):939-80. doi: 10.1016/j.mam.2012.12.011. Epub 2013 Jan 2.
- Ruan YC, Guo JH, Liu X, Zhang R, Tsang LL, Dong JD, Chen H, Yu MK, Jiang X, Zhang XH, Fok KL, Chung YW, Huang H, Zhou WL, Chan HC. Activation of the epithelial Na+ channel triggers prostaglandin E(2) release and production required for embryo implantation. Nat Med. 2012 Jul;18(7):1112-7. doi: 10.1038/nm.2771.
- Rossier BC, Stutts MJ. Activation of the epithelial sodium channel (ENaC) by serine proteases. Annu Rev Physiol. 2009;71:361-79. doi: 10.1146/annurev.physiol.010908.163108.
- Marunaka Y, Niisato N. Effects of Ca(2+) channel blockers on amiloride-sensitive Na(+) permeable channels and Na(+) transport in fetal rat alveolar type II epithelium. Biochem Pharmacol. 2002 Apr 15;63(8):1547-52. doi: 10.1016/s0006-2952(02)00880-8.
- Salker MS, Hosseinzadeh Z, Alowayed N, Zeng N, Umbach AT, Webster Z, Singh Y, Brosens JJ, Lang F. LEFTYA Activates the Epithelial Na+ Channel (ENaC) in Endometrial Cells via Serum and Glucocorticoid Inducible Kinase SGK1. Cell Physiol Biochem. 2016;39(4):1295-306. doi: 10.1159/000447834. Epub 2016 Sep 8.
- Singh Y, Shi X, Zhang S, Umbach AT, Chen H, Salker MS, Lang F. Prolyl hydroxylase 3 (PHD3) expression augments the development of regulatory T cells. Mol Immunol. 2016 Aug;76:7-12. doi: 10.1016/j.molimm.2016.06.003. Epub 2016 Jun 19.
- Brosens JJ, Salker MS, Teklenburg G, Nautiyal J, Salter S, Lucas ES, Steel JH, Christian M, Chan YW, Boomsma CM, Moore JD, Hartshorne GM, Sucurovic S, Mulac-Jericevic B, Heijnen CJ, Quenby S, Koerkamp MJ, Holstege FC, Shmygol A, Macklon NS. Uterine selection of human embryos at implantation. Sci Rep. 2014 Feb 6;4:3894. doi: 10.1038/srep03894.
- Turco MY, Gardner L, Hughes J, Cindrova-Davies T, Gomez MJ, Farrell L, Hollinshead M, Marsh SGE, Brosens JJ, Critchley HO, Simons BD, Hemberger M, Koo BK, Moffett A, Burton GJ. Long-term, hormone-responsive organoid cultures of human endometrium in a chemically defined medium. Nat Cell Biol. 2017 May;19(5):568-577. doi: 10.1038/ncb3516. Epub 2017 Apr 10.
Даты записи исследования
Эти даты отслеживают ход отправки отчетов об исследованиях и сводных результатов на сайт ClinicalTrials.gov. Записи исследований и сообщаемые результаты проверяются Национальной медицинской библиотекой (NLM), чтобы убедиться, что они соответствуют определенным стандартам контроля качества, прежде чем публиковать их на общедоступном веб-сайте.
Изучение основных дат
Начало исследования (Действительный)
4 ноября 2021 г.
Первичное завершение (Действительный)
16 апреля 2023 г.
Завершение исследования (Действительный)
15 мая 2023 г.
Даты регистрации исследования
Первый отправленный
26 апреля 2021 г.
Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества
26 апреля 2021 г.
Первый опубликованный (Действительный)
29 апреля 2021 г.
Обновления учебных записей
Последнее опубликованное обновление (Действительный)
17 июля 2024 г.
Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества
16 июля 2024 г.
Последняя проверка
1 июля 2024 г.
Дополнительная информация
Термины, связанные с этим исследованием
Ключевые слова
Дополнительные соответствующие термины MeSH
Другие идентификационные номера исследования
- 2012-ABU-014-BL
Планирование данных отдельных участников (IPD)
Планируете делиться данными об отдельных участниках (IPD)?
НЕТ
Информация о лекарствах и устройствах, исследовательские документы
Изучает лекарственный продукт, регулируемый FDA США.
Нет
Изучает продукт устройства, регулируемый Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США.
Нет
Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .