子宮頸部上皮内腫瘍グレード2（CIN2）の発生を予測するバイオマーカー

はじめに 高リスクのヒトパピローマウイルス (hrHPV) による持続感染は、子宮頸がんの原因となります [1]。 子宮頸部上皮内腫瘍 CIN1 (低)、CIN2 (中等度)、CIN3 (重度) は、扁平上皮細胞株から進化した子宮頸部の前がん病変を定義します [3]。 CIN1 および CIN2 病変は、CIN3 よりも子宮頸がんの進行率が低い [4]。 CIN2 は、CIN1 様および CIN3 様の進行性病変の両方の異種発現により、臨床的に大きな課題をもたらします。現在の診断ツールでは、進行のリスクを層別化することはできません [5]。 CIN2 のリスク層別化は、CIN2 の臨床管理と過剰または過少治療のリスクを回避するために非常に重要です。 歴史的に、CIN2 は外科的管理 (円錐切除生検) の閾値でした。 しかし、CIN2 病変の退縮率が高く、錐体切除生検は早産などの生殖障害に関連しているため、デンマークなどの多くの国では、CIN2 の若い女性の管理においてより保守的なアプローチが採用されています (つまり、 積極的な監視：コルポスコピー、4～6か月ごとの子宮頸部パンチ生検、外科的処置なしの最大2年間のフォローアップ）[6,7]。 デンマークの中央地域では、1995 年以来、若い女性に対して積極的な監視が推奨されています。

p16 タンパク質は、細胞の調節と分化における阻害剤として重要な役割を果たします。 p16 は、hrHPV E6/E7 発癌活性および癌の進化に関連する細胞形質転換の一般的な代理マーカーです。 p16の上皮内発現レベルは、CIN病変のグレードと正の相関があり、p16INK4a免疫組織化学バイオマーカーによって検出される可能性があります[7、8]。 p16INK4a バイオマーカーは、子宮頸部の前がん病変の診断と等級付けに付加価値をもたらしますが、このバイオマーカーは CIN2 のリスク層別化には十分ではありません [9]。

最近の研究では、新規バイオマーカー HPV E4 が、CIN1 様と CIN3 様の類似病変において CIN2 を区別する可能性があることが示されています。 HPV E4 が CIN2 のリスク層別化のための潜在的なバイオマーカーになる可能性があることを示唆しています [10-12]。

ただし、CIN2 進化の予測因子としての HPV E4 に関する知識は不足しています。

目的 HPV E4 バイオマーカーが CIN2 進化のリスクを予測できるかどうかを調べること。

材料と方法 研究デザイン：歴史的コホート研究。 研究集団：オーフス大学病院病理学科のデンマーク病理データバンク[2000-2010]にCIN2の記録がある23-40歳のN=500人の女性。 すべての女性は、積極的な監視によって管理されていると定義されています（つまり、 コルポスコピーおよび子宮頸部パンチ生検を 4 ～ 6 か月ごとに、最長 2 年間のフォローアップで）。

選択：2000年から2010年の間にCIN2診断の記録を持つすべての女性の中から、付随的なCIN2診断の記録を持つ適格な女性がデンマーク病理データバンクで特定されます。

実験室での分析: ホルマリン固定パラフィン包埋 (FFPE) 組織サンプルは、オーフス大学病院病理学科のアーカイブから編集されます。

FFPE ブロックは、形態分析 (ヘマトキシリン & エオシン (H&E)) および免疫組織化学分析 (IHC) のために切断されます。 CINtec® Histology Kit (Roche) および SILgrade E4 アッセイ (LBP) を使用して、p16INK4a および HPV E4 IHC 分析にサンドイッチ法を適用します。 その後、染色されたスライドは、婦人科病理学の専門家パネルによって評価されます (それぞれデンマークから 2 つ、英国から 1 つ、米国から 1 つ)。

暴露は、HPV E4 陽性 (CIN1 様) 対 HPV E4 陰性 (CIN3 様) の上皮内反応の発現として定義されます。

統計分析: 線形回帰モデル、効果測定;相対リスク (RR) (95% CI)。

検出力の計算: N=500 人の女性のサンプル サイズで、有意水準 0.05 (アルファ) で 89% の統計的検出力が期待されます。 サーベイランス中に進行または持続する女性では、50% の CIN2 HPV E4 陽性病変および 70% の p16INK4a 陽性 CIN2 病変の有病率が予想されます。

設定と協力者 このプロジェクトは、DDL 診断研究所を含むオーフス大学病院の病理学科と緊密に協力して、Gødstrup 病院の婦人科および産科で実施されます。バージニア大学;ケンブリッジ大学とメリーランド大学医学部。

デンマークの主な研究グループ

1. 准教授、医学博士、Anne Hammer Lauridsen、婦人科および産科、Gødstrup 病院、デンマーク中部地域およびオーフス大学臨床医学科
2. オーデンセ大学病院婦人科および産科、南デンマーク大学 OPEN の Lone Kjeld Pedersen 教授。
3. 教授、MD、トーベン シュタイニケ、オーフス大学病院病理学科およびオーフス大学臨床医学科教授。
4. Ph.d-student, Msch Health Science, Rikke Damgaard, Department of Gynecology and Obstetrics, Gødstrup Hospital, Central Region of Denmark & Department of Clinical Medicine, Aarhus University.

倫理的声明 この研究は、デンマークの中央地域の健康研究倫理に関する地域委員会によって承認され、デンマークの法律で義務付けられているように、オーフス大学の健康学部の法務部に登録されています。

CIN2病変のリスク層別化に信頼できるバイオマーカーは、女性の臨床カウンセリングにとって重要です。これにより、過剰または過少治療のリスクを回避するためのより具体的でパーソナライズされたフォローアップ戦略が可能になります。 CIN2 を持つ若い女性の管理に関して、他の国がより保守的なアプローチ (積極的な監視) に向かっているため、私たちの結果は国際的な観点からも価値があるかもしれません.